Sammenheng mellom PM2.5-eksponering og ferroptose hos anfallspasienter

Bakgrunn: Til tross for den nøyaktige mekanismen for virkningene av luftforurensning (PM2.5) på sentralnervesystemet er fortsatt under debatt. Det er økende bevis for at luftforurensning (PM2.5) vil påvirke nevrodegenerative sykdommer inkludert epilepsi. Det er velkjent at luftforurensning (PM2.5) vil øke nivået av proinflammatorisk cytokin som frigjøres av mikroglia, og avansert forskning indikerte nivået av interleukin-6 vil påvirke epilepsisymptomer. I tillegg indikerte vår tidligere forskning at Nrf2 spiller en avgjørende rolle i anfallssymptomer og kognitiv funksjon (NCT05269901). Hvorvidt PM2.5-indusert proinflammatorisk cytokin frigitt av mikroglia vil endre Nrf2-avhengig ferroptose for å lette anfallssymptomer og kognitiv funksjon er fortsatt uutforsket. Derfor har denne pilotkohortstudien som mål å oppdage den potensielle sammenhengen mellom PM2.5-eksponeringer og endringene i interleukin-6-nivået og Nrf2-avhengig ferroptosevei

Metoder:

1. Etterforskerne registrerte først 30 epileptiske barn med lav PM2.5-eksponering og alderstilpassede barn med høy PM2.5-eksponering som nylig ble diagnostisert med epilepsi (< 2 måneder) fra to byer (Yangzhou og Xuzhou) som kontroll- og luftforurensningsgruppe basert på tidligere PM2.5-poster;
2. Registrerte PM2.5-nivået i to byer hver 5. dag mellom 2022.12 og 2023.3 for å sammenligne forskjellen;
3. Interleukin-6 ELISA（IL6） KIT ble brukt til å sammenligne det proinflammatoriske cytokinnivået i to grupper
4. 4 Hydroxynonenal （4HNE） ELISA KIT ble brukt til å sammenligne nivået av lipidereaktive oksygenarter i to grupper
5. Sanntids kvantitativ PCR (RT-qPCR) ble brukt til å sammenligne messenger RNA (mRNA) uttrykk for den Nrf2-avhengige ferroptose-veien (Nrf2, SLC7A11, GPX4) protokollen for detaljerte metoder

1. PM2.5-nivåkilde: PM2.5-nivåene ble registrert via data fra departementet for økologi og miljø i Folkerepublikken Kina (air.cnemc.cn:18007/) 2. Prøveinnsamling: På slutten av denne studien vil den registrerte deltakeren komme til sykehuset for å samle perifert blod (henholdsvis tilknyttet sykehus ved Jiangnan University og Xuzhou Children's Hospital), og blodprøvene ble samlet inn i etylendiamintetraeddiksyre（ EDTA） vacutainer-rør og deretter delt inn i leukocytter og plasma for videre eksperimenter 3. Interleukin-6 og 4HNE: Plasma IL-6 og 4HNE konsentrasjoner ble påvist ved den konkurrerende ELISA-metoden 4. RTqPCR-sekvens: h-GPX4 fremover: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC -3' h-GPX4 revers: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 fremover: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 revers: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 forover5'CAGTTAG -Nrf2 revers 5'- CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH fremover: 5'-GGAGCGAGATCCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH revers: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'