Analyse des variations génétiques chez les patients atteints de péri-implantite

L'étude sera menée selon les principes de la Déclaration d'Helsinki (révisée en 2013). Des mesures appropriées seront prises pour la protection des données des patients. L'étude a été approuvée par le conseil scientifique de l'Instituto Universitário Egas Moniz (IUEM) le 3 juillet 2019 et l'approbation du comité d'éthique d'Egas Moniz a été reçue le 24 juillet 2019. L'autorisation a également été obtenue par la direction clinique de la clinique dentaire Egas Moniz pour effectuer des travaux de recherche à la clinique de l'université.

L'étude sera composée de deux groupes, le premier composé de patients atteints de péri-implantite (saignement et/ou suppuration au sondage, profondeur de sondage (PD) égale ou supérieure à 6mm et perte osseuse égale ou supérieure à 3mm) et le second groupe (groupe témoin) formé de patients en santé péri-implantaire (muqueuse péri-implantaire sans signes inflammatoires et absence de perte osseuse péri-implantaire). La définition de la péri-implantite et de la santé péri-implantaire sera conforme à la nouvelle classification des maladies parodontales et péri-implantaires (American Academy of Periodontology (AAP) et European Federation of Periodontology (EFP) 2017)

Un examen de sondage péri-implantaire (6 emplacements avec une sonde parodontale graduée CP12) et une évaluation de l'accumulation de plaque et des indices gingivaux (4 emplacements) seront effectués comme d'habitude lors des rendez-vous de maintenance implantaire. La présence de saignement au sondage ou de pus sera également évaluée. Une radiographie de contrôle de l'implant sera prise dans les cas où la profondeur de sondage est supérieure à 6 mm. Toutes les données cliniques seront recueillies par le même examinateur. Avant l'étude, un exercice de formation et d'étalonnage sera effectué pour les mesures de PD en utilisant des patients non inclus dans l'étude.

L'état parodontal des patients sera également évalué. Pour considérer la santé parodontale, les patients doivent avoir les caractéristiques cliniques suivantes : jusqu'à 10 % des localisations avec saignement au sondage, absence d'érythème et d'œdème, absence de symptômes du patient, absence de perte d'attache clinique et de perte osseuse et PD < 3 mm (AAP et PEF 2017). Un patient est un cas de parodontite si : la perte d'attache clinique interdentaire est détectable sur au moins 2 dents non adjacentes, ou la perte d'attache clinique buccale ou buccale > 3 mm avec poches > 3 mm est détectable sur au moins 2 dents. La classification de la parodontite se fera sur un système de stadification et de classement multidimensionnel.

Dans le cas d'une situation de santé péri-implantaire, des mesures de contrôle de la plaque seront prises, tandis qu'en cas de péri-implantite, le patient sera référé pour un rendez-vous de traitement spécifique. Dans les situations de patients avec plus d'un implant affecté par la péri-implantite, celui avec la plus grande perte osseuse sera choisi pour l'étude.

L'analyse génétique se fera au Laboratoire de Biologie Moléculaire de l'IUEM avec la technique d'extraction d'ADN suivie d'une réaction en chaîne par polymérase suivie d'un polymorphisme de longueur des fragments de restriction.

Pour l'analyse biochimique, les bandes de papier seront insérées dans le sillon/poche péri-implantaire jusqu'à ce qu'une résistance se fasse sentir, en attendant 30 secondes avant de les retirer. Les échantillons visuellement contaminés (sang) seront jetés. Par la suite, des bandes de papier seront placées sur Periotron® 8000 (Periotron Ide-interstate, NY, USA) pour la quantification du volume de liquide créviculaire péri-implantaire collecté. Les bandes de papier seront ensuite placées dans des tubes Eppendorf avec filtre et congelées à -80°C jusqu'à leur expédition à l'Université Complutense de Madrid. Dans cette université, la concentration des médiateurs inflammatoires IL-1 bêta et TNF alpha sera analysée à l'aide d'immunodosages multiplexés à sphère fluorescente utilisant le système Luminex® 100/200™ et PGE2 par dosage immuno-enzymatique (ELISA).

La prévalence des polymorphismes du groupe de gènes IL-1 chez les patients atteints de péri-implantite et chez les patients sains sera comparée en utilisant des méthodologies statistiques inférentielles appropriées (analyse bivariée/tests d'association), en tenant compte de plusieurs variables sociodémographiques et cliniques : statut tabagique, sexe, âge. et antécédents de parodontite. Sur la base d'une taille d'effet moyenne (w = 0,3), avec une puissance de 80 % et un niveau alpha de 5 %, la taille de l'échantillon pour cette étude a été calculée comme n = 88, donc, n = 44 pour chaque groupe (péri-implantite et santé péri-implantaire). En outre, un modèle logistique de régression multivariable sera construit afin d'évaluer l'effet de ces covariables et de quantifier le risque, par la détermination de l'Odds Ratio (OR) ajusté correspondant, vers la présence de péri-implantite. De plus, les niveaux des marqueurs de réponse inflammatoire IL-1 bêta, PGE2 et TNF-alpha, présents dans le liquide créviculaire péri-implantaire, seront comparés entre le groupe de patients atteints de péri-implantite et les patients porteurs d'implants oraux sains, en prenant en compte les variables mentionnées ci-dessus, en utilisant des méthodologies statistiques inférentielles appropriées (tests paramétriques/non paramétriques). Toutes les analyses inférentielles seront effectuées à un niveau de signification de 5 %.