Asociación entre la exposición a PM2.5 y la ferroptosis en pacientes con convulsiones

Antecedentes: A pesar de que el mecanismo exacto de los efectos de la contaminación del aire (PM2.5) en el sistema nervioso central aún está en debate. Cada vez hay más pruebas de que la contaminación del aire (PM2.5) afectará a las enfermedades neurodegenerativas, incluida la epilepsia. Es bien sabido que la contaminación del aire (PM2.5) aumentará el nivel de citocinas proinflamatorias liberadas por la microglía, y la investigación avanzada indicó que el nivel de interleucina-6 afectará los síntomas de la epilepsia. Además, nuestra investigación anterior indicó que Nrf2 desempeña un papel crucial en los síntomas de las convulsiones y la función cognitiva (NCT05269901). Sin embargo, aún no se ha explorado si la citocina proinflamatoria inducida por PM2.5 liberada por la microglía cambiará la ferroptosis dependiente de Nrf2 para facilitar los síntomas convulsivos y la función cognitiva. Por lo tanto, este estudio de cohorte piloto tiene como objetivo descubrir la posible asociación entre las exposiciones a PM2.5 y los cambios en el nivel de interleucina-6 y la vía de ferroptosis dependiente de Nrf2.

Métodos:

1. Primero, los investigadores inscribieron a 30 niños epilépticos con exposición baja a PM2.5 y niños con exposición alta a PM2.5 de la misma edad que fueron diagnosticados recientemente con epilepsia (< 2 meses) de dos ciudades (Yangzhou y Xuzhou) como el grupo de control y contaminación del aire basado en registros previos de PM2.5;
2. Registraron el nivel de PM2.5 en dos ciudades cada 5 días entre 2022.12 y 2023.3 para comparar la diferencia;
3. Se utilizó el KIT ELISA (IL6) de interleucina-6 para comparar el nivel de citocinas proinflamatorias en dos grupos
4. 4 Hydroxynonenal （4HNE） ELISA KIT se utilizó para comparar el nivel de especies de oxígeno reactivas de lípidos en dos grupos
5. Se utilizó PCR cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR) para comparar la expresión de ARN mensajero (ARNm) de la vía de ferroptosis dependiente de Nrf2 (Nrf2, SLC7A11, GPX4) Protocolo de métodos detallados

1. Fuente del nivel de PM2.5: los niveles de PM2.5 se registraron a través de los datos del Ministerio de Ecología y Medio Ambiente de la República Popular China (air.cnemc.cn:18007/) 2. Recolección de muestras: al final de este estudio, el participante inscrito vendrá al hospital para recolectar sangre periférica (Hospital afiliado de la Universidad de Jiangnan y el Hospital de niños de Xuzhou, respectivamente), y las muestras de sangre se recolectaron en ácido etilendiaminotetraacético （ EDTA） tubos vacutainer y luego se dividieron en leucocitos y plasma para experimentos adicionales 3. Interleucina-6 y 4HNE: Las concentraciones plasmáticas de IL-6 y 4HNE se detectaron mediante el método ELISA competitivo 4. Secuencia RTqPCR: h-GPX4 adelante: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC -3' h-GPX4 atrás: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 adelante: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 atrás: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 adelante5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h -Nrf2 atrás 5'- CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH adelante: 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH atrás: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'