Zmiany w ekspresji białek zapalnych i kurczliwych u pacjentów z zespołem bolesnego pęcherza/IC.

Chociaż IC jest rozpoznawany od ponad wieku, jego patofizjologia pozostaje tajemnicą, w związku z czym leczenie IC jest w dużej mierze empiryczne. Postulowano wiele mechanizmów choroby, od czynników neurozapalnych do autoimmunologicznych lub prawdopodobnie zakaźnych lub toksycznych. Nowsze badania wskazywały na genetyczne podłoże choroby, ale w większości hipotez zaangażowany jest jakiś składnik zapalny, a wiele odkryć potwierdza tę teorię. Często cytowaną hipotezą jest nieszczelny nabłonek. Zdrowy pęcherz jest pokryty cienką śluzową substancją mucyną na powierzchni pęcherza, która składa się z licznych sulfonowanych glikozaminoglikanów i glikoprotein. U pacjentów z IC, w przeciwieństwie do kontroli, jak również w niektórych zwierzęcych modelach IC, zaobserwowano jakościowe zmiany w tej warstwie powierzchniowej (Lilly i in., 1990., Moskowitz i in., 1994). Zdarzenie inicjujące (toksyna) może prowadzić do zmian funkcjonalnych i zwiększonej przepuszczalności. To z kolei prowadzi do uwrażliwienia nerwów i prawdopodobnie regulacji w górę. Istnieje coraz więcej dowodów na to, że postępowi IC towarzyszy znaczna regulacja w górę nerwów czuciowych w pęcherzu (Letourneau, 1996). Donoszono, że czynnik wzrostu nerwów (NGF), neurotropina, która uwrażliwia włókna nocyceptorów, jest zwiększony w pęcherzach pacjentów z IC (Lowe, 1997), a zastosowanie NGF u szczurów Wistar ostro wywołało nadpobudliwość pęcherza (Chuang, 2001). Nerwy czuciowe w zapaleniu neurogennym wydzielają mediatory zapalne, takie jak substancja P (SP), nocyceptywny neuroprzekaźnik w ośrodkowym i obwodowym układzie nerwowym. Zwiększone ilości uwolnionej substancji P stwierdzono w moczu pacjentów z IC (Hohenfellner i in., 1992, Pang i in., 1995, Pang i in., 1996), przy czym stężenie substancji P odzwierciedla stopień ból (Chen i in., 1999). Substancja P i pokrewne tachykininy (TK) pośredniczą w różnych procesach fizjologicznych w układzie moczowo-płciowym, płucnym i pokarmowym poprzez stymulację receptorów NK1 i NK2. Dowody przedkliniczne uzyskane dzięki zastosowaniu selektywnych antagonistów receptora tachykininy wskazują, że endogenne tachykininy biorą udział w regulacji skurczu mięśni gładkich, rozszerzaniu naczyń, metabolizmie wody i zapaleniu. Ostatnio wykazano, że mRNA kodujący receptor SP NK1 jest zwiększony w biopsjach pęcherza od pacjentów ze śródmiąższowym zapaleniem pęcherza moczowego (Marchand i in., 1998). mRNA NK1R stwierdzono w mięśniu wypieracza, nabłonku dróg moczowych i strukturach naczyniowych, a śródbłonkowy NK1R był znacznie zwiększony. Wiązanie SP z NK1R na komórkach śródbłonka powoduje rozszerzenie naczyń, wynaczynienie osocza, uwalnianie cytokin oraz aktywację i infiltrację komórek odpornościowych, wszystkie charakterystyczne dla IC. Eksperymenty z myszami z nokautem NK1R pozwoliły po raz pierwszy wykazać obligatoryjność NK1R w zapaleniu pęcherza moczowego oraz udział tych receptorów w łańcuchu zdarzeń łączących degranulację mastocytów i stan zapalny (Saban i in., 2000).

Zmiany w sarkolemmie i zmieniona ekspresja receptorów tachykininy i bradykininy mogą znacząco wpływać na dalsze zdarzenia sygnalizacyjne prowadzące do propagacji objawów przewlekłego bólu miednicy mniejszej/IC. Odkrywając związek między objawami klinicznymi a molekularną regulacją nietypowej odpowiedzi zapalnej, możemy zaoferować nowe i specyficzne opcje leczenia. W obecnej propozycji chcielibyśmy kontynuować nasze badania patologii pęcherza moczowego, w szczególności zespołu objawowego PBS / śródmiąższowego zapalenia pęcherza, i zbadać wpływ zmian w ludzkich komórkach nabłonka dróg moczowych i mięśni wypieracza na sygnalizację, w której pośredniczy NK1R.

Biopsje od pacjentów kontrolnych i PBS będą pobierane w znieczuleniu ogólnym lub podpajęczynówkowym przez cewkę moczową z kopuły pęcherza moczowego i trójkąta za pomocą szczypiec do biopsji. Ekstrahowane będzie RNA, a poziomy ekspresji wybranych genów będą analizowane za pomocą PCR w czasie rzeczywistym Taqman i macierze ekspresji genów (Applied Biosystems). Obrazowanie wapnia zostanie wykorzystane do monitorowania aktywacji receptora i poziomów białek analizowanych za pomocą SDS-PAGE i Western Blotting. Dystrybucja tkanki receptora będzie analizowana metodą immunocytochemiczną.