Análisis de variaciones genéticas en pacientes con periimplantitis

El estudio se llevará a cabo de acuerdo con los principios de la Declaración de Helsinki (revisada en 2013). Se tomarán las medidas oportunas para la protección de los datos de los pacientes. El estudio fue aprobado por el Consejo Científico del Instituto Universitário Egas Moniz (IUEM) el 3 de julio de 2019 y la aprobación del Comité de Ética de Egas Moniz se recibió el 24 de julio de 2019. También se obtuvo la autorización por parte de la Dirección Clínica de la Clínica Odontológica Egas Moniz para realizar trabajos de investigación en la Clínica de la Universidad.

El estudio constará de dos grupos, el primero formado por pacientes con periimplantitis (sangrado y/o supuración al sondaje, profundidad de sondaje (DP) igual o superior a 6mm y pérdida ósea igual o superior a 3mm) y el segundo grupo (grupo control) formado por pacientes con salud periimplantaria (mucosa periimplantaria sin signos inflamatorios y ausencia de pérdida ósea periimplantaria). La definición de periimplantitis y salud periimplantaria estará de acuerdo con la nueva clasificación de enfermedades periodontales y periimplantarias (American Academy of Periodontology (AAP) y European Federation of Periodontology (EFP) 2017)

Se realizará un examen de sondaje periimplantario (6 ubicaciones con una sonda periodontal graduada CP12) y una evaluación de la acumulación de placa y los índices gingivales (4 ubicaciones) como de costumbre en las citas de mantenimiento de implantes. También se valorará la presencia de sangrado al sondaje o pus. Se realizará una radiografía de control del implante en los casos en los que exista una profundidad de sondaje superior a 6 mm. Todos los datos clínicos serán recogidos por el mismo examinador. Previo al estudio, se realizará un ejercicio de entrenamiento y calibración de las medidas de DP con pacientes no incluidos en el estudio.

También se evaluará la condición periodontal de los pacientes. Para considerar salud periodontal, los pacientes deben tener las siguientes características clínicas: hasta un 10% de localizaciones con sangrado al sondaje, ausencia de eritema y edema, ausencia de síntomas del paciente, ausencia de pérdida de inserción clínica y pérdida ósea y PD < 3mm (AAP y EFP 2017). Un paciente es un caso de periodontitis si: la pérdida de inserción clínica interdental es detectable en al menos 2 dientes no adyacentes, o la pérdida de inserción clínica bucal u oral > 3 mm con bolsas > 3 mm es detectable en al menos 2 dientes. La clasificación de la periodontitis se realizará en un sistema multidimensional de estadificación y clasificación.

En el caso de una situación de salud periimplantaria se tomarán medidas de control de placa, mientras que en los casos de periimplantitis se derivará al paciente para una cita de tratamiento específico. En situaciones de pacientes con más de un implante afectado por periimplantitis, se elegirá para el estudio el que presente mayor pérdida ósea.

El análisis genético se realizará en el Laboratorio de Biología Molecular del IUEM con la técnica de extracción de ADN seguida de reacción en cadena de la polimerasa seguida de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción.

Para el análisis bioquímico, las tiras de papel se insertarán en el surco/bolsa periimplantario hasta sentir resistencia, esperando 30 segundos antes de retirarlas. Las muestras visualmente contaminadas (sangre) serán descartadas. Posteriormente, se colocarán tiras de papel en Periotron® 8000 (Periotron Ide-interstate, NY, EE. UU.) para la cuantificación del volumen de líquido crevicular periimplantario recogido. A continuación, las tiras de papel se colocarán en tubos eppendorf con filtro y se congelarán a -80ºC hasta su envío a la Universidad Complutense de Madrid. En esta universidad se analizará la concentración de los mediadores inflamatorios IL-1 beta y TNF alfa mediante inmunoensayos de esferas fluorescentes multiplexadas mediante el sistema Luminex® 100/200™ y PGE2 por ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).

Se comparará la prevalencia de polimorfismos del grupo del gen IL-1 en pacientes con periimplantitis y sanos utilizando metodologías estadísticas inferenciales apropiadas (análisis bivariado/pruebas de asociación), teniendo en cuenta diversas variables sociodemográficas y clínicas: tabaquismo, sexo, edad y antecedentes de periodontitis. Basado en un tamaño de efecto medio (w=0.3), con una potencia del 80% y un nivel alfa del 5%, el tamaño de la muestra para este estudio se calculó como n=88, por lo tanto, n= 44 para cada grupo (periimplantitis y salud periimplantaria). Además, se construirá un modelo logístico de regresión multivariable para evaluar el efecto de dichas covariables y cuantificar el riesgo, mediante la determinación del Odds Ratio (OR) ajustado correspondiente, hacia la presencia de periimplantitis. Además, se compararán los niveles de los marcadores de respuesta inflamatoria IL-1 beta, PGE2 y TNF-alfa, presentes en el fluido crevicular periimplantario, entre el grupo de pacientes con periimplantitis y los pacientes con implantes orales sanos, tomando en cuenta las variables antes mencionadas, mediante el uso de metodologías estadísticas inferenciales apropiadas (pruebas paramétricas/no paramétricas). Todo el análisis inferencial se realizará a un nivel de significancia del 5%.