Cambios en la expresión de proteínas inflamatorias y contráctiles en pacientes con síndrome de vejiga dolorosa/IC.

Aunque la CI ha sido reconocida durante más de un siglo, su fisiopatología sigue siendo un misterio y, como consecuencia, el tratamiento de la CI es en gran parte empírico. Se han postulado una multitud de mecanismos de la enfermedad que van desde agentes neuroinflamatorios hasta agentes autoinmunes o posiblemente infecciosos o tóxicos. Estudios más recientes han insinuado una base genética de la enfermedad, pero en la mayoría de las hipótesis está involucrado un componente inflamatorio de algún tipo y muchos hallazgos respaldan esta teoría. Una hipótesis citada a menudo es el epitelio permeable. La vejiga sana está recubierta con una sustancia mucinosa delgada, mucina en la superficie de la vejiga, que se compone de numerosos glicosaminoglicanos sulfonados y glucoproteínas. En pacientes con CI, a diferencia de los controles, así como en algunos modelos animales de CI, se han observado cambios cualitativos en esta capa superficial (Lilly et al, 1990, Moskowitz et al, 1994). Un evento iniciador (toxina) puede conducir a cambios funcionales y aumento de la permeabilidad. Esto, a su vez, conduce a la sensibilización de los nervios y, posiblemente, a la regulación positiva. Cada vez hay más pruebas de que la progresión de la CI se acompaña de una regulación ascendente significativa de los nervios sensoriales en la vejiga (Letourneau, 1996). Se informó que el factor de crecimiento nervioso (NGF), una neurotropina que sensibiliza las fibras nociceptoras, aumentó en las vejigas de pacientes con IC (Lowe, 1997), y la aplicación de NGF en ratas Wistar indujo hiperactividad vesical aguda (Chuang, 2001). Los nervios sensoriales en la inflamación neurogénica secretan mediadores inflamatorios como la Sustancia P (SP), un neurotransmisor nociceptivo en el sistema nervioso central y periférico. Se han encontrado cantidades aumentadas de la Sustancia P liberada en la orina de pacientes con IC (Hohenfellner, et al, 1992, Pang et al., 1995, Pang et al., 1996), la concentración de la Sustancia P refleja el grado de dolor (Chen et al., 1999). La sustancia P y las taquiquininas (TK) relacionadas median una variedad de procesos fisiológicos en el tracto genitourinario, pulmonar y gastrointestinal a través de la estimulación de los receptores NK1 y NK2. La evidencia preclínica obtenida mediante el uso de antagonistas selectivos de los receptores de taquiquininas indica que las taquiquininas endógenas están involucradas en la regulación de la contracción del músculo liso, la vasodilatación, el metabolismo del agua y la inflamación. Recientemente se demostró que el ARNm que codifica para el receptor SP NK1 está aumentado en las biopsias de vejiga de pacientes con cistitis intersticial (Marchand et al., 1998). Se encontró ARNm de NK1R en el músculo detrusor, urotelio y estructuras vasculares, y el NK1R endotelial aumentó notablemente. La unión de SP a NK1R en las células endoteliales da como resultado vasodilatación, extravasación de plasma, liberación de citoquinas y activación e infiltración de células inmunitarias, todas características de la CI. Los experimentos con ratones knockout para NK1R permitieron por primera vez demostrar el requerimiento obligatorio de NK1R en la cistitis y la participación de estos receptores en la cadena de eventos que vinculan la desgranulación de los mastocitos y la inflamación (Saban et al., 2000).

Los cambios en el sarcolema y la expresión alterada de los receptores de taquiquinina y bradicinina podrían influir significativamente en los eventos de señalización posteriores que conducen a la propagación de los síntomas del dolor pélvico crónico/CI. Al descubrir el vínculo entre los síntomas clínicos y la regulación molecular de la respuesta inflamatoria atípica, podemos ofrecer opciones de tratamiento novedosas y específicas. En la propuesta actual, nos gustaría ampliar nuestros estudios de la patología de la vejiga urinaria, en particular el complejo sintomático de PBS/cistitis intersticial, e investigar el efecto de los cambios en el urotelio humano y las células del músculo detrusor en la señalización mediada por NK1R.

Las biopsias de los controles y de los pacientes con PBS se obtendrán con anestesia general o raquídea por vía transuretral del domo y el trígono de la vejiga con una pinza de biopsia. Se extraerá el ARN y se analizarán los niveles de expresión de los genes seleccionados utilizando matrices de expresión génica y PCR en tiempo real Taqman (Applied Biosystems). Se utilizarán imágenes de calcio para monitorear la activación del receptor y los niveles de proteína analizados por SDS-PAGE y Western Blot. La distribución del tejido receptor se analizará mediante inmunocitoquímica.