Sammenhæng mellem PM2.5-eksponering og ferroptose hos anfaldspatienter

Baggrund: På trods af den nøjagtige mekanisme af virkningerne af luftforurening (PM2.5) på centralnervesystemet er stadig under debat. Der er stigende beviser for, at luftforurening (PM2.5) vil påvirke neurodegenerative sygdomme, herunder epilepsi. Det er velkendt, at luftforurening (PM2.5) vil øge niveauet af proinflammatorisk cytokin frigivet af mikroglia, og avanceret forskning indikerede, at niveauet af interleukin-6 vil påvirke epilepsisymptomer. Derudover indikerede vores tidligere forskning, at Nrf2 spiller en afgørende rolle i anfaldssymptomer og kognitiv funktion (NCT05269901). Hvorvidt PM2.5-induceret proinflammatorisk cytokin frigivet af mikroglia vil ændre Nrf2-afhængig ferroptose for at lette anfaldssymptomer og kognitiv funktion er stadig uudforsket. Derfor sigter dette pilotkohortestudie på at opdage den potentielle sammenhæng mellem PM2.5-eksponeringer og ændringerne i interleukin-6-niveauet og Nrf2-afhængige ferroptose-veje

Metoder:

1. Efterforskerne indskrev først 30 epileptiske børn med lav PM2.5 eksponering og aldersmatchede børn med høj PM2.5 eksponering, som for nylig blev diagnosticeret med epilepsi (< 2 måneder) fra to byer (Yangzhou og Xuzhou) som kontrol- og luftforureningsgruppe baseret på tidligere PM2.5-poster;
2. Registrerede PM2.5-niveauet i to byer hver 5. dag mellem 2022.12 og 2023.3 for at sammenligne forskellen;
3. Interleukin-6 ELISA（IL6） KIT blev brugt til at sammenligne det proinflammatoriske cytokinniveau i to grupper
4. 4 Hydroxynonenal （4HNE） ELISA KIT blev brugt til at sammenligne niveauet af lipidereaktive oxygenarter i to grupper
5. Real-time kvantitativ PCR (RT-qPCR) blev brugt til at sammenligne messenger RNA (mRNA) ekspression af den Nrf2-afhængige ferroptose pathway (Nrf2, SLC7A11, GPX4) detaljerede metoder protokol

1. Kilde på PM2.5-niveau: PM2.5-niveauerne blev registreret via data fra ministeriet for økologi og miljø i Folkerepublikken Kina (air.cnemc.cn:18007/) 2. Prøveindsamling: Ved afslutningen af ​​denne undersøgelse vil den tilmeldte deltager komme til hospitalet for at indsamle perifert blod (henholdsvis tilknyttet hospital ved Jiangnan University og Xuzhou Children's Hospital), og blodprøverne blev opsamlet i ethylendiamintetraeddikesyre（ EDTA） vacutainerrør og derefter opdelt i leukocytter og plasma til yderligere eksperimenter 3. Interleukin-6 og 4HNE: Plasma IL-6 og 4HNE koncentrationer blev påvist ved den kompetitive ELISA metode 4. RTqPCR sekvens: h-GPX4 fremad: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC -3' h-GPX4 baglæns: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 frem: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 baglæns: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 fremad5'CAGTTAG -Nrf2 baglæns 5'- CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH fremad: 5'-GGAGCGAGATCCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH baglæns: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'