Sviluppo e ottimizzazione di un test diagnostico GBS

Lo streptococco di gruppo B (GBS), noto anche come Streptococcus agalactiae, è un diplococco gram-positivo originariamente noto per causare la mastite bovina e non è stato dimostrato essere un patogeno umano fino al 1938. Negli anni '70, il GBS è emerso come la principale causa di morbilità e mortalità neonatale. Il GBS provoca una grave malattia invasiva nei neonati. Circa l'80% delle infezioni nei bambini piccoli si verificano entro la prima settimana di vita e sono quindi designate come malattia ad esordio precoce. Le infezioni ad esordio tardivo di solito si verificano nei bambini di età compresa tra 1 settimana e 3 mesi. I bambini piccoli con malattia invasiva da GBS di solito hanno sepsi o polmonite ma possono, anche se meno frequentemente, presentare meningite, osteomielite o artrite settica. Le infezioni del flusso sanguigno, con o senza polmonite, sono la principale manifestazione della malattia da GBS neonatale e si osservano in circa il 90% dei casi, mentre la meningite si verifica in circa il 10%. La maggior parte delle malattie ad esordio precoce deriva dalla diffusione ascendente del GBS nel liquido amniotico, che porta alla colonizzazione neonatale e alla malattia invasiva in alcuni neonati. La trasmissione perinatale dell'organismo può avvenire sia attraverso membrane rotte che intatte. È stato riportato che la trasmissione da madre a figlio è 29 volte più alta nelle madri colonizzate da GBS rispetto alle madri non colonizzate. Le nuove linee guida dei Centers for Disease Control and Prevention raccomandano lo screening prenatale universale basato sulla coltura per la colonizzazione da GBS in tutte le donne in gravidanza. Un test di screening rapido più sensibile per GBS in grado di rilevare con precisione le donne portatrici di GBS al momento del parto eliminerebbe la necessità di screening prenatale riducendo al contempo il rischio associato all'uso della profilassi intrapartum con antibiotici nelle donne non colonizzate. L'obiettivo principale dello studio è sviluppare e ottimizzare un prototipo di micro TAS per il rilevamento rapido di GBS direttamente da campioni vaginali/anali utilizzando tamponi raccolti da donne in gravidanza ricoverate per il parto. Si prevede che questo sistema diagnostico possa sostituire l'attuale "gold standard" che è la coltura microbiologica in terreni selettivi per determinare la colonizzazione da GBS. Gli obiettivi specifici di questo studio includono: (1) la sensibilità analitica del prototipo di micro TAS (numero di unità formanti colonie di GBS rilevate per campione vaginale/anale) sarà determinata utilizzando campioni vaginali/anali raccolti in modo prospettico positivi per GBS e campioni vaginali negativi /campioni anali che verranno addizionati con vari numeri di cellule GBS; (2) la specificità del prototipo di micro TAS (capacità di rilevare specificamente sequenze nucleotidiche di GBS senza rilevare altre specie microbiche o sequenze umane) sarà determinata utilizzando campioni vaginali/anali GBS-negativi e; (3) l'analisi del campione e le prestazioni del prototipo micro TAS saranno confrontate con campioni clinici con test BD GeneOhm StrepB approvato dalla FDA. I partecipanti allo studio includeranno 320 donne incinte di età compresa tra 18 e 44 anni, che sono ammesse al Centre Hospitalier Universitaire de Québec per il parto. La partecipazione prevede l'osservazione per 30 minuti. L'infermiere ricercatore otterrà 2 campioni vaginali/anali utilizzando tecniche standard. Un campione verrà utilizzato per rilevare GBS con il test BD GeneOhm StrepB approvato e l'altro campione verrà utilizzato per lo sviluppo del nuovo test GBS point-of-care per il rilevamento rapido.