Entwicklung und Optimierung eines GBS-Diagnostiktests

Gruppe B Streptococcus (GBS), auch bekannt als Streptococcus agalactiae, ist ein grampositiver Diplococcus, der ursprünglich dafür bekannt war, Mastitis bei Rindern zu verursachen, und erst 1938 wurde nachgewiesen, dass er ein menschliches Pathogen ist. In den 1970er Jahren entwickelte sich GBS zur Hauptursache für Morbidität und Mortalität bei Neugeborenen. GBS verursacht schwere invasive Erkrankungen bei Neugeborenen. Etwa 80 % der Infektionen bei Kleinkindern treten innerhalb der ersten Lebenswoche auf und werden daher als früh einsetzende Erkrankung bezeichnet. Spätinfektionen treten normalerweise bei Säuglingen im Alter zwischen 1 Woche und 3 Monaten auf. Junge Säuglinge mit invasiver GBS-Erkrankung haben normalerweise eine Sepsis oder Pneumonie, können aber, wenn auch seltener, eine Meningitis, Osteomyelitis oder septische Arthritis aufweisen. Blutstrominfektionen mit oder ohne Lungenentzündung sind die Hauptmanifestation der GBS-Erkrankung bei Neugeborenen und werden in etwa 90 % der Fälle beobachtet, während Meningitis in etwa 10 % auftritt. Die meisten früh einsetzenden Erkrankungen resultieren aus einer aufsteigenden Ausbreitung von GBS in das Fruchtwasser, was zu einer Besiedelung des Neugeborenen und bei einigen Säuglingen zu einer invasiven Erkrankung führt. Eine perinatale Übertragung des Organismus kann sowohl durch geplatzte als auch durch intakte Membranen erfolgen. Es wurde berichtet, dass die Übertragung von der Mutter auf das Kind bei GBS-kolonisierten Müttern 29-mal höher ist als bei nicht kolonisierten Müttern. Die neuen Richtlinien der Centers for Disease Control and Prevention empfehlen ein universelles pränatales kulturbasiertes Screening auf GBS-Besiedlung bei allen schwangeren Frauen. Ein empfindlicherer GBS-Schnelltest, der Frauen, die GBS zum Zeitpunkt der Entbindung tragen, genau erkennen könnte, würde die Notwendigkeit eines pränatalen Screenings überflüssig machen und gleichzeitig das Risiko verringern, das mit der Anwendung einer intrapartalen Prophylaxe mit Antibiotika bei nicht kolonisierten Frauen verbunden ist. Das Hauptziel der Studie ist die Entwicklung und Optimierung eines Mikro-TAS-Prototyps für den schnellen GBS-Nachweis direkt aus Vaginal-/Analproben unter Verwendung von Abstrichen, die von schwangeren Frauen entnommen wurden, die zur Entbindung aufgenommen wurden. Es wird erwartet, dass dieses diagnostische System den aktuellen "Goldstandard" ersetzen kann, bei dem es sich um eine mikrobiologische Kultur in selektiven Medien zur Bestimmung der GBS-Kolonisierung handelt. Zu den spezifischen Zielen dieser Studie gehören: (1) Die analytische Sensitivität des Mikro-TAS-Prototyps (Anzahl der nachgewiesenen GBS-Kolonie bildenden Einheiten pro Vaginal-/Analprobe) wird anhand von prospektiv gesammelten Vaginal-/Analproben bestimmt, die sowohl positiv für GBS als auch negative Vaginalproben sind /anale Proben, die mit einer unterschiedlichen Anzahl von GBS-Zellen versetzt werden; (2) die Spezifität des Mikro-TAS-Prototyps (Fähigkeit, spezifisch GBS-Nukleotidsequenzen nachzuweisen, ohne andere mikrobielle Arten oder menschliche Sequenzen nachzuweisen) wird unter Verwendung von GBS-negativen Vaginal-/Analproben bestimmt; (3) Probenanalyse und Leistung des Mikro-TAS-Prototyps werden mit klinischen Proben mit dem von der FDA zugelassenen BD GeneOhm StrepB-Assay verglichen. Zu den Studienteilnehmern gehören 320 schwangere Frauen im Alter zwischen 18 und 44 Jahren, die zur Entbindung in das Centre Hospitalier Universitaire de Québec eingeliefert werden. Die Teilnahme beinhaltet eine 30-minütige Beobachtung. Die Forschungskrankenschwester entnimmt 2 vaginale/anale Proben mit Standardtechniken. Eine Probe wird zum Nachweis von GBS mit dem zugelassenen BD GeneOhm StrepB-Assay verwendet, und die andere Probe wird für die Entwicklung des neuen Point-of-Care-Schnellnachweis-GBS-Tests verwendet.