Association entre l'exposition aux PM2,5 et la ferroptose chez les patients convulsifs

Contexte : Malgré le mécanisme exact des effets de la pollution de l'air (PM2,5) sur le système nerveux central est toujours en débat. Il est de plus en plus évident que la pollution de l'air (PM2,5) affectera les maladies neurodégénératives, y compris l'épilepsie. Il est bien connu que la pollution de l'air (PM2,5) augmentera le niveau de cytokine pro-inflammatoire libérée par la microglie, et des recherches avancées ont indiqué que le niveau d'interleukine-6 ​​affectera les symptômes de l'épilepsie. De plus, nos recherches précédentes ont indiqué que Nrf2 joue un rôle crucial dans les symptômes de crise et la fonction cognitive (NCT05269901). Cependant, la question de savoir si la cytokine pro-inflammatoire induite par les PM2,5 et libérée par la microglie modifiera la ferroptose dépendante de Nrf2 pour faciliter les symptômes épileptiques et la fonction cognitive est encore inexplorée. Par conséquent, cette étude de cohorte pilote vise à découvrir l'association potentielle entre les expositions aux PM2,5 et les modifications du niveau d'interleukine-6 ​​et de la voie de la ferroptose dépendante de Nrf2.

Méthodes :

1. Les enquêteurs ont d'abord recruté 30 enfants épileptiques à faible exposition aux PM2,5 et des enfants du même âge à forte exposition aux PM2,5 qui ont récemment reçu un diagnostic d'épilepsie (< 2 mois) de deux villes (Yangzhou et Xuzhou) en tant que groupe de contrôle et de pollution de l'air sur la base de enregistrements précédents de PM2,5 ;
2. Enregistrement du niveau de PM2,5 dans deux villes tous les 5 jours entre 2022.12 et 2023.3 pour comparer la différence ;
3. Interleukin-6 ELISA (IL6) KIT a été utilisé pour comparer le niveau de cytokines pro-inflammatoires dans deux groupes
4. 4 Hydroxynonénal （4HNE） ELISA KIT a été utilisé pour comparer le niveau d'espèces lipidiques réactives à l'oxygène dans deux groupes
5. La PCR quantitative en temps réel (RT-qPCR) a été utilisée pour comparer l'expression de l'ARN messager (ARNm) de la voie de la ferroptose dépendante de Nrf2 (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Protocole de méthodes détaillées

1. Source des niveaux de PM2,5 : les niveaux de PM2,5 ont été enregistrés via les données du ministère de l'Écologie et de l'Environnement de la République populaire de Chine (air.cnemc.cn:18007/) 2. Prélèvement d'échantillons : à la fin de cette étude, le participant inscrit viendra à l'hôpital pour prélever du sang périphérique (hôpital affilié de l'université de Jiangnan et de l'hôpital pour enfants de Xuzhou, respectivement), et les échantillons de sang ont été prélevés dans de l'acide éthylène diamine tétraacétique ( EDTA） tubes vacutainer puis divisés en leucocytes et plasma pour d'autres expériences 3. Interleukine-6 ​​et 4HNE : les concentrations plasmatiques d'IL-6 et de 4HNE ont été détectées par la méthode ELISA compétitive 4. Séquence RTqPCR : h-GPX4 vers l'avant : 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC -3' h-GPX4 marche arrière : 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 marche avant : 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 marche arrière : 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 marche avant5'-ATACGTGAGCCAGTATC-3' h -Nrf2 inverse 5'- CATGCACGTGAGTGTCCT-3' h-GAPDH avant : 5'-GGAGGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH inverse : 5'-GGCTTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'