Estudo de Predição Molecular de Transcriptoma de Alto Risco de Pólipos Colorretais Associados a MASH

I. Métodos de Investigação

1. Conteúdo da Investigação

1. Recrutar 6 doentes internados programados para tratamento endoscópico de pólipos do cólon, incluindo 3 sem fígado gordo e 3 com MASH. Durante o tratamento colonoscópico, remover completamente o pólipo do cólon e submeter uma porção do tecido para análise de sequenciação de RNA de célula única.
2. Estabelecer uma coorte de pólipos do cólon associados a MASH. Recrutar 94 doentes internados programados para tratamento endoscópico de pólipos do cólon. Avaliar o grau de esteatose e fibrose hepática usando FibroScan. Recolher 2ml de plasma residual de análises sanguíneas de rotina realizadas à admissão do laboratório clínico. Após os resultados patológicos estarem disponíveis, requisitar 3 secções de parafina ao departamento de patologia para validação da expressão de moléculas transcricionais de alto risco.
3. Analisar estatisticamente os níveis de expressão das moléculas transcricionais de alto risco e avaliar a sua associação com pólipos do cólon relacionados com MASH e o seu valor diagnóstico.

2. Procedimentos do Estudo:

1. Recrutar doentes internados programados para polipectomia colonoscópica, com tamanhos de pólipos de 1-2cm.
2. Selecionar doentes elegíveis de acordo com os critérios de inclusão e exclusão, explicar o protocolo específico do estudo e obter consentimento informado.
3. Registar informação básica do doente, como: nome, sexo, idade, etnia, data de nascimento, altura, peso, data de início dos sintomas iniciais, informação de contacto (telefone, morada permanente).
4. À admissão, questionar sobre resultados de ecografia hepática nos últimos três meses, histórico de consumo de álcool e histórico de hepatite viral. Para doentes com fígado gordo, realizar elastografia no dia da admissão. Para doentes que não possam fornecer um relatório de ecografia hepática, realizar uma ecografia em jejum no segundo dia de admissão. Categorizar doentes no grupo sem fígado gordo e no grupo MASH com base na ecografia hepática, resultados de elastografia por ecografia e análises de função hepática.
5. Recolher o histórico médico mais detalhado possível e resultados relevantes de exames auxiliares/laboratoriais. Análises sanguíneas de rotina, bioquímica (ALT, AST, TBIL, TG, Ch, Glu, proteína total, albumina), pressão arterial, IMC, ecografia abdominal e elastografia (FibroScan) são itens obrigatórios.
6. Para doentes inscritos na coorte de sequenciação de RNA de célula única, realizar tratamento colonoscópico no segundo dia após a admissão. Selecionar um pólipo adenomatoso de 1-2cm para análise de sequenciação de RNA de célula única. Durante o procedimento colonoscópico, remover completamente o pólipo. Enxaguar rapidamente a amostra numa bacia de pensos com solução salina para remover sangue e detritos, depois colocá-la sobre gaze seca. Usar uma lâmina de bisturi estéril para bissecar o pólipo ao longo do eixo vertical. Retirar um fragmento aproximadamente do tamanho de um grão de feijão-mungo (cerca de 0,5cm) e enviá-lo para sequenciação. Submeter a porção restante para exame patológico para confirmar o tipo patológico (garantir que é emitido um relatório patológico para o doente). Colocar a amostra para teste num tubo de centrifugação contendo 1ml de solução de preservação de tecido pré-arrefecida. Verificar o tubo de centrifugação contendo a amostra de tecido e solução de preservação para garantir que a amostra de tecido está completamente submersa. Confirmar que a informação relevante da amostra está claramente marcada na superfície externa do tubo e selar com parafilme. Colocar o tubo de centrifugação numa caixa de esferovite, rodeado de material de amortecimento para proteção. Antes do envio, adicionar pacotes de gelo a -20°C suficientes para garantir um ambiente de baixa temperatura durante o transporte, depois selar a caixa e enviar no mesmo dia.
7. Para doentes inscritos na coorte de pólipos do cólon associados a MASH, completar análises sanguíneas de função hepática no dia da admissão. Recolher 2ml de plasma residual restante após testes de rotina do laboratório clínico e armazenar a -80°C ou abaixo. Realizar tratamento colonoscópico no segundo dia após a admissão e enviar o pólipo para biópsia patológica. Após os resultados patológicos estarem disponíveis, requisitar 3 secções de parafina de pólipos diagnosticados patologicamente como adenomatosos ao departamento de patologia. Plasma e secções patológicas serão usados para validação da expressão de moléculas transcricionais de alto risco.

II. Critérios de Inclusão e Exclusão

Critérios de Inclusão:

1. Diagnóstico de MAFLD conforme as "Diretrizes para a Prevenção e Tratamento da Doença do Fígado Gordo Não Alcoólico" (Edição 2018);
2. Doentes do sexo masculino ou feminino com idades entre 18-70 anos;
3. Formulário de consentimento informado assinado e explicação do protocolo específico do estudo.

Critérios de Exclusão:

1. Doença hepática crónica devido a outras etiologias (alcoólica, viral, autoimune, induzida por medicamentos, etc.), cirrose descompensada, cancro primário do fígado;
2. Doenças subjacentes de outros órgãos vitais (coração, rim, pulmão, etc.) e distúrbios hemorrágicos;
3. Indivíduos sem capacidade legal ou com pouca capacidade de discernimento. III. Riscos e Efeitos Adversos Os investigadores aderirão aos padrões clínicos e operarão com cautela. [Em caso de complicações graves, será prestada gestão ativa de acordo com protocolos clínicos de diagnóstico e tratamento de rotina, e será oferecido tratamento gratuito]{.underline}. Problemas potenciais das colheitas de sangue incluem principalmente dor local no local da punção, hemorragia, inchaço e infeção. Geriremos estes ativamente de acordo com a rotina clínica. A polipectomia colonoscópica eletrónica indolor é um procedimento invasivo, mas é uma operação clínica de rotina. Riscos e complicações potenciais incluem hemorragia, perfuração, infeção, dor abdominal, distensão, obstrução intestinal, acidentes anestésicos, etc.

IV. Condições de Retirada

1. Se um doente sofrer uma reação adversa grave ou complicação que exija retirada imediata do estudo, receberá tratamento e cuidados apropriados.
2. Se um doente sofrer desconforto físico ou psicológico significativo durante o estudo que o impeça de continuar a participação, pode optar por retirar-se.
3. Se um doente optar voluntariamente por retirar-se do estudo, os seus desejos serão respeitados e será prestado apoio e assistência necessários.
4. Se surgirem riscos ou problemas imprevistos durante o estudo que tornem impossível continuar, os doentes serão autorizados a retirar-se.