Geneettisten variaatioiden analyysi potilailla, joilla on peri-implantiitti

Tutkimus toteutetaan Helsingin julistuksen (tarkistettu 2013) periaatteiden mukaisesti. Asianmukaisiin toimenpiteisiin ryhdytään potilastietojen suojaamiseksi. Tutkimus hyväksyttiin Instituto Universitário Egas Monizin (IUEM) tieteellisessä neuvostossa 3.7.2019 ja Egas Monizin eettisen komitean hyväksyntä saatiin 24.7.2019. Myös Egas Monizin Hammasklinikan kliininen johto sai luvan tehdä tutkimustyötä yliopiston klinikalla.

Tutkimus koostuu kahdesta ryhmästä, joista ensimmäinen koostuu potilaista, joilla on periimplantiitti (verenvuoto ja/tai märkiminen koetuksella, koetussyvyys (PD) vähintään 6 mm ja luukato vähintään 3 mm) ja toinen ryhmä. (verrokkiryhmä), jonka muodostavat potilaat, joilla on peri-implanttiterveys (implanttia ympäröivä limakalvo ilman tulehduksellisia merkkejä ja implanttia ympäröivän luukadon puuttuminen). Peri-implantiitin ja peri-implantaattien terveyden määritelmä on uuden parodontaali- ja peri-implanttisairauksien luokituksen (American Academy of Periodontology (AAP) ja European Federation of Periodontology (EFP) 2017) mukainen.

Implanttia ympäröivä koetustutkimus (6 paikkaa CP12-mittaisella periodontaalisella koettimella) sekä plakin kertymisen ja ienindeksien arviointi (4 paikkaa) suoritetaan tavalliseen tapaan implantin huoltokäynneillä. Myös verenvuodon esiintyminen koettimessa tai mädässä arvioidaan. Implanttikontrolliröntgenkuva otetaan tapauksissa, joissa mittaussyvyys on yli 6 mm. Kaikki kliiniset tiedot kerää sama tutkija. Ennen tutkimusta suoritetaan koulutus- ja kalibrointiharjoitus PD-mittauksia varten potilailla, jotka eivät ole mukana tutkimuksessa.

Myös potilaiden periodontaalin tila arvioidaan. Parodontaalin terveyden huomioon ottamiseksi potilailla tulee olla seuraavat kliiniset ominaisuudet: jopa 10 %:lla paikoista, joissa verenvuotoa koettaessa, punoitusta ja turvotusta ei ole, potilasoireiden puuttuminen, kliinisen kiinnittymisen ja luukadon puuttuminen ja PD < 3 mm (AAP ja EFP 2017). Potilas on parodontiittitapaus, jos: kliinisen kliinisen kiinnittymisen katkeaminen hampaiden välillä on havaittavissa vähintään 2 ei vierekkäistä hammasta tai posken tai suun kliinisen kiinnittymisen menetys > 3 mm taskuissa > 3 mm on havaittavissa vähintään 2 hampaasta. Parodontiitin luokittelu tehdään moniulotteisella luokitus- ja luokitusjärjestelmällä.

Peri-implanttiterveystilanteessa ryhdytään plakintorjuntatoimenpiteisiin, kun taas peri-implantiittitapauksissa potilas ohjataan erityiselle hoitoajalle. Tilanteissa, joissa potilaalla on useampi kuin yksi peri-implantitista kärsivä implantti, tutkimukseen valitaan se, jonka luukato on suurin.

Geneettinen analyysi tehdään IUEM:n molekyylibiologian laboratoriossa DNA-uuttotekniikalla, jota seuraa polymeraasiketjureaktio ja sen jälkeen restriktiofragmentin pituuden polymorfismi.

Biokemiallista analyysiä varten paperinauhat työnnetään implanttia ympäröivään uurteeseen/taskuun, kunnes vastus tuntuu, odota 30 sekuntia ennen poistamista. Visuaalisesti saastuneet näytteet (veri) hävitetään. Myöhemmin paperinauhat asetetaan Periotron® 8000:lle (Periotron Ide-interstate, NY, USA) kerätyn peri-implantaattisen rakonesteen tilavuuden kvantifioimiseksi. Paperinauhat laitetaan sitten eppendorf-putkiin, joissa on suodatin, ja pakastetaan -80 ºC:een, kunnes ne lähetetään Universidad Complutense de Madridiin. Tässä yliopistossa tulehdusvälittäjien IL-1 beetan ja TNF-alfan pitoisuudet analysoidaan käyttämällä multipleksoituja fluoresoiva pallo-immunomäärityksiä Luminex® 100/200™ -järjestelmällä ja PGE2 entsyymi-immunosorbenttimäärityksellä (ELISA).

IL-1-geeniryhmän polymorfismien esiintyvyyttä periimplantitista sairastavilla ja terveillä potilailla verrataan käyttämällä asianmukaisia ​​päätelmätilastomenetelmiä (kaksimuuttujaanalyysi/assosiaatiotestit) ottaen huomioon useita sosiodemografisia ja kliinisiä muuttujia: tupakointitila, sukupuoli, ikä. ja parodontiittihistoria. Perustuu keskikokoiseen tehosteen kokoon (w=0,3), 80 % teholla ja 5 % alfatasolla tämän tutkimuksen otoskoko laskettiin n = 88, joten n = 44 jokaiselle ryhmälle (periimplantit ja peri-implantaattien terveys). Lisäksi rakennetaan monimuuttujainen regressiologistinen malli näiden yhteismuuttujien vaikutuksen arvioimiseksi ja riskin kvantifioimiseksi määrittämällä vastaava mukautettu kerroinsuhde (OR) peri-implantiitin esiintymiseen. Lisäksi verrataan peri-implantaattia sairastavien potilaiden ryhmän ja terveiden suuimplantaattien kanssa tulehdusvastemarkkerien IL-1 beetan, PGE2:n ja TNF-alfan pitoisuuksia implanttia ympäröivässä crevicular nesteessä. ottaa huomioon edellä mainitut muuttujat käyttämällä asianmukaisia ​​päättelytilastomenetelmiä (parametriset/ei-parametriset testit). Kaikki päättelyanalyysit suoritetaan 5 %:n merkitsevyystasolla.