Vývoj a optimalizace GBS diagnostického testu

Streptococcus skupiny B (GBS), také známý jako Streptococcus agalactiae, je grampozitivní diplokok původně známý tím, že způsobuje mastitidu skotu a až do roku 1938 nebylo prokázáno, že jde o lidský patogen. V 70. letech 20. století se GBS objevila jako hlavní příčina novorozenecké morbidity a mortality. GBS způsobuje závažné invazivní onemocnění u novorozenců. Přibližně 80 % infekcí u malých kojenců se vyskytuje během prvního týdne života, a jsou proto označovány jako onemocnění s časným nástupem. Infekce s pozdním nástupem se obvykle vyskytují u kojenců ve věku od 1 týdne do 3 měsíců. Mladí kojenci s invazivním onemocněním GBS mají obvykle sepsi nebo pneumonii, ale mohou, i když méně často, mít meningitidu, osteomyelitidu nebo septickou artritidu. Infekce krevního řečiště, s pneumonií nebo bez ní, jsou hlavním projevem neonatálního GBS onemocnění a jsou pozorovány přibližně v 90 % případů, zatímco meningitida se vyskytuje přibližně v 10 %. Většina nemocí s časným nástupem je výsledkem vzestupného šíření GBS do plodové vody, což vede ke kolonizaci novorozenců a u některých kojenců k invazivnímu onemocnění. K perinatálnímu přenosu organismu může dojít jak přes prasklé, tak intaktní membrány. Přenos z matky na dítě byl hlášen jako 29krát vyšší u matek kolonizovaných GBS než u nekolonizovaných matek. Nové pokyny Centra pro kontrolu a prevenci nemocí doporučují univerzální prenatální kultivační screening na kolonizaci GBS u všech těhotných žen. Citlivější rychlý screeningový test na GBS, který by mohl přesně detekovat ženy, které jsou nositelkami GBS v době porodu, by eliminoval potřebu prenatálního screeningu a zároveň by snížil riziko spojené s použitím intrapartální profylaxe antibiotiky u nekolonizovaných žen. Hlavním cílem studie je vyvinout a optimalizovat prototyp mikro TAS pro rychlou detekci GBS přímo z vaginálních/análních vzorků pomocí stěrů odebraných těhotným ženám přijatým k porodu. Očekává se, že tento diagnostický systém může nahradit současný „zlatý standard“, kterým je mikrobiologická kultivace v selektivních médiích pro stanovení kolonizace GBS. Specifické cíle této studie zahrnují: (1) analytická citlivost prototypu mikro TAS (počet jednotek tvořících kolonie GBS detekovaných na vaginální/anální vzorek) bude stanovena pomocí prospektivně odebraných vaginálních/análních vzorků pozitivních na GBS i negativních vaginálních /anální vzorky, které budou obohaceny různým počtem GBS buněk; (2) specifičnost prototypu mikro TAS (schopnost specificky detekovat nukleotidové sekvence GBS bez detekce jiných mikrobiálních druhů nebo lidských sekvencí) bude stanovena pomocí GBS-negativních vaginálních/análních vzorků a; (3) analýza vzorku a výkonnost prototypu mikro TAS budou porovnány s klinickými vzorky pomocí testu BD GeneOhm StrepB schváleného FDA. Účastníci studie budou zahrnovat 320 těhotných žen ve věku 18 až 44 let, které jsou přijaty do Centre Hospitalier Universitaire de Québec k porodu. Účast spočívá v pozorování po dobu 30 minut. Výzkumná sestra získá 2 vaginální/anální vzorky pomocí standardních technik. Jeden vzorek bude použit k detekci GBS pomocí schváleného testu BD GeneOhm StrepB a druhý vzorek bude použit pro vývoj nového testu GBS pro rychlou detekci v místě péče.