Studie molekulárního predikčního transkriptomu vysokého rizika u kolorektálních polypů asociovaných s MASH

I. Výzkumné metody

1. Obsah výzkumu

1. Naverbovat 6 hospitalizovaných pacientů naplánovaných na endoskopickou léčbu kolorektálních polypů, včetně 3 bez nealkoholické steatózy jater a 3 s MASH. Během kolonoskopické léčby zcela odstranit kolorektální polyp a část tkáně odeslat k analýze sekvenování RNA na úrovni jednotlivých buněk.
2. Vytvořit kohortu kolorektálních polypů spojených s MASH. Naverbovat 94 hospitalizovaných pacientů naplánovaných na endoskopickou léčbu kolorektálních polypů. Posoudit stupeň steatózy a fibrózy jater pomocí FibroScanu. Odebrat 2 ml zbytkové plazmy z rutinních krevních testů provedených při přijetí z klinické laboratoře. Po získání patologických výsledků vypůjčit 3 parafinové řezy z patologického oddělení pro validaci exprese vysoce rizikových transkripčních molekul.
3. Statisticky analyzovat hladiny exprese vysoce rizikových transkripčních molekul a vyhodnotit jejich asociaci s kolorektálními polypy spojenými s MASH a jejich diagnostickou hodnotu.

2. Postupy studie:

1. Naverbovat hospitalizované pacienty naplánované na kolonoskopickou polypektomii, s velikostí polypů 1-2 cm.
2. Vybrat způsobilé pacienty podle kritérií pro zařazení a vyloučení, vysvětlit konkrétní studijní protokol a získat informovaný souhlas.
3. Zaznamenat základní informace o pacientech, jako jsou: jméno, pohlaví, věk, etnická příslušnost, datum narození, výška, hmotnost, datum prvního výskytu příznaků, kontaktní údaje (telefon, trvalá adresa).
4. Při přijetí zjistit výsledky ultrazvuku jater za poslední tři měsíce, historii konzumace alkoholu a historii virové hepatitidy. U pacientů s nealkoholickou steatózou jater provést elastografii v den přijetí. U pacientů, kteří nemohou poskytnout zprávu o ultrazvuku jater, provést nalačno ultrazvuk druhý den po přijetí. Zařadit pacienty do skupiny bez nealkoholické steatózy jater a skupiny MASH na základě ultrazvuku jater, výsledků ultrazvukové elastografie a testů jaterních funkcí.
5. Získat co nejpodrobnější anamnézu a relevantní výsledky pomocných vyšetření/laboratorních testů. Rutinní krevní testy, biochemie (ALT, AST, TBIL, TG, Ch, Glu, celkový protein, albumin), krevní tlak, BMI, břišní ultrazvuk a elastografie (FibroScan) jsou povinné položky.
6. U pacientů zařazených do kohorty pro sekvenování RNA na úrovni jednotlivých buněk provést kolonoskopickou léčbu druhý den po přijetí. Vybrat adenomatózní polyp o velikosti 1-2 cm pro analýzu sekvenování RNA na úrovni jednotlivých buněk. Během kolonoskopického výkonu zcela odstranit polyp. Rychle opláchnout vzorek v misce s fyziologickým roztokem, aby se odstranila krev a nečistoty, a poté jej umístit na suchou gázu. Použít sterilní skalpel k rozdělení polypu podélně. Vzít kousek přibližně velikosti fazole mungo (asi 0,5 cm) a odeslat k sekvenování. Zbývající část odeslat k patologickému vyšetření k potvrzení patologického typu (zajistit, aby pacient obdržel patologickou zprávu). Umístit testovaný vzorek do zkumavky obsahující 1 ml předchlazeného konzervačního roztoku pro tkáně. Zkontrolovat zkumavku obsahující tkáňový vzorek a konzervační roztok, aby se zajistilo, že tkáňový vzorek je zcela ponořen. Potvrdit, že relevantní informace o vzorku jsou jasně označeny na vnějším povrchu zkumavky a utěsnit parafilmem. Umístit zkumavku do pěnové krabice, obklopenou tlumicím materiálem pro ochranu. Před odesláním přidat dostatek ledových sáčků o teplotě -20 °C, aby se zajistilo nízkoteplotní prostředí během přepravy, poté krabici uzavřít a odeslat ve stejný den.
7. U pacientů zařazených do kohorty kolorektálních polypů spojených s MASH dokončit krevní testy jaterních funkcí v den přijetí. Odebrat 2 ml zbytkové plazmy zbývající po rutinním testování z klinické laboratoře a skladovat při -80 °C nebo nižší teplotě. Provést kolonoskopickou léčbu druhý den po přijetí a odeslat polyp k patologické biopsii. Po získání patologických výsledků vypůjčit 3 parafinové řezy polypů patologicky diagnostikovaných jako adenomatózní z patologického oddělení. Plazma a patologické řezy budou použity pro validaci exprese vysoce rizikových transkripčních molekul.

II. Kritéria pro zařazení a vyloučení

Kritéria pro zařazení:

1. Diagnóza MAFLD odpovídá „Směrnicím pro prevenci a léčbu nealkoholické steatózy jater“ (vydání 2018);
2. Pacienti mužského nebo ženského pohlaví ve věku 18–70 let;
3. Podepsaný formulář informovaného souhlasu a vysvětlení konkrétního studijního protokolu.

Kritéria pro vyloučení:

1. Chronické onemocnění jater způsobené jinými etiologiemi (alkoholické, virové, autoimunitní, vyvolané léky atd.), dekompenzovaná cirhóza, primární rakovina jater;
2. Základní onemocnění jiných vitálních orgánů (srdce, ledviny, plíce atd.) a poruchy srážlivosti krve;
3. Jedinci bez právní způsobilosti nebo s nedostatečným náhledem. III. Rizika a nežádoucí účinky Výzkumníci budou dodržovat klinické standardy a pracovat opatrně. [V případě závažných komplikací bude poskytnuta aktivní péče podle rutinních klinických diagnostických a léčebných protokolů a bude nabídnuta bezplatná léčba]{.underline}. Potenciální problémy z odběru krve zahrnují hlavně lokální bolest v místě vpichu, krvácení, otok a infekci. Budeme je aktivně řešit podle klinické rutiny. Bezbolestná elektronická kolonoskopická polypektomie je invazivní výkon, ale je to rutinní klinická operace. Potenciální rizika a komplikace zahrnují krvácení, perforaci, infekci, bolesti břicha, nadýmání, obstrukci střev, anesteziologické nehody atd.

IV. Podmínky pro ukončení účasti

1. Pokud pacient zaznamená závažnou nežádoucí reakci nebo komplikaci vyžadující okamžité ukončení účasti ve studii, obdrží vhodnou léčbu a péči.
2. Pokud pacient během studie zaznamená významné fyzické nebo psychické nepohodlí, které mu brání v pokračování účasti, může se rozhodnout pro ukončení.
3. Pokud se pacient dobrovolně rozhodne ukončit účast ve studii, jeho přání bude respektováno a poskytnuta nezbytná podpora a pomoc.
4. Pokud během studie vzniknou nepředvídaná rizika nebo problémy, které znemožní pokračování, pacientům bude umožněno ukončit účast.