癫痫患者 PM2.5 暴露与铁死亡之间的关联

背景：尽管空气污染（PM2.5）对中枢神经系统影响的确切机制仍在争论中。 越来越多的证据表明，空气污染 (PM2.5) 会影响包括癫痫在内的神经退行性疾病。 众所周知，空气污染 (PM2.5) 会增加小胶质细胞释放的促炎细胞因子水平，而高级研究表明白细胞介素 6 的水平会影响癫痫症状。 此外，我们之前的研究表明 Nrf2 在癫痫发作症状和认知功能中起着至关重要的作用 (NCT05269901)。 然而，小胶质细胞释放的 PM2.5 诱导的促炎细胞因子是否会改变 Nrf2 依赖性铁死亡以促进癫痫发作症状和认知功能仍未得到探索。 因此，这项试点队列研究旨在发现 PM2.5 暴露与白细胞介素 6 水平和 Nrf2 依赖性铁死亡途径变化之间的潜在关联

方法：

1. 研究者首先从扬州和徐州两个城市招募了30名低PM2.5暴露癫痫患儿和年龄匹配的高PM2.5暴露患儿新近诊断为癫痫症（<2个月）作为对照组和空气污染组。以前的 PM2.5 记录；
2. 2022.12和2023.3每5天记录两个城市的PM2.5水平，比较差异；
3. 采用白细胞介素6 ELISA（IL6）试剂盒比较两组促炎细胞因子水平
4. 4 羟基壬醛（4HNE）ELISA KIT比较两组脂质活性氧水平
5. 使用实时定量 PCR（RT-qPCR）比较 Nrf2 依赖性铁死亡途径（Nrf2、SLC7A11、GPX4）的信使 RNA (mRNA) 表达 详细方法方案

1. PM2.5数据来源：PM2.5数据来自中华人民共和国生态环境部（air.cnemc.cn:18007/） 2.样本采集：本研究结束时，入组受试者到医院采集外周血（分别为江南大学附属医院和徐州市儿童医院），血样采集到乙二胺四乙酸（ EDTA） vacutainer tubes 然后分入白细胞和血浆做进一步实验 3. Interleukin-6 and 4HNE: 血浆 IL-6 and 4HNE 浓度通过竞争性 ELISA 法检测 4. RTqPCR sequence: h-GPX4 forward: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC -3' h-GPX4 反向：5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 正向：5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 反向：5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 正向5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h -Nrf2 反向 5'- CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH 正向：5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH 反向：5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'