Vliv Vorinostatu na expresi HIV RNA v klidových CD4+ T buňkách HIV+ Pts na stabilní ART

Toto je studie fáze I-II s jedním centrem u účastníků (ppts) s infekcí HIV-1, kteří dostávají stabilní ART, s plazmatickou HIV RNA < 50 kopií/ml. Základní ART bude zachována po celou dobu studie. Účastníci budou podrobeni screeningu pro vstup do studie a poté podstoupí úvodní hodnocení leukaferézy při vstupu do studie, aby se získali klidové CD4+ T buňky pro kvantifikaci klidové infekce CD4+ T buňkami (RCI) a klidové CD4+ T buňky asociované HIV RNA (RCVL) na výchozí úrovni. hodnocení. Všem účastníkům první leukaferézy a dalším účastníkům na základě předchozího stanovení latentního poolu bude provedena HIV-1 DNA PCR. Všichni účastníci, kteří vstoupí do studie, obdrží VOR při přidělených studijních návštěvách a podstoupí opakovanou leukaferézu za účelem měření účinků expozice VOR.

První období – Vorinostat s jednou a více dávkami (verze protokolu (v) 3.0 a 5.0)

Po podepsání informovaného souhlasu, dokončení screeningu a splnění všech požadavků na způsobilost jsou účastníci zapsáni a podstoupí základní leukaferézu (návštěva 2). Účastníci vykazující nebo nevykazující odpověď [kvantifikace klidové infekce CD4+ T lymfocyty (RCI) a klidové CD4+ T lymfocytární asociované HIV RNA (RCVL)] na ex vivo expozici VOR budou hodnoceni z hlediska reakce in vivo na jednu dávku VOR 400 mg. Účastníci navíc dokončili modifikovanou 24hodinovou farmakokinetickou (PK) analýzu. Všechny jsou monitorovány na nežádoucí účinky (AE), zejména ty, které omezují dávku. Monitorování bezpečnosti zahrnovalo klinické laboratoře, fyzikální vyšetření a hodnocení léků a nástup nových známek a symptomů při všech studijních návštěvách.

Účastníci, kteří prokáží in vivo významné zvýšení klidové CD4+ T lymfocytů asociované HIV RNA (RCVL) po jediné dávce VOR (protokol v3.0 a v5.0), jsou způsobilí postoupit do kroku 2. V kroku 2 (protokol v5 0), účastníkům jsou podávány více dávek VOR. Každý účastník obdrží celkem 22 dávek VOR ve 2 cyklech po 11 dávkách. Každý cyklus trvá 4 týdny. VOR 400 mg se podává v pondělí, úterý a středu, po nichž následují 4 dny bez léku během 1. 3 týdnů. Ve 4. týdnu cyklu bude VOR podán v pondělí a úterý, po kterém bude následovat leukaferéza přibližně 4 hodiny po 11. dávce (odhadovaná maximální hladina léku). Účastníci budou sledováni během 4 týdnů z hlediska bezpečnosti, která zahrnuje dokumentaci nežádoucích účinků, zejména nežádoucích účinků omezujících dávku, a dalších nežádoucích účinků spojených s postupy a událostmi studie. Po období odpočinku (přibližně 5 - 8 týdnů) účastníci opakují 4týdenní cyklus. Každý cyklus je analyzován na významné zvýšení klidových CD4+ T lymfocytů asociovaných HIV RNA (RCVL) ve srovnání se základní linií (ex-vivo) a reakcí v kroku 1 (jednorázová dávka in vivo).

Období dvě – jednotlivé, párové intervalové a vícenásobné intervalové dávky VOR (protokol v6.0)

Krok 1: Zařazení do tohoto studijního období bylo podobné postupům v Období 1. Účastníci byli odsouhlaseni s protokolem v6.0, dokončili screening a po splnění způsobilosti byli zařazeni do studie při návštěvě 2. Leukaferéza plánovaná na návštěvu 2 byla volitelné na základě předchozího zjištění základních parametrů. Vynechání této leukaferézy bylo určeno studií PI po analýze laboratorních dat z předchozích postupů leukaferézy. Bez ohledu na dokončení procedury leukaferézy při návštěvě 2 byl zápis do studie a sběr požadovaných výzkumných testů dokončen při návštěvě 2. Účastník byl vyšetřen a zařazen do kroku 1, dokud 12 hodnotitelných účastníků úspěšně neabsolvovalo více dávek VOR (krok 4), nebo dokud nejsou splněna pravidla pro zastavení studia. Odhaduje se, že může být prověřeno a zapsáno až 30 způsobilých účastníků, aby bylo celkem 12 hodnotitelných účastníků, kteří dokončí krok 3.

Krok 2 zahrnoval několik návštěv: podání VOR (návštěva 3), upravená/zkrácená 8hodinová PK analýza, postup leukaferézy a bezpečnostní sledování (návštěva 4). Po posouzení a zjištění bezpečného klinického stavu dostane každý účastník jednu dávku VOR 400 mg. Účastník zůstal na klinice na pozorování a odběr vzorků pro zkrácenou PK. Čtyři hodiny po dávce byla zahájena procedura leukaferézy. Předpokládalo se, že k dokončení kroku 1 a 2 dojde během minimálně 8 týdnů. Všichni účastníci musí před přechodem na krok 3 dokončit krok 2. Všichni účastníci jsou po leukaferéze 3 hodnoceni na in vivo odpověď na 400 mg VOR.

Progrese z kroku 2 (jedna dávka) do kroku 3 (párové dávky) byla založena na zvýšení RCVL každého účastníka po jejich první dávce 400 mg VOR (návštěva 3) ve srovnání s naměřeným na začátku (návštěva 2). Postup z kroku 3 (párové dávky) do kroku 4 (více dávek) bude založen na zvýšení RCVL každého účastníka po 2. v párové dávce VOR 400 mg (celkové dávky = 3, návštěva 6) ve srovnání s naměřeným na začátku (Návštěva 2).

Cílem protokolu v6.0 je určit optimální interval mezi dvěma dávkami VOR (Krok 2) a odpověď RCI (a sekundárně RCLV) na opakované dávky v tomto intervalu (Krok 3).

Krok 3 bude zahájen nejméně 4 týdny po dokončení bezpečnostní následné návštěvy kroku 2 (Návštěva 4). Pokud mezi návštěvou 4 a návštěvou 5 uplyne více než 60 dní, účastníci zopakují screeningové návštěvy laboratoří, aby se kvalifikovali pro pokračování ve studii. V kroku 3 budou podávány dvě párové dávky VOR 400 mg. Interval mezi 2 párovými dávkami může být krátký až 48 hodin (2 dny) a až 96 hodin (4 dny) od sebe. U účastníků byla hodnocena odpověď in vivo prostřednictvím 3. leukaferézy po druhé z párových dávek 400 mg VOR. U prvních tří (3) účastníků bude nejprve hodnocena reakce in vivo po 2. dávce párových dávek podaných s odstupem 48 hodin (2 dny). Následní účastníci budou hodnoceni z hlediska odpovědí na párové dávky s odstupem 48 hodin, nebo může být interval prodloužen až na 96 hodin (4 dny), podle nashromážděných odpovědí pozorovaných u následujících účastníků.

Pokud zareagují alespoň 2 ze 3 účastníků se 48hodinovými intervaly (definováno jako významný nárůst buněčně asociované HIV RNA v rámci subjektu), pak 3 následující účastníci obdrží 48hodinové intervaly. Pokud 2 z těchto 3 odpoví (4 z 6 celkem), pak 3 další účastníci obdrží 48hodinové intervaly. Pokud mezi prvních 6 hodnotitelných účastníků, kteří dostávají 48hodinové intervaly, jsou 3 nereagující, pak další účastníci obdrží 72hodinové intervaly. Účastníci, kteří obdrží 72hodinové intervaly, budou poté hodnoceni stejným způsobem jako ti, kteří dostanou 48hodinové intervaly, buď budou pokračovat další účastníci v 72hodinových intervalech, nebo se zvýší na 96hodinové intervaly. Krok 3 bude zapsán, dokud nebude získáno celkem 12 hodnotitelných subjektů s měřitelným zvýšením HIV RNA spojené s buňkami a tito účastníci postoupí do kroku 4.

Naše předběžné výsledky z verze protokolu 5.0 (období 1) jsou v souladu s hypotézou, že komplexní buněčné účinky expozice inhibitoru HDAC vyžadují k vyřešení více než 24 hodin. Pozorovali jsme to, co se zdá být antagonistickým účinkem, kdy dávka VOR otupuje účinek další dávky, když jsou dvě dávky podány v rozmezí 24 hodin od sebe. Účelem kroku 3 je stanovit optimální dávkovací interval, ve kterém je odpověď na Vorinostat setrvalá. Krok 3 bude studovat dávkovací intervaly; počínaje 48hodinovým intervalem a přechodem k delším intervalům mezi dávkami v závislosti na pozorovaném účinku s konečným cílem určit nejkratší interval, který poskytuje optimální účinek VOR.

Pokud účastník nereaguje ve svém počátečním dávkovacím intervalu 3. kroku, může být způsobilý opakovat krok 3. Mohou znovu vstoupit nebo opakovat krok 3 pouze jednou. Pouze znovu vstoupí do kroku 3, aby otestovali delší interval dávkování. Opět platí, že pokud mezi poslední bezpečnostní návštěvou v kroku 3 (návštěva 7) a jejich opětovným vstupem do kroku 3 uplyne > 60 dní, budou znovu vyšetřováni (pouze návštěva 1), aby se kvalifikovali pro pokračování ve studii.

Krok 4: Po období alespoň 6 týdnů, aby byla umožněna analýza dat, účastníci, kteří prokážou in vivo odpověď na 2. párovou dávku VOR, přistoupí ke kroku 4 a dostanou 10 dávek VOR 400 mg podaných ve stejnou dobu. interval, ve kterém byla v kroku 3 pozorována indukce HIV-RNA spojená s buňkami. Pokud mezi návštěvou 7 a návštěvou 8 uplyne více než 60 dní, účastníci zopakují screeningovou návštěvu laboratoří, aby se kvalifikovali pro pokračování ve studii. Po dokončení 10 dávek budou účastníci poté hodnoceni prostřednictvím 4. a poslední leukaferézy na odpověď in vivo na sériové dávkování VOR.

Předpokládá se, že Krok 4 bude probíhat minimálně 4 týdny; to se však může u účastníků lišit v závislosti na jejich fázi dávkovacího intervalu 3. Nashromážděné objemy krve a načasování mezi postupy leukaferézy určí dobu mezi jednotlivými kroky. Účastníci, kteří dokončí tento protokol (verze 6.0), kteří nejprve zareagují v kroku 3, obdrží celkem 5200 mg Vorinostatu. Účastník, který dokončí studii a zopakuje krok 3, obdrží celkem 6000 mg Vorinostatu. Pro informaci, účastníci, kteří dokončili předchozí verzi (5.0), dostali celkem 10 000 mg Vorinostatu bez jasného důkazu o jakékoli trvalé toxicitě spojené s drogami.

Změna frekvence infekce HIV-1 na milion klidových CD4+ buněk bude měřena po opakovaném krátkém intervalovém dávkování VOR v kroku 4. 4. leukaferéza (návštěva 12) bude porovnána se základní leukaferézou provedenou při návštěvě 2. Pokud dávkování VOR 400 mg v Kroku 4 je přerušeno z důvodu toxicity nebo intolerance, pak bude leukaferéza provedena co nejdříve po přerušení VOR. To je oprávněné, protože může dojít k vyčerpání klidové buněčné infekce; výskyt nové klidové buněčné infekce je nepravděpodobný v přítomnosti ART. Zkušební dávkování v tomto kroku bude pokračovat, dokud se studie nezastaví (chybějící odezva u pěti) nebo nebudou splněna pravidla toxicity.