Analyse av genetiske variasjoner hos pasienter med peri-implantitt

Studien vil bli utført i henhold til prinsippene i Helsingfors-erklæringen (evaluert i 2013). Det vil bli iverksatt hensiktsmessige tiltak for beskyttelse av pasientdata. Studien ble godkjent av Instituto Universitário Egas Moniz (IUEM) Scientific Council 3. juli 2019 og godkjenningen av Egas Moniz' etiske komité ble mottatt 24. juli 2019. Autorisasjon ble også oppnådd av den kliniske avdelingen ved Egas Moniz tannklinikk til å utføre forskningsarbeid ved universitetets klinikk.

Studien vil bestå av to grupper, den første består av pasienter med peri-implantitt (blødning og/eller suppurasjon ved sondering, sonderingsdybde (PD) lik eller større enn 6 mm og bentap lik eller større enn 3 mm) og den andre gruppen (kontrollgruppe) dannet av pasienter med periimplantat helse (periimplantatslimhinne uten inflammatoriske tegn og fravær av peri-implantat bentap). Definisjonen av peri-implantitt og peri-implantat helse vil være i samsvar med den nye klassifiseringen av periodontale og peri-implantatsykdommer (American Academy of Periodontology (AAP) og European Federation of Periodontology (EFP) 2017)

En peri-implantat sonderende undersøkelse (6 steder med en CP12 gradert periodontal probe) og evaluering av plakkakkumulering og gingivalindekser (4 steder) vil bli utført som vanlig ved implantatvedlikeholdsavtaler. Tilstedeværelsen av blødning ved sondering eller puss vil også bli evaluert. Et implantatkontrollrøntgenbilde vil bli tatt i tilfeller der det er en sonderingsdybde på mer enn 6 mm. Alle kliniske data vil bli samlet inn av samme undersøker. Før studien vil det bli utført en trenings- og kalibreringsøvelse for PD-målinger ved bruk av pasienter som ikke er inkludert i studien.

Den periodontale tilstanden til pasientene vil også bli evaluert. For å vurdere periodontal helse bør pasienter ha følgende kliniske karakteristika: opptil 10 % av lokalitetene med blødning ved sondering, fravær av erytem og ødem, fravær av pasientsymptomer, fravær av klinisk tilknytningstap og bentap og PD < 3 mm (AAP og EFP 2017). En pasient er et tilfelle av periodontitt hvis: interdentalt klinisk festetap kan påvises med minst 2 ikke-tilstøtende tenner, eller bukkalt eller oralt klinisk festetap >3 mm med lommer >3 mm kan påvises med minst 2 tenner. Klassifiseringen av periodontitt vil bli gjort på et flerdimensjonalt iscenesettelses- og graderingssystem.

Ved en periimplantat helsesituasjon vil det bli tatt plakkkontrolltiltak, mens ved periimplantitt vil pasienten bli henvist til en spesifikk behandlingstime. I situasjoner med pasienter med mer enn ett implantat påvirket av periimplantitt, vil den med størst bentap bli valgt for studien.

Den genetiske analysen vil bli gjort ved IUEM Molecular Biology Laboratory med DNA-ekstraksjonsteknikken etterfulgt av polymerasekjedereaksjon etterfulgt av restriksjonsfragmentlengdepolymorfisme.

For den biokjemiske analysen vil papirstrimlene settes inn i peri-implantatets sulcus/lommen inntil motstand merkes, mens man venter 30 sekunder før fjerning. Visuelt forurensede prøver (blod) vil bli kastet. Deretter vil papirstrimler bli plassert på Periotron® 8000 (Periotron Ide-interstate, NY, USA) for kvantifisering av det oppsamlede peri-implantatet crevikulære væskevolumet. Papirstrimlene vil deretter legges i eppendorf-rør med filter og fryses ved -80ºC frem til sending til Universidad Complutense de Madrid. Ved dette universitetet vil konsentrasjonen av inflammatoriske mediatorer IL-1 beta og TNF alfa bli analysert ved hjelp av multipleksede fluorescerende sfære-immunoassays ved bruk av Luminex® 100/200™-systemet og PGE2 ved enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA).

Prevalensen av IL-1-gengruppepolymorfismer hos pasienter med peri-implantitt og friske vil bli sammenlignet ved å bruke passende inferensielle statistikkmetoder (bivariate analyse/assosiasjonstester), som tar hensyn til flere sosiodemografiske og kliniske variabler: røykestatus, kjønn, alder og historie med periodontitt. Basert på en middels effektstørrelse (w=0,3), med 80 % kraft og 5 % alfa-nivå ble prøvestørrelsen for denne studien beregnet til n=88, og dermed n=44 for hver gruppe (periimplantitt og periimplantathelse). Videre vil en multivariabel regresjonslogistisk modell bli konstruert for å evaluere effekten av disse kovariablene og kvantifisere risikoen, gjennom bestemmelse av korrespondentjustert Odds Ratio (OR), mot tilstedeværelsen av peri-implantitt. I tillegg vil nivåene av de inflammatoriske responsmarkørene IL-1 beta, PGE2 og TNF-alfa, som er tilstede i peri-implantatet crevikulær væske, sammenlignes mellom gruppen pasienter med peri-implantitt og pasientene med friske orale implantater, som tar ta hensyn til de ovennevnte variablene, ved å bruke passende inferensielle statistikkmetoder (parametriske/ikke-parametriske tester). All inferensiell analyse vil bli utført på et 5 % signifikansnivå.