Связь между воздействием PM2,5 и ферроптозом у пациентов с судорогами

Предыстория: Несмотря на то, что точный механизм воздействия загрязнения воздуха (PM2,5) на центральную нервную систему все еще обсуждается. Появляется все больше доказательств того, что загрязнение воздуха (PM2,5) влияет на нейродегенеративные заболевания, включая эпилепсию. Хорошо известно, что загрязнение воздуха (PM2,5) повышает уровень провоспалительных цитокинов, высвобождаемых микроглией, а передовые исследования показали, что уровень интерлейкина-6 влияет на симптомы эпилепсии. Кроме того, наше предыдущее исследование показало, что Nrf2 играет решающую роль в симптомах судорог и когнитивной функции (NCT05269901). Однако вопрос о том, будет ли вызванный PM2.5 провоспалительный цитокин, высвобождаемый микроглией, изменять Nrf2-зависимый ферроптоз, облегчая симптомы судорог и когнитивную функцию, до сих пор не изучен. Таким образом, это экспериментальное когортное исследование направлено на выявление потенциальной связи между воздействием PM2,5 и изменениями уровня интерлейкина-6 и Nrf2-зависимого пути ферроптоза.

Методы:

1. Исследователи сначала зарегистрировали 30 детей с эпилепсией с низким уровнем воздействия PM2,5 и детей того же возраста с высоким уровнем воздействия PM2,5, у которых недавно была диагностирована эпилепсия (< 2 месяцев) из двух городов (Янчжоу и Сюйчжоу) в качестве контроля и группа загрязнения воздуха на основе предыдущие записи PM2,5;
2. Записывал уровень PM2,5 в двух городах каждые 5 дней в период с 2022.12 по 2023.3, чтобы сравнить разницу;
3. Интерлейкин-6 ELISA (IL6) KIT использовался для сравнения уровня провоспалительных цитокинов в двух группах.
4. 4 НАБОР ELISA Hydroxynonnal （4HNE） использовался для сравнения уровня активных форм кислорода в липидах в двух группах.
5. Количественная ПЦР в реальном времени (RT-qPCR) использовалась для сравнения экспрессии матричной РНК (мРНК) Nrf2-зависимого пути ферроптоза (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Подробный протокол методов

1. Источник уровня PM2,5: уровни PM2,5 были зарегистрированы по данным Министерства экологии и окружающей среды Китайской Народной Республики (air.cnemc.cn:18007/). 2. Сбор образцов: в конце этого исследования зарегистрированный участник приедет в больницу для сбора периферической крови (аффилированная больница Университета Цзяннань и Детская больница Сюйчжоу, соответственно), и образцы крови были собраны в этилендиаминтетрауксусной кислоте. EDTA） vacutainer пробирки, а затем разделены на лейкоциты и плазму для дальнейших экспериментов 3. Интерлейкин-6 и 4HNE: Концентрации IL-6 и 4HNE в плазме определяли методом конкурентного ELISA 4. Последовательность RTqPCR: h-GPX4 вперед: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC -3' h-GPX4 обратный: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 прямой: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 обратный: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 прямой5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h -Nrf2 обратный 5'-CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH прямой: 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH обратный: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'