Hochrisiko-Transkriptom-Molekularprädiktionsstudie für MASH-assoziierte kolorektale Polypen

I. Forschungsmethoden

1. Forschungsinhalt

1. Rekrutieren Sie 6 stationäre Patienten, die für eine endoskopische Behandlung von Dickdarmpolypen geplant sind, darunter 3 ohne Fettleber und 3 mit MASH. Während der koloskopischen Behandlung entfernen Sie den Dickdarmpolypen vollständig und reichen einen Teil des Gewebes zur Einzelzell-RNA-Sequenzierungsanalyse ein.
2. Etablieren Sie eine MASH-assoziierte Dickdarmpolypen-Kohorte. Rekrutieren Sie 94 stationäre Patienten, die für eine endoskopische Behandlung von Dickdarmpolypen geplant sind. Bewerten Sie die Steatose und den Grad der Leberfibrose mit FibroScan. Sammeln Sie 2 ml Restplasma aus routinemäßigen Blutuntersuchungen, die bei der Aufnahme vom klinischen Labor durchgeführt wurden. Nachdem die pathologischen Ergebnisse vorliegen, entleihen Sie 3 Paraffinschnitte von der Pathologieabteilung zur Validierung der Expression von Hochrisiko-Transkriptionsmolekülen.
3. Statistisch analysieren Sie die Expressionsniveaus von Hochrisiko-Transkriptionsmolekülen und bewerten Sie deren Assoziation mit MASH-assoziierten Dickdarmpolypen und deren diagnostischen Wert.

2. Studienablauf:

1. Rekrutieren Sie stationäre Patienten, die für eine koloskopische Polypektomie geplant sind, mit Polypengrößen von 1-2 cm.
2. Wählen Sie geeignete Patienten gemäß den Ein- und Ausschlusskriterien aus, erklären Sie das spezifische Studienprotokoll und holen Sie die Einwilligung nach Aufklärung ein.
3. Erfassen Sie grundlegende Patienteninformationen, wie: Name, Geschlecht, Alter, Ethnie, Geburtsdatum, Größe, Gewicht, Datum des Auftretens der ersten Symptome, Kontaktinformationen (Telefon, ständige Adresse).
4. Bei der Aufnahme erkundigen Sie sich nach Leberultraschallergebnissen der letzten drei Monate, Alkoholkonsumgeschichte und Vorgeschichte von Virushepatitis. Bei Patienten mit Fettleber führen Sie am Tag der Aufnahme eine Elastographie durch. Bei Patienten, die keinen Leberultraschallbericht vorlegen können, führen Sie am zweiten Tag nach der Aufnahme einen nüchternen Ultraschall durch. Kategorisieren Sie Patienten basierend auf Leberultraschall, Ultraschallelastographieergebnissen und Leberfunktionstests in die Nicht-Fettleber-Gruppe und die MASH-Gruppe.
5. Sammeln Sie so detailliert wie möglich die Krankengeschichte und relevante Hilfsuntersuchungs-/Laborergebnisse. Routinemäßige Blutuntersuchungen, Biochemie (ALT, AST, TBIL, TG, Ch, Glu, Gesamtprotein, Albumin), Blutdruck, BMI, abdominaler Ultraschall und Elastographie (FibroScan) sind obligatorische Punkte.
6. Für Patienten, die in die Einzelzell-RNA-Sequenzierungskohorte aufgenommen werden, führen Sie am zweiten Tag nach der Aufnahme die koloskopische Behandlung durch. Wählen Sie einen adenomatösen Polypen von 1-2 cm zur Einzelzell-RNA-Sequenzierungsanalyse aus. Während des koloskopischen Eingriffs entfernen Sie den Polypen vollständig. Spülen Sie die Probe schnell in einer Schüssel mit Kochsalzlösung, um Blut und Schmutz zu entfernen, und legen Sie sie dann auf trockene Gaze. Verwenden Sie eine sterile Skalpellklinge, um den Polypen entlang der vertikalen Achse zu halbieren. Nehmen Sie ein Stück von etwa der Größe einer Mungbohne (ca. 0,5 cm) und senden Sie es zur Sequenzierung. Reichen Sie den verbleibenden Teil zur pathologischen Untersuchung ein, um den pathologischen Typ zu bestätigen (stellen Sie sicher, dass ein pathologischer Bericht für den Patienten ausgestellt wird). Legen Sie die Probe für den Test in ein Zentrifugenröhrchen mit 1 ml vorgekühlter Gewebekonservierungslösung. Überprüfen Sie das Zentrifugenröhrchen mit der Gewebeprobe und der Konservierungslösung, um sicherzustellen, dass die Gewebeprobe vollständig eingetaucht ist. Stellen Sie sicher, dass die relevanten Probeninformationen deutlich auf der Außenfläche des Röhrchens markiert sind und versiegeln Sie es mit Parafilm. Legen Sie das Zentrifugenröhrchen in eine Schaumstoffbox, umgeben von Polstermaterial zum Schutz. Vor dem Versand fügen Sie ausreichend -20°C Eisbeutel hinzu, um eine Niedrigtemperaturumgebung während des Transports zu gewährleisten, dann versiegeln Sie die Box und versenden sie am selben Tag.
7. Für Patienten, die in die MASH-assoziierte Dickdarmpolypen-Kohorte aufgenommen werden, schließen Sie am Tag der Aufnahme Leberfunktionsbluttests ab. Sammeln Sie 2 ml Restplasma, das nach routinemäßigen Tests vom klinischen Labor übrig bleibt, und lagern Sie es bei -80°C oder darunter. Führen Sie am zweiten Tag nach der Aufnahme die koloskopische Behandlung durch und senden Sie den Polypen zur pathologischen Biopsie. Nachdem die pathologischen Ergebnisse vorliegen, entleihen Sie 3 Paraffinschnitte von Polypen, die pathologisch als adenomatös diagnostiziert wurden, von der Pathologieabteilung. Plasma und pathologische Schnitte werden zur Validierung der Expression von Hochrisiko-Transkriptionsmolekülen verwendet.

II. Ein- und Ausschlusskriterien

Einschlusskriterien:

1. Diagnose von MAFLD entspricht den „Leitlinien zur Prävention und Behandlung der nicht-alkoholischen Fettlebererkrankung“ (Ausgabe 2018);
2. Männliche oder weibliche Patienten im Alter von 18-70 Jahren;
3. Unterzeichnete Einwilligungserklärung nach Aufklärung und Erklärung des spezifischen Studienprotokolls.

Ausschlusskriterien:

1. Chronische Lebererkrankung aufgrund anderer Ätiologien (alkoholisch, viral, autoimmun, medikamenteninduziert usw.), dekompensierte Zirrhose, primäres Leberkarzinom;
2. Grundkrankheiten anderer lebenswichtiger Organe (Herz, Niere, Lunge usw.) und Blutungsstörungen;
3. Personen ohne Geschäftsfähigkeit oder mit schlechter Einsichtsfähigkeit. III. Risiken und Nebenwirkungen Die Untersucher werden sich an klinische Standards halten und vorsichtig vorgehen. [Im Falle schwerer Komplikationen wird eine aktive Behandlung gemäß klinischen Routine-Diagnose- und Behandlungsprotokollen bereitgestellt, und eine kostenlose Behandlung wird angeboten]{.underline}. Potenzielle Probleme bei Blutentnahmen umfassen hauptsächlich lokale Schmerzen an der Einstichstelle, Blutungen, Schwellungen und Infektionen. Wir werden diese gemäß klinischer Routine aktiv behandeln. Die schmerzlose elektronische koloskopische Polypektomie ist ein invasiver Eingriff, aber eine routinemäßige klinische Operation. Potenzielle Risiken und Komplikationen umfassen Blutungen, Perforation, Infektion, Bauchschmerzen, Blähungen, Darmverschluss, Narkoseunfälle usw.

IV. Abbruchbedingungen

1. Wenn ein Patient eine schwere Nebenwirkung oder Komplikation erleidet, die einen sofortigen Studienabbruch erfordert, erhält er eine angemessene Behandlung und Betreuung.
2. Wenn ein Patient während der Studie erhebliche körperliche oder psychische Beschwerden erleidet, die eine weitere Teilnahme unmöglich machen, kann er sich entscheiden, abzubrechen.
3. Wenn ein Patient freiwillig beschließt, die Studie abzubrechen, werden seine Wünsche respektiert und notwendige Unterstützung und Hilfe bereitgestellt.
4. Wenn während der Studie unvorhergesehene Risiken oder Probleme auftreten, die eine Fortsetzung unmöglich machen, sollen Patienten den Abbruch gestattet werden.