Endringer i inflammatorisk og kontraktilt proteinuttrykk hos pasienter med smertefullt blæresyndrom/IC.

Selv om IC har vært anerkjent i mer enn et århundre, forblir dens patofysiologi et mysterium, og som en konsekvens er behandlingen av IC stort sett empirisk. En rekke mekanismer for sykdommen har blitt postulert, alt fra nevroinflammatoriske til autoimmune eller muligens smittsomme eller toksiske midler. Nyere studier har antydet et genetisk grunnlag for sykdommen, men i de fleste hypoteser er en inflammatorisk komponent av noe slag involvert, og mange funn støtter denne teorien. En ofte sitert hypotese er det utette epitelet. Den friske blæren er belagt med et tynt slimete stoff blæreoverflatemucin, som er sammensatt av en rekke sulfonerte glykosaminoglykaner og glykoproteiner. Hos IC-pasienter, i motsetning til kontroller, så vel som i noen dyremodeller av IC, er det observert kvalitative endringer i dette overflatelaget (Lilly et al, 1990., Moskowitz et al, 1994). En initierende hendelse (toksin) kan føre til funksjonsendringer og økt permeabilitet. Dette fører igjen til nervesensibilisering og muligens oppregulering. Det er økende bevis på at progresjonen av IC er ledsaget av en betydelig oppregulering av sensoriske nerver i blæren (Letourneau, 1996). Nerve growth factor (NGF), et nevrotropin som sensibiliserer nociceptorfibre, ble rapportert å være økt i blærer hos IC-pasienter (Lowe, 1997), og bruk av NGF i Wistar-rotter induserte akutt blærehyperaktivitet (Chuang, 2001). Sensoriske nerver ved nevrogen betennelse skiller ut inflammatoriske mediatorer som Substance P (SP), en nociseptiv nevrotransmitter i det sentrale og perifere nervesystemet. Økte mengder av frigjort substans P er funnet i urinen til IC-pasienter (Hohenfellner, et al, 1992, Pang et al., 1995, Pang et al., 1996), konsentrasjonen av substans P gjenspeiler pasientens grad av smerte (Chen et al., 1999). Substans P og relaterte tachykininer (TK) medierer en rekke fysiologiske prosesser i kjønnsorganene, lungene og mage-tarmkanalen gjennom stimulering av NK1- og NK2-reseptorer. Preklinisk bevis oppnådd ved bruk av selektive tachykininreseptorantagonister indikerer at endogene tachykininer er involvert i regulering av glattmuskelkontraksjon, vasodilatasjon, vannmetabolisme og betennelse. Nylig ble det vist at mRNA som koder for SP-reseptor NK1 øker i blærebiopsier fra pasienter med interstitiell cystitt (Marchand et al., 1998). NK1R mRNA ble funnet i detrusormuskel, urotel og vaskulære strukturer, og endotel NK1R ble markert økt. SP-binding til NK1R på endotelceller resulterer i vasodilatasjon, plasmaekstravasasjon, cytokinfrigjøring og aktivering og infiltrasjon av immunceller, alt karakteristisk for IC. Eksperimenter med NK1R knockout-mus tillot for første gang å demonstrere det obligatoriske kravet til NK1R ved blærebetennelse og deltakelse av disse reseptorene i hendelseskjeden som forbinder mastcelledegranulering og betennelse (Saban et al., 2000).

Endringer i sarkolemmaet og endret uttrykk for tachykinin- og bradykininreseptorene kan ha en betydelig innvirkning på nedstrøms signalhendelser som fører til forplantning av symptomene på kroniske bekkensmerter/IC. Ved å avdekke sammenhengen mellom kliniske symptomer og den molekylære reguleringen av den atypiske inflammatoriske responsen, kan vi kanskje tilby nye og spesifikke behandlingsalternativer. I det nåværende forslaget ønsker vi å videreføre våre studier av urinblærepatologi, spesielt det symptomatiske komplekset av PBS/interstitiell cystitt, og undersøke effekten av endringer i humane urotel- og detrusormuskelceller på NK1R-mediert signalering.

Biopsier fra kontroller og PBS-pasienter vil bli tatt i enten generell eller spinal anestesi transuretralt fra blærekuppelen og trigon med en biopsitang. RNA vil bli ekstrahert, og ekspresjonsnivåene til utvalgte gener analyseres ved hjelp av Taqman sanntids PCR og genekspresjonsmatriser (Applied Biosystems). Kalsiumavbildning vil bli brukt til å overvåke reseptoraktivering og proteinnivåer analysert ved SDS-PAGE og Western Blotting. Reseptorvevsdistribusjon vil bli analysert ved immuncytokjemi.