MASH-liittyvien paksusuolen polyyppien korkean riskin transkriptomimolekyyliennustetutkimus

I. Tutkimusmenetelmät

1. Tutkimuksen sisältö

1. Rekrytoidaan 6 potilasta, jotka on ajoitettu paksusuolen polypien endoskooppiseen hoitoon, mukaan lukien 3 ilman rasvamaksaa ja 3 MASH-potilasta. Kolonoskopiahoidon aikana poistetaan paksusuolen polypi kokonaan ja lähetetään osa kudoksesta yksisoluiselle RNA-sekvensointianalyysille.
2. Perustetaan MASH-liittyvä paksusuolen polypikohortti. Rekrytoidaan 94 potilasta, jotka on ajoitettu paksusuolen polypien endoskooppiseen hoitoon. Arvioidaan steatoosi ja maksafibroosin aste FibroScanilla. Kerätään 2 ml jäljellä olevaa plasmaa sairaalaan tulon yhteydessä tehtävistä rutiiniverikokeista kliinisestä laboratoriosta. Patologisten tulosten saatuaan lainataan patologiaosastolta 3 parafiinileikettä korkean riskin transkriptiomolekyylien ilmentymisen varmennusta varten.
3. Tilastollisesti analysoidaan korkean riskin transkriptiomolekyylien ilmentymistasot ja arvioidaan niiden yhteyttä MASH-liittyviin paksusuolen polyppeihin sekä niiden diagnostista arvoa.

2. Tutkimusmenettelyt:

1. Rekrytoidaan potilaita, jotka on ajoitettu kolonoskopiseen polypien poistoon, polypien koon ollessa 1–2 cm.
2. Valitaan kelvolliset potilaat sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerien mukaisesti, selitetään tarkka tutkimusprotokolla ja saadaan informoitu suostumus.
3. Tallennetaan potilaan perustiedot, kuten: nimi, sukupuoli, ikä, etninen ryhmä, syntymäaika, pituus, paino, ensimmäisten oireiden ilmaantumispäivämäärä, yhteystiedot (puhelin, pysyvä osoite).
4. Sairaalaan tulon yhteydessä tiedustellaan maksa-ultraäänituloksia viimeisen kolmen kuukauden ajalta, alkoholinkäyttöhistoriaa ja virustaivoitushistoriaa. Rasvamaksapotilaille tehdään elastografia sairaalaan tulopäivänä. Potilaille, jotka eivät pysty toimittamaan maksa-ultraääniraporttia, tehdään paastoultraääni sairaalassaolopäivänä kaksi. Potilaat jaotellaan ei-rasvamaksaryhmään ja MASH-ryhmään maksa-ultraäänin, ultraäänielastografian tulosten ja maksan toimintakokeiden perusteella.
5. Kerätään mahdollisimman yksityiskohtainen sairaushistoria ja asiaankuuluvat apututkimus-/laboratoriotulokset. Rutiiniverikokeet, biokemia (ALT, AST, TBIL, TG, Ch, Glu, kokonaisproteiini, albumiini), verenpaine, BMI, vatsa-ultraääni ja elastografia (FibroScan) ovat pakollisia kohteita.
6. Yksisoluiselle RNA-sekvensointikohorttiin valituille potilaille suoritetaan kolonoskopahoito sairaalassaolopäivänä kaksi. Valitaan 1–2 cm:n adenomaattinen polypi yksisoluiselle RNA-sekvensointianalyysille. Kolonoskopiaprosessin aikana polypi poistetaan kokonaan. Pese näyte nopeasti suolaliuoksella pehmustekulhossa poistaaksesi veren ja roskat ja aseta se sitten kuivalle sideharsolle. Käytä steriiliä skalpelliterää leikataksesi polypi pystysuunnassa kahtia. Ota noin mungpavun kokoinen pala (noin 0,5 cm) ja lähetä se sekvensointiin. Lähetä jäljellä oleva osa patologiseen tutkimukseen vahvistamaan patologinen tyyppi (varmista, että potilaalle annetaan patologinen raportti). Aseta testattava näyte sentrifugointiputkeen, joka sisältää 1 ml esijäähdytettyä kudosvarastointiliuosta. Tarkista kudosnäytettä ja varastointiliuosta sisältävä sentrifugointiputki varmistaaksesi, että kudosnäyte on täysin upotettu. Varmista, että asiaankuuluvat näytetiedot on selvästi merkitty putken ulkopintaan ja tiivistä parafiinikalvolla. Aseta sentrifugointiputki vaahtomuovilaatikkoon, jonka ympärillä on pehmuste suojaksi. Ennen lähetystä lisää riittävästi –20 °C jääpaketteja varmistaaksesi matalan lämpötilan ympäristön kuljetuksen aikana, tiivistä sitten laatikko ja lähetä samana päivänä.
7. MASH-liittyvään paksusuolen polypikohorttiin valituille potilaille suoritetaan maksan toimintaverikokeet sairaalaan tulopäivänä. Kerää 2 ml rutiinitestauksen jälkeen jäljellä olevaa plasmaa kliinisestä laboratoriosta ja varastoi –80 °C:ssa tai alempana. Suorita kolonoskopahoito sairaalassaolopäivänä kaksi ja lähetä polypi patologiseen biopsiaan. Patologisten tulosten saatuaan lainataan patologiaosastolta 3 patologisesti adenomaattisiksi diagnosoidun polypin parafiinileikettä. Plasmaa ja patologisia leikkeitä käytetään korkean riskin transkriptiomolekyylien ilmentymisen varmennukseen.

II. Sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit

Sisällyttämiskriteerit:

1. MAFLD-diagnoosi noudattaa "Ei-alkoholiperäisen rasvamaksataudin ehkäisy- ja hoitosuosituksia" (2018 painos);
2. Mies- tai naispotilaat, ikä 18–70 vuotta;
3. Allekirjoitettu informoitu suostumuslomake ja tarkan tutkimusprotokollan selitys.

Poissulkemiskriteerit:

1. Muista syistä johtuva krooninen maksasairaus (alkoholiperäinen, virusperäinen, autoimmuuni, lääkeperäinen jne.), dekompensoitu maksakirroosi, primaarinen maksasyöpä;
2. Muiden elintärkeiden elinten (sydän, munuaiset, keuhkot jne.) taustasairaudet ja verenvuotohäiriöt;
3. Henkilöt, joilla ei ole oikeustoimikelpoisuutta tai joilla on huono oivalluskyky. III. Riskit ja haittavaikutukset Tutkijat noudattavat kliinisiä standardeja ja toimivat varovasti. [Vakavien komplikaatioiden sattuessa toteutetaan aktiivista hoitoa kliinisten rutiinidiagnostiikka- ja hoitoprotokollien mukaisesti, ja tarjotaan ilmainen hoito]{.underline}. Verinotoista aiheutuvat mahdolliset ongelmat sisältävät pääasiassa pistoksen kohdan paikallisen kivun, verenvuodon, turvotuksen ja infektion. Hoidamme näitä aktiivisesti kliinisten rutiinien mukaisesti. Kivuton elektroninen kolonoskopinen polypien poisto on invasiivinen toimenpide, mutta se on kliininen rutiinitoimenpide. Mahdolliset riskit ja komplikaatiot sisältävät verenvuodon, perforaation, infektion, vatsakivun, turvotuksen, suoliston tukoksen, anestesiaonnettomuudet jne.

IV. Keskeyttämisehdot

1. Jos potilaalle ilmenee vakava haittareaktio tai komplikaatio, joka edellyttää välitöntä poistumista tutkimuksesta, hän saa asianmukaista hoitoa ja hoivaa.
2. Jos potilaalle ilmenee merkittävää fyysistä tai psyykkistä epämukavuutta tutkimuksen aikana, joka estää jatkamisen, hän voi päättää keskeyttää.
3. Jos potilas päättää vapaaehtoisesti keskeyttää tutkimuksen, hänen toiveitaan kunnioitetaan ja tarjotaan tarvittava tuki ja apu.
4. Jos tutkimuksen aikana ilmenee ennakoimattomia riskejä tai ongelmia, jotka tekevät jatkamisen mahdottomaksi, potilaille on sallittava keskeyttäminen.