Badanie predykcji molekularnej transkryptomu wysokiego ryzyka polipów jelita grubego związanych z MASH

I. Metody badawcze

1. Zawartość badań

1. Rekrutacja 6 pacjentów hospitalizowanych planowanych do endoskopowego leczenia polipów jelita grubego, w tym 3 bez stłuszczenia wątroby i 3 z MASH. Podczas leczenia kolonoskopowego całkowicie usunąć polipa jelita grubego i przekazać część tkanki do analizy sekwencjonowania RNA pojedynczych komórek.
2. Utworzenie kohorty polipów jelita grubego związanych z MASH. Rekrutacja 94 pacjentów hospitalizowanych planowanych do endoskopowego leczenia polipów jelita grubego. Ocena stopnia stłuszczenia i zwłóknienia wątroby za pomocą FibroScan. Pobranie 2 ml pozostałej osocza z rutynowych badań krwi wykonanych przy przyjęciu z laboratorium klinicznego. Po uzyskaniu wyników patologicznych wypożyczenie 3 skrawków parafinowych z działu patologii w celu walidacji ekspresji cząsteczek transkrypcyjnych wysokiego ryzyka.
3. Statystyczna analiza poziomów ekspresji cząsteczek transkrypcyjnych wysokiego ryzyka i ocena ich związku z polipami jelita grubego związanymi z MASH oraz ich wartości diagnostycznej.

2. Procedury badawcze:

1. Rekrutacja pacjentów hospitalizowanych planowanych do polipektomii kolonoskopowej, z rozmiarem polipa 1-2 cm.
2. Wybór kwalifikujących się pacjentów zgodnie z kryteriami włączenia i wykluczenia, wyjaśnienie szczegółowego protokołu badania i uzyskanie świadomej zgody.
3. Rejestracja podstawowych informacji o pacjencie, takich jak: imię i nazwisko, płeć, wiek, narodowość, data urodzenia, wzrost, waga, data wystąpienia pierwszych objawów, dane kontaktowe (telefon, stały adres).
4. Przy przyjęciu zapytanie o wyniki badania USG wątroby z ostatnich trzech miesięcy, historię spożycia alkoholu oraz historię wirusowego zapalenia wątroby. Dla pacjentów ze stłuszczeniem wątroby wykonanie elastografii w dniu przyjęcia. Dla pacjentów, którzy nie mogą przedstawić wyniku badania USG wątroby, wykonanie badania USG na czczo drugiego dnia po przyjęciu. Klasyfikacja pacjentów do grupy bez stłuszczenia wątroby i grupy MASH na podstawie badania USG wątroby, wyników elastografii USG oraz testów czynności wątroby.
5. Zebranie jak najszczegółowszej historii choroby i odpowiednich wyników badań dodatkowych/laboratoryjnych. Badania krwi, biochemia (ALT, AST, TBIL, TG, Ch, Glu, białko całkowite, albumina), ciśnienie krwi, BMI, USG jamy brzusznej i elastografia (FibroScan) są obowiązkowymi pozycjami.
6. Dla pacjentów włączonych do kohorty sekwencjonowania RNA pojedynczych komórek wykonanie leczenia kolonoskopowego drugiego dnia po przyjęciu. Wybór polipa gruczolakowatego o rozmiarze 1-2 cm do analizy sekwencjonowania RNA pojedynczych komórek. Podczas zabiegu kolonoskopowego całkowite usunięcie polipa. Szybkie przepłukanie próbki w misce opatrunkowej solą fizjologiczną w celu usunięcia krwi i zanieczyszczeń, a następnie umieszczenie jej na suchej gazie. Użycie sterylnego ostrza skalpela do przecięcia polipa wzdłuż osi pionowej. Pobranie kawałka o rozmiarze zbliżonym do ziarna fasoli mung (około 0,5 cm) i wysłanie do sekwencjonowania. Przekazanie pozostałej części do badania patologicznego w celu potwierdzenia typu patologicznego (zapewnienie wystawienia pacjentowi raportu patologicznego). Umieszczenie próbki do badania w probówce odwirowywczej zawierającej 1 ml schłodzonego wcześniej roztworu utrwalającego tkankę. Sprawdzenie probówki odwirowywczej zawierającej próbkę tkanki i roztwór utrwalający, aby upewnić się, że próbka tkanki jest całkowicie zanurzona. Potwierdzenie, że odpowiednie informacje o próbce są wyraźnie oznaczone na zewnętrznej powierzchni probówki i zamknięcie parafilmem. Umieszczenie probówki odwirowywczej w pudełku styropianowym, otoczonej materiałem amortyzującym dla ochrony. Przed wysyłką dodanie wystarczającej ilości wkładów chłodzących -20°C, aby zapewnić środowisko niskiej temperatury podczas transportu, a następnie zamknięcie pudełka i wysłanie w tym samym dniu.
7. Dla pacjentów włączonych do kohorty polipów jelita grubego związanych z MASH wykonanie badań krwi czynności wątroby w dniu przyjęcia. Pobranie 2 ml pozostałego osocza po rutynowych badaniach z laboratorium klinicznego i przechowywanie w temperaturze -80°C lub niższej. Wykonanie leczenia kolonoskopowego drugiego dnia po przyjęciu i wysłanie polipa do biopsji patologicznej. Po uzyskaniu wyników patologicznych wypożyczenie 3 skrawków parafinowych polipów zdiagnozowanych patologicznie jako gruczolakowe z działu patologii. Osocze i skrawki patologiczne zostaną wykorzystane do walidacji ekspresji cząsteczek transkrypcyjnych wysokiego ryzyka.

II. Kryteria włączenia i wykluczenia

Kryteria włączenia:

1. Rozpoznanie MAFLD zgodne z "Wytycznymi dotyczącymi zapobiegania i leczenia niealkoholowej stłuszczeniowej choroby wątroby" (wydanie 2018);
2. Pacjenci płci męskiej lub żeńskiej w wieku 18-70 lat;
3. Podpisana świadoma zgoda i wyjaśnienie szczegółowego protokołu badania.

Kryteria wykluczenia:

1. Przewlekła choroba wątroby z innych przyczyn (alkoholowa, wirusowa, autoimmunologiczna, polekowa itp.), marskość wątroby w fazie dekompensacji, pierwotny rak wątroby;
2. Choroby podstawowe innych narządów życiowych (serca, nerek, płuc itp.) oraz zaburzenia krzepnięcia;
3. Osoby pozbawione zdolności prawnej lub z zaburzeniami wglądu. III. Ryzyko i działania niepożądane Badacze będą przestrzegać standardów klinicznych i działać ostrożnie. [W przypadku poważnych powikłań, aktywne postępowanie będzie prowadzone zgodnie z rutynowymi klinicznymi protokołami diagnostycznymi i terapeutycznymi, a leczenie będzie oferowane bezpłatnie]{.underline}. Potencjalne problemy związane z pobieraniem krwi obejmują głównie ból miejscowy w miejscu nakłucia, krwawienie, obrzęk i infekcję. Będziemy nimi aktywnie zarządzać zgodnie z rutynową praktyką kliniczną. Bezbolesna elektroniczna polipektomia kolonoskopowa jest procedurą inwazyjną, ale jest rutynowym zabiegiem klinicznym. Potencjalne ryzyka i powikłania obejmują krwawienie, perforację, infekcję, ból brzucha, wzdęcia, niedrożność jelit, wypadki anestezjologiczne itp.

IV. Warunki wycofania

1. Jeśli pacjent doświadczy ciężkiej reakcji niepożądanej lub powikłania wymagającego natychmiastowego wycofania z badania, otrzyma odpowiednie leczenie i opiekę.
2. Jeśli pacjent doświadczy znaczącego dyskomfortu fizycznego lub psychicznego podczas badania, który uniemożliwia dalsze uczestnictwo, może zdecydować się na wycofanie.
3. Jeśli pacjent dobrowolnie zdecyduje się wycofać z badania, jego życzenia będą szanowane, a niezbędne wsparcie i pomoc zostaną zapewnione.
4. Jeśli podczas badania pojawią się nieprzewidziane ryzyka lub problemy, które uniemożliwiają kontynuację, pacjenci będą mogli się wycofać.