Změny v expresi zánětlivých a kontraktilních proteinů u pacientů se syndromem bolestivého močového měchýře/IC.

Ačkoli je IC uznávána již více než století, její patofyziologie zůstává záhadou a v důsledku toho je léčba IC převážně empirická. Bylo postulováno velké množství mechanismů onemocnění, od neurozánětlivých po autoimunitní nebo možná infekční nebo toxická agens. Novější studie naznačily genetický základ onemocnění, ale ve většině hypotéz se jedná o zánětlivou složku nějakého druhu a mnoho nálezů tuto teorii podporuje. Často citovanou hypotézou je prosakující epitel. Zdravý močový měchýř je potažen tenkou mucinózní substancí mucinu z povrchu močového měchýře, který se skládá z četných sulfonovaných glykosaminoglykanů a glykoproteinů. U pacientů s IC, na rozdíl od kontrol, stejně jako u některých zvířecích modelů IC, byly pozorovány kvalitativní změny této povrchové vrstvy (Lilly a kol., 1990., Moskowitz a kol., 1994). Iniciační událost (toxin) může vést k funkčním změnám a zvýšené permeabilitě. To zase vede k nervové senzibilizaci a možná i up-regulaci. Přibývá důkazů, že progrese IC je doprovázena významnou up-regulací senzorických nervů v močovém měchýři (Letourneau, 1996). Nervový růstový faktor (NGF), neurotropin, který senzibilizuje nociceptorová vlákna, byl hlášen jako zvýšený v močovém měchýři pacientů s IC (Lowe, 1997) a aplikace NGF u potkanů ​​Wistar akutně vyvolala hyperaktivitu močového měchýře (Chuang, 2001). Senzorické nervy při neurogenním zánětu vylučují zánětlivé mediátory, jako je Substance P (SP), nociceptivní neurotransmiter v centrálním a periferním nervovém systému. Zvýšená množství uvolněné látky P byla nalezena v moči pacientů s IC (Hohenfellner, et al., 1992, Pang et al., 1995, Pang et al., 1996), přičemž koncentrace látky P odráží stupeň pacientů s IC. bolest (Chen et al., 1999). Substance P a příbuzné tachykininy (TK) zprostředkovávají řadu fyziologických procesů v urogenitálním, plicním a gastrointestinálním traktu prostřednictvím stimulace receptorů NK1 a NK2. Předklinické důkazy získané použitím selektivních antagonistů tachykininových receptorů naznačují, že endogenní tachykininy se podílejí na regulaci kontrakce hladkého svalstva, vazodilataci, metabolismu vody a zánětu. Nedávno se ukázalo, že mRNA kódující SP receptor NK1 je zvýšena v biopsiích močového měchýře od pacientů s intersticiální cystitidou (Marchand et al., 1998). NK1R mRNA byla nalezena ve svalu detruzoru, urotelu a vaskulárních strukturách a endoteliální NK1R byly výrazně zvýšeny. Vazba SP na NK1R na endoteliálních buňkách má za následek vazodilataci, plazmatickou extravazaci, uvolňování cytokinů a aktivaci a infiltraci imunitních buněk, všechny charakteristické pro IC. Experimenty s NK1R knockout myší umožnily poprvé prokázat povinný požadavek NK1R u cystitidy a účast těchto receptorů v řetězci událostí spojujících degranulaci žírných buněk a zánět (Saban et al., 2000).

Změny v sarkolemě a změněná exprese tachykininových a bradykininových receptorů mohou významně ovlivnit downstream signální události vedoucí k šíření symptomů chronické pánevní bolesti/IC. Odhalením spojení mezi klinickými symptomy a molekulární regulací atypické zánětlivé odpovědi můžeme být schopni nabídnout nové a specifické možnosti léčby. V současném návrhu bychom chtěli dále studovat patologii močového měchýře, zejména symptomatický komplex PBS/intersticiální cystitida, a zkoumat vliv změn v lidském urotelu a svalových buňkách detruzoru na signalizaci zprostředkovanou NK1R.

Biopsie od kontrol a pacientů s PBS budou získány buď v celkové nebo spinální anestezii transuretrálně z kopule močového měchýře a trigonu pomocí bioptického kleště. RNA bude extrahována a úrovně exprese vybraných genů analyzovány pomocí Taqman real-time PCR a genových expresních čipů (Applied Biosystems). Zobrazování vápníku bude použito k monitorování aktivace receptoru a hladin proteinů analyzovaných pomocí SDS-PAGE a Western blottingu. Distribuce v receptorové tkáni bude analyzována imunocytochemicky.