Analys av genetiska variationer hos patienter med peri-implantit

Studien kommer att genomföras enligt principerna i Helsingforsdeklarationen (reviderad 2013). Lämpliga åtgärder kommer att vidtas för att skydda patientuppgifter. Studien godkändes av Instituto Universitário Egas Moniz (IUEM) vetenskapliga råd den 3 juli 2019 och godkännandet av Egas Moniz etiska kommitté mottogs den 24 juli 2019. Tillstånd erhölls också av den kliniska ledningen vid Egas Moniz tandvårdsklinik för att utföra forskningsarbete vid universitetets klinik.

Studien kommer att bestå av två grupper, den första består av patienter med peri-implantit (blödning och/eller suppuration vid sondering, sonderingsdjup (PD) lika med eller större än 6 mm och benförlust lika med eller större än 3 mm) och den andra gruppen (kontrollgrupp) bildad av patienter med peri-implantat hälsa (periimplantat slemhinna utan inflammatoriska tecken och frånvaro av peri-implantat benförlust). Definitionen av peri-implantit och peri-implantat hälsa kommer att vara i enlighet med den nya klassificeringen av periodontala och peri-implantatsjukdomar (American Academy of Parodontology (AAP) och European Federation of Parodontology (EFP) 2017)

En peri-implantat sonderingsundersökning (6 platser med en CP12 graderad periodontal sond) och utvärdering av plackackumulering och gingivalindex (4 platser) kommer att utföras som vanligt vid implantatunderhållsmöten. Förekomsten av blödning vid sondering eller pus kommer också att utvärderas. En implantatkontrollröntgenbild kommer att tas i fall där det finns ett sonderingsdjup på mer än 6 mm. Alla kliniska data kommer att samlas in av samma granskare. Inför studien kommer en tränings- och kalibreringsövning att utföras för PD-mätningar med patienter som inte ingår i studien.

Det parodontala tillståndet hos patienterna kommer också att utvärderas. För att överväga periodontal hälsa bör patienter ha följande kliniska egenskaper: upp till 10 % av platserna med blödning vid sondering, frånvaro av erytem och ödem, frånvaro av patientsymptom, frånvaro av klinisk anknytningsförlust och benförlust och PD < 3 mm (AAP och EFP 2017). En patient är ett fall av parodontit om: interdental klinisk fästförlust kan detekteras med minst 2 icke-intilliggande tänder, eller buckal eller oral klinisk fästförlust >3 mm med fickor >3 mm kan detekteras med minst 2 tänder. Klassificeringen av parodontit kommer att göras på ett multidimensionellt stadie- och graderingssystem.

Vid en periimplantat hälsosituation kommer plackkontrollåtgärder att vidtas medan patienten vid periimplantit remitteras till ett specifikt behandlingstillfälle. I situationer där patienter med mer än ett implantat drabbats av periimplantit, kommer den med störst benförlust att väljas för studien.

Den genetiska analysen kommer att göras vid IUEM Molecular Biology Laboratory med DNA-extraktionsteknik följt av polymeraskedjereaktion följt av restriktionsfragmentlängdpolymorfism.

För den biokemiska analysen kommer pappersremsorna att föras in i peri-implantatets sulcus/ficka tills motstånd känns, väntar 30 sekunder innan de tas bort. Visuellt förorenade prover (blod) kommer att kasseras. Därefter kommer pappersremsor att placeras på Periotron® 8000 (Periotron Ide-interstate, NY, USA) för kvantifiering av den uppsamlade peri-implantatets crevikulära vätskevolymen. Pappersremsorna kommer sedan att placeras i eppendorf-rör med filter och frysas vid -80ºC fram till leverans till Universidad Complutense de Madrid. Vid detta universitet kommer koncentrationen av inflammatoriska mediatorer IL-1 beta och TNF alfa att analyseras med hjälp av multiplexerade fluorescerande sfäriska immunanalyser med hjälp av Luminex® 100/200™-systemet och PGE2 genom enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA).

Prevalensen av IL-1-gengruppspolymorfismer hos patienter med periimplantit och friska kommer att jämföras med hjälp av lämpliga inferentiella statistikmetoder (bivariat analys/associationstester), med hänsyn till flera sociodemografiska och kliniska variabler: rökstatus, kön, ålder och historia av parodontit. Baserat på en medeleffektstorlek (w=0,3), med 80 % effekt och en alfanivå på 5 % beräknades provstorleken för denna studie som n=88, alltså n=44 för varje grupp (periimplantit och periimplantathälsa). Vidare kommer en multivariabel regressionslogistisk modell att konstrueras för att utvärdera effekten av dessa kovariabler och kvantifiera risken, genom bestämning av den korrespondentjusterade Odds Ratio (OR), mot närvaron av peri-implantit. Dessutom kommer nivåerna av de inflammatoriska svarsmarkörerna IL-1 beta, PGE2 och TNF-alfa, som finns i peri-implantatets crevikulära vätska, att jämföras mellan gruppen patienter med peri-implantit och patienter med friska orala implantat. ta hänsyn till ovan nämnda variabler, genom att använda lämpliga inferentiella statistikmetoder (parametriska/icke-parametriska test). All slutledningsanalys kommer att utföras med en signifikansnivå på 5 %.