Förändringar i uttryck av inflammatoriskt och kontraktilt protein hos patienter med smärtsamt blåssyndrom/IC.

Även om IC har erkänts i mer än ett sekel, förblir dess patofysiologi ett mysterium, och som en konsekvens är behandlingen av IC till stor del empirisk. En mängd mekanismer för sjukdomen har postulerats, allt från neuroinflammatoriska till autoimmuna eller möjligen infektiösa eller toxiska medel. Nyare studier har antytt en genetisk grund för sjukdomen, men i de flesta hypoteser är en inflammatorisk komponent av något slag involverad och många fynd stödjer denna teori. En ofta citerad hypotes är det läckande epitelet. Den friska urinblåsan är belagd med ett tunt mucinöst ämne från urinblåsan, som är sammansatt av många sulfonerade glykosaminoglykaner och glykoproteiner. Hos IC-patienter har, i motsats till kontroller, såväl som i vissa djurmodeller av IC, kvalitativa förändringar av detta ytskikt observerats (Lilly et al, 1990., Moskowitz et al, 1994). En initierande händelse (toxin) kan leda till funktionsförändringar och ökad permeabilitet. Detta leder i sin tur till nervsensibilisering och eventuellt uppreglering. Det finns allt fler bevis för att progressionen av IC åtföljs av en betydande uppreglering av sensoriska nerver i urinblåsan (Letourneau, 1996). Nervtillväxtfaktor (NGF), ett neurotropin som sensibiliserar nociceptorfibrer, rapporterades öka i urinblåsor hos IC-patienter (Lowe, 1997), och applicering av NGF i Wistar-råttor inducerade akut hyperaktivitet i urinblåsan (Chuang, 2001). Sensoriska nerver vid neurogen inflammation utsöndrar inflammatoriska mediatorer såsom Substans P (SP), en nociceptiv signalsubstans i det centrala och perifera nervsystemet. Ökade mängder av den frigjorda substansen P har hittats i urinen hos IC-patienter (Hohenfellner, et al, 1992, Pang et al., 1995, Pang et al., 1996), koncentrationen av substans P återspeglar patienternas grad av smärta (Chen et al., 1999). Substans P och relaterade tachykininer (TK) förmedlar en mängd olika fysiologiska processer i genitourinary, lung- och mag-tarmkanalen genom stimulering av NK1- och NK2-receptorer. Prekliniska bevis som erhållits genom användning av selektiva tachykininreceptorantagonister indikerar att endogena takykininer är involverade i reglering av glattmuskelkontraktion, vasodilatation, vattenmetabolism och inflammation. Nyligen visades det att mRNA som kodar för SP-receptorn NK1 ökar i blåsbiopsier från patienter med interstitiell cystit (Marchand et al., 1998). NK1R mRNA hittades i detrusormuskel, urotel och vaskulära strukturer, och endotelial NK1R ökade markant. SP-bindning till NK1R på endotelceller resulterar i vasodilatation, plasmaextravasation, cytokinfrisättning och aktivering och infiltration av immunceller, allt karaktäristiskt för IC. Experiment med NK1R knockoutmöss gjorde det för första gången möjligt att demonstrera det obligatoriska kravet på NK1R vid cystit och deltagande av dessa receptorer i händelsekedjan som kopplar samman mastcellsdegranulering och inflammation (Saban et al., 2000).

Förändringar i sarkolemma och förändrat uttryck av tachykinin- och bradykininreceptorerna kan avsevärt påverka nedströms signaleringshändelser som leder till förökning av symtomen på kronisk bäckensmärta/IC. Genom att avslöja sambandet mellan kliniska symtom och den molekylära regleringen av det atypiska inflammatoriska svaret kan vi kanske erbjuda nya och specifika behandlingsalternativ. I det aktuella förslaget vill vi vidareutveckla våra studier av urinblåsans patologi, särskilt det symtomatiska komplexet av PBS/interstitiell cystit, och undersöka effekten av förändringar i mänskliga urotel- och detrusormuskelceller på den NK1R-medierade signaleringen.

Biopsier från kontroller och PBS-patienter kommer att erhållas i antingen allmän eller spinal anestesi transuretralt från urinblåsan och trigon med en biopsitång. RNA kommer att extraheras och expressionsnivåerna för utvalda gener analyseras med Taqman realtids-PCR och genuttrycksmatriser (Applied Biosystems). Kalciumavbildning kommer att användas för att övervaka receptoraktiveringen och proteinnivåerna analyserade med SDS-PAGE och Western Blotting. Receptorvävnadsfördelning kommer att analyseras med immuno-cytokemi.