补充 25-OH 维生素 D 的免疫调节作用 (SCLERODERMA)
成人硬皮病和维生素 D 缺乏症补充 25 oh 维生素 D 的免疫调节作用
介绍。 系统性硬化症 (SSc) 中皮肤纤维化的增厚可通过日晒降低维生素 D 的内源性可用性。 维生素 D 缺乏症在自身免疫性疾病如 SSc 中的患病率很高。 胆钙化醇有助于改善 TH1/Th2/Treg 的平衡,有利于抗炎和抗纤维化。
目的。分析短期补充胆钙化醇对 SSc 患者 Th1、Th2 和 Treg 细胞亚群细胞因子谱的影响。
方法。 在签署知情同意书的 SSc (ACR-EULAR 2015) 患者中进行随机临床试验。 一般特征、通过 Medsger 疾病严重程度量表 (MsDSS) 和细胞因子 Th1、Th2 和 Treg 评分的器官受累严重程度将是确定的。
所有数据将使用 SPSS 软件进行分析。 它将使用正态分布变量的参数统计和自由分布的非参数统计。
研究概览
详细说明
该研究将在当地研究和伦理委员会的事先授权下进行。 有权享受我们的医疗保健服务并符合筛选标准的患者将被包括在内。
我们数据库中的硬皮病患者将被邀请通过电话参与研究。 符合筛选标准并同意参与研究的患者将被告知日期。
在访谈当天,他们将获得知情同意书。 一旦签署,他们将被要求完成临床记录,并收集血清样本用于生化测定,包括维生素 D 状态。
一旦患者完成初步评估,将在两周后安排另一次访问。 维生素 D 缺乏症患者将被随机分配到两组之一:第 1 组。补充维生素 D3 和第 2 组。饮食建议。 两组接受指导以遵循饮食建议或接受维生素 D3 补充并完成医学测量。 此外,研究人员还包括维生素 D 充足的 SSc 患者和另一名健康供体的患者。
在第二次就诊时(4 周后),将记录临床数据和以下参数: 钙、磷、通过 quimioluniscencia 检测的甲状旁腺激素 通过 ELISA 检测的 25-羟基维生素 D 血清状态、细胞内细胞因子(IL-2、INF-γ、IL- 4 和 IL-10) 通过流式细胞术从 Th1、Th2 和 Treg 淋巴细胞中产生。
第 1 组。在 4 周内每天口服 5,000 UI 维生素 D3。
第 2 组。饮食建议根据 4 周期间食物中维生素 D 的正常每日摄入量的建议。
此外,研究人员将维生素 D 充足的 SSc 组和健康供体作为比较对象。
每组都将收到有关药物使用的书面说明。 在补充结束时,将安排另一次访问以检查治疗依从性(将计算剩余的胶囊),患者将完成第二次临床评估和钙、磷、甲状旁腺激素通过 quimioluniscencia 25-羟基维生素 D 血清状态通过 ELISA,细胞内通过流式细胞术从 Th1、Th2 和 Treg 淋巴细胞产生细胞因子(IL-2、INF-γ、IL-4 和 IL-10)。 最后将进行统计分析。
参与者还将被要求填写一份记录症状和潜在不良事件的表格。
淋巴细胞分离通过密度梯度离心法(Ficoll-Hypaque;Sigma-Aldrich)从新鲜抽取的静脉血中分离外周血单核细胞(PBMC)。 PBMC(1x106 个细胞/试管)中的细胞内细胞因子产生在 37ºC 下用来自链霉菌群(1μg/ 1 x106 个细胞,Sigma-Aldrich)的离子霉素钙盐、Brefeldin A(10μg/1 x106 个细胞,Cayman 化学公司)和phorbol-12-myristate-13-acetate(PMA-25ng/1 x106 细胞,Sigma-Aldrich)。
T 细胞的细胞表面和细胞内染色 PBMC 用 (PBS) 磷酸盐缓冲盐水 (pH 7.2) (Thermo Fisher Scientific) 重悬,并用含有异硫氰酸荧光素 (FITC)、多甲苷叶绿素蛋白复合物 (PerCP) 的单克隆偶联抗体染色,藻红蛋白 (PE) 或别藻蓝蛋白 (APC),并针对 CD69 (L/78)、CD25、CD3、CD4(BD PharmigenTM 和 BD Bioscience)处理 20 分钟。 对于 IL-4 (BD PharmigenTM)、IL-2、INF-γ (BD Fast Immune)、FoxP3 (Affymetrix) 和 IL10 (eBioscinence) 的细胞内染色,先前使用固定缓冲液 (BioLegend) 在室温下固定细胞 20 分钟温度,然后根据制造商的方案用透化缓冲液(Perm/Wash Buffer BD Pharmigen TM)进行洗涤步骤,然后将染色细胞与单克隆抗体在室温下孵育 20 分钟,并重悬于 PBS 缓冲液中。 通过流式细胞术对 Th1、Th2 和 Treg 亚群的评估确定为 Th1 淋巴细胞的 IL-2+ 和 INF-γ+ 百分比表达,Th2 的 IL-4+ 和 CD3 中 Treg 的 CD25+FoxP3+IL-10+ +CD4+门。 使用四参数流式细胞仪 FACS Calibur 使用 ProCellQuest 软件(Beckman Coulter;BD Biosciences)和 Flowing 软件(版本 2.5.1)获取和分析数据 细胞成像核心。
研究类型
注册 (实际的)
阶段
- 不适用
联系人和位置
学习地点
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Mexico City、墨西哥、02990
- Instituto Mexicano del Seguro Social
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参与标准
资格标准
适合学习的年龄
接受健康志愿者
有资格学习的性别
描述
纳入标准:
- 根据 2013 年美国风湿病学会/欧洲抗风湿病联盟 (ACR/EULAR 2013) SSc 分类标准的硬皮病个体。
排除标准:
- 数据不足,无法进行分类
- 任何急性细菌感染
- 肾功能异常
- 合并症
- 其他慢性病退行性疾病,如糖尿病和恶性肿瘤
- 在上个月接受过生物治疗或吗替麦考酚酯的受试者。
学习计划
研究是如何设计的?
设计细节
- 主要用途:治疗
- 分配:随机化
- 介入模型:平行线
- 屏蔽:单身的
武器和干预
参与者组/臂 |
干预/治疗 |
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ACTIVE_COMPARATOR:硬皮病患者维生素D缺乏症及饮食建议
接受饮食建议的硬皮病和维生素 D 缺乏症患者
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基于富含 25 (OH) 维生素 D 的食物的饮食建议
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ACTIVE_COMPARATOR:硬皮病患者维生素D缺乏症及补充维生素D
接受维生素 D 补充剂的硬皮病和维生素 D 缺乏症患者
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5000 UI 维生素 D3 每天 4 周
其他名称:
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研究衡量的是什么?
主要结果指标
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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补充维生素 D 对成人硬皮病和维生素 D 缺乏症患者 Th1、Th2 和 Treg 细胞因子谱的影响
大体时间:2年
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评估补充维生素 D3 是否会改变 Th1 (IL-2 (%) / INF-? (%))、Th2 (IL-4 (%))、Treg (IL-10 (%)) 细胞中细胞因子的比例,硬皮病和维生素 D 缺乏症患者,通过流式细胞术。
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2年
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次要结果测量
结果测量 |
措施说明 |
大体时间 |
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硬皮病维生素 D 缺乏症患者的维生素 D 和 cirokines 血清水平
大体时间:2年
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测量硬皮病和维生素缺乏症患者的血清Th1(IL-2(%)/ INF-κ(%))、Th2(IL-4(%))、Treg(IL-10(%))和TGF-β水平D.
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2年
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硬皮病和维生素 D 缺乏症患者补充维生素 D3 的临床效果。
大体时间:每个人招聘后两个月
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评估是否补充维生素 D3 和/或饮食建议(开始和月份),修改硬皮病和维生素 D 缺乏症患者的症状。根据 Medsger 疾病严重程度量表评分的器官受累严重程度进行评估(从 0(无记录参与) 到每个器官系统的 4(终末期疾病)。
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每个人招聘后两个月
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维生素 D、Th1 (IL-2 / INF-γ)、Th2 (IL-4) 和 Treg (IL-10) 之间的关联。
大体时间:2年
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为了通过流式细胞术评估维生素 D 血清水平 (ng/mL) 与 Th1、Th2 和 Treg 亚群之间的可能相关性,确定为 Th1 淋巴细胞的 IL-2+ 和 INF-γ+ 百分比表达,Th2 的 IL-4+ , 和 CD3+CD4+ 门内的 Treg 的 CD25+FoxP3+IL-10+。
使用四参数流式细胞仪 FACS Calibur 使用 ProCellQuest 软件(Beckman Coulter;BD Biosciences)和 Flowing 软件(版本 2.5.1)获取和分析数据
细胞成像核心。
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2年
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合作者和调查者
研究记录日期
研究主要日期
学习开始 (实际的)
初级完成 (实际的)
研究完成 (实际的)
研究注册日期
首次提交
首先提交符合 QC 标准的
首次发布 (实际的)
研究记录更新
最后更新发布 (实际的)
上次提交的符合 QC 标准的更新
最后验证
更多信息
此信息直接从 clinicaltrials.gov 网站检索,没有任何更改。如果您有任何更改、删除或更新研究详细信息的请求,请联系 register@clinicaltrials.gov. clinicaltrials.gov 上实施更改,我们的网站上也会自动更新.
维生素 D 缺乏症的临床试验
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University of UlsterNorthern Ireland Executive; HSC Public Health Agency完全的
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University of UlsterDairy Council for Northern Ireland; Agri-food & Biosciences Institute; Center for Nutrition and...完全的
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University of Eastern Finland完全的
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University of Eastern FinlandDSM Nutritional Products, Inc.完全的
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Meir Medical Center完全的开发从数字立体光盘图像测量 C/D 比的新技术 | C/D 测量的观察者内再现性 | C/D 测量的观察者间变异性