Wpływ worinostatu na ekspresję RNA HIV w spoczynkowych limfocytach T CD4+ pacjentów HIV+ na stabilną ART

Jest to jednoośrodkowe badanie fazy I-II z udziałem uczestników (ppts) z zakażeniem HIV-1 otrzymujących ART w stabilnym stanie, z HIV RNA w osoczu < 50 kopii/ml. Wyjściowa ART będzie utrzymana przez cały okres badania. Uczestnicy zostaną poddani badaniu przesiewowemu przed włączeniem do badania, a następnie przejdą wstępną ocenę leukaferezy w celu uzyskania spoczynkowych limfocytów T CD4+ do ilościowego oznaczenia zakażenia spoczynkowymi limfocytami T CD4+ (RCI) i spoczynkowego RNA HIV związanego z limfocytami T CD4+ (RCVL) na początku badania ocena. Wszystkim uczestnikom leukaferezy po raz pierwszy oraz innym, o które poproszono na podstawie wcześniejszych oznaczeń puli latentnych, zostanie przeprowadzona reakcja PCR DNA HIV-1. Wszyscy uczestnicy biorący udział w badaniu otrzymają VOR podczas przypisanych wizyt studyjnych i zostaną poddani powtórnej leukaferezie w celu zmierzenia skutków narażenia na VOR.

Okres pierwszy – pojedyncza i wielokrotna dawka Vorinostatu (wersje protokołu (v) 3.0 i 5.0)

Po podpisaniu świadomej zgody, zakończeniu badań przesiewowych i spełnieniu wszystkich wymagań kwalifikacyjnych, uczestnicy są zapisywani i poddawani podstawowej leukaferezie (Wizyta 2). Uczestnicy wykazujący lub nie wykazujący odpowiedzi [oznaczenie ilościowe zakażenia spoczynkowym limfocytem T CD4+ (RCI) i spoczynkowego RNA HIV związanego z limfocytem T CD4+ (RCVL)] na ekspozycję ex vivo na VOR zostanie oceniony pod kątem odpowiedzi in vivo na pojedynczą dawkę VOR 400 mg. Dodatkowo uczestnicy wypełniają zmodyfikowaną 24-godzinną analizę farmakokinetyki (PK). Wszystkie są monitorowane pod kątem zdarzeń niepożądanych (AE), zwłaszcza tych, które ograniczają dawkę. Monitorowanie bezpieczeństwa obejmowało laboratoria kliniczne, badania fizykalne i ocenę leków oraz pojawienie się nowych oznak i objawów podczas wszystkich wizyt w ramach badania.

Uczestnicy, którzy wykażą in vivo znaczący wzrost spoczynkowego RNA HIV związanego z limfocytami T CD4+ (RCVL) po pojedynczej dawce VOR (protokół v3.0 i v5.0) kwalifikują się do przejścia do etapu 2. W etapie 2 (protokół v5 0), uczestnikom podaje się wielokrotne dawki VOR. Każdy uczestnik otrzymuje łącznie 22 dawki VOR w 2 cyklach po 11 dawek każdy. Każdy cykl trwa 4 tygodnie. VOR 400 mg podaje się w poniedziałek, wtorek i środę, po czym następuje 4 dni bez leku przez pierwsze 3 tygodnie. W 4. tygodniu cyklu VOR zostanie podany w poniedziałek i wtorek, a następnie leukafereza około 4 godziny po 11. dawce (szacowany szczytowy poziom leku). Uczestnicy będą monitorowani przez 4 tygodnie pod kątem bezpieczeństwa, co obejmuje dokumentację AE, zwłaszcza AE ograniczających dawkę, oraz innych AE związanych z procedurami i zdarzeniami badawczymi. Po okresie odpoczynku (około 5 - 8 tygodni) uczestnicy powtarzają 4-tygodniowy cykl. Każdy cykl jest analizowany pod kątem znaczącego wzrostu spoczynkowego RNA HIV związanego z limfocytami T CD4+ (RCVL) w porównaniu z odpowiedziami linii podstawowej (ex-vivo) i etapu 1 (pojedyncza dawka in vivo).

Okres drugi - pojedyncze, sparowane dawki interwałowe i wielokrotne dawki VOR (protokół v6.0)

Krok 1: Rejestracja do tego okresu badania przebiegała podobnie jak w okresie 1. Uczestników wyrażano zgodę na protokół w wersji 6.0, zakończono badanie przesiewowe i po spełnieniu kryteriów kwalifikacyjnych zapisano do badania podczas Wizyty 2. Leukafereza zaplanowana na Wizytę 2 została opcjonalne na podstawie uprzedniego ustalenia parametrów wyjściowych. Pominięcie tej leukaferezy zostało określone przez badanie PI, po analizie danych laboratoryjnych z poprzednich procedur leukaferezy. Niezależnie od zakończenia procedury leukaferezy podczas Wizyty 2, rejestracja do badania i zbieranie wymaganych testów badawczych zostały zakończone podczas Wizyty 2. Uczestników poddano badaniu przesiewowemu i włączono do Etapu 1, aż 12 ocenianych uczestników pomyślnie ukończyło wielokrotne dawki VOR (Krok 4), lub do czasu spełnienia zasad przerwania badania. Szacuje się, że do 30 kwalifikujących się uczestników może zostać sprawdzonych i zapisanych, aby zapewnić łącznie 12 ocenianych uczestników, którzy ukończą krok 3.

Etap 2 obejmował kilka wizyt: podanie VOR (wizyta 3), zmodyfikowana/skrócona 8-godzinna analiza PK, procedura leukaferezy i kontrola bezpieczeństwa (wizyta 4). Po dokonaniu oceny i ustaleniu stanu klinicznego bezpiecznego do dalszego leczenia, każdy uczestnik otrzymuje pojedynczą dawkę VOR 400 mg. Uczestnik pozostał w klinice na obserwacji i pobraniu próbek do skróconego PK. Cztery godziny po podaniu dawki rozpoczęto procedurę leukaferezy. Przewidywano, że ukończenie etapu 1 i 2 nastąpi w ciągu co najmniej 8 tygodni. Wszyscy uczestnicy muszą ukończyć Krok 2 przed przejściem do Kroku 3. Wszyscy uczestnicy są oceniani po leukaferezie Wizyty 3 pod kątem odpowiedzi in vivo na 400 mg VOR.

Progresja od etapu 2 (pojedyncza dawka) do etapu 3 (dawki sparowane) opierała się na zwiększeniu RCVL każdego uczestnika po pierwszej dawce 400 mg VOR (wizyta 3), w porównaniu z wartością zmierzoną na początku badania (wizyta 2). Progresja z etapu 3 (dawki w parach) do etapu 4 (dawki wielokrotne) będzie oparta na zwiększeniu RCVL każdego uczestnika po drugiej dawce w parze VOR 400 mg (dawki całkowite = 3, wizyta 6) w porównaniu z wartością zmierzoną na początku badania (Wizyta 2).

Celem protokołu v6.0 jest określenie optymalnego odstępu między dwiema dawkami VOR (krok 2) oraz odpowiedzi RCI (i wtórnie RCLV) na powtarzane dawki w tym odstępie (krok 3).

Krok 3 rozpocznie się co najmniej 4 tygodnie po zakończeniu wizyty kontrolnej dotyczącej bezpieczeństwa w ramach kroku 2 (wizyta 4). Jeśli między wizytą 4 a wizytą 5 upłynie więcej niż 60 dni, uczestnicy powtórzą badanie przesiewowe Visit labs, aby zakwalifikować się do dalszego udziału w badaniu. W kroku 3 zostaną podane dwie sparowane dawki VOR 400 mg. Przerwa między 2 sparowanymi dawkami może wynosić zaledwie 48 godzin (2 dni) i aż 96 godzin (4 dni) od siebie. Uczestnicy byli oceniani pod kątem odpowiedzi in vivo poprzez trzecią leukaferezę po drugiej z sparowanych dawek 400 mg VOR. Pierwszych trzech (3) uczestników zostanie najpierw ocenionych pod kątem odpowiedzi in vivo po drugiej dawce sparowanych dawek podanych w odstępie 48 godzin (2 dni). Kolejni uczestnicy będą oceniani pod kątem odpowiedzi na sparowane dawki w odstępie 48 godzin lub odstęp może zostać wydłużony do 96 godzin (4 dni), zgodnie z skumulowanymi odpowiedziami obserwowanymi u kolejnych uczestników.

Jeśli co najmniej 2 z 3 uczestników z 48-godzinnymi przerwami zareaguje (zdefiniowane jako znaczny wzrost RNA HIV związany z komórkami), wówczas 3 kolejnych uczestników otrzyma 48-godzinne odstępy. Jeśli 2 z tych 3 odpowie (łącznie 4 z 6), wówczas 3 dodatkowych uczestników otrzyma 48-godzinne przerwy. Jeśli wśród pierwszych 6 ocenianych uczestników otrzymujących 48-godzinne interwały znajdzie się 3 osób, które nie odpowiedziały, to kolejni uczestnicy otrzymają 72-godzinne interwały. Uczestnicy otrzymujący 72-godzinne odstępy będą następnie oceniani w taki sam sposób, jak ci, którzy otrzymują 48-godzinne odstępy, aby albo kontynuować dodatkowych uczestników w odstępach 72-godzinnych, albo zwiększyć do 96-godzinnych odstępów. Krok 3 będzie rejestrowany do momentu uzyskania łącznie 12 ocenianych osobników z mierzalnym wzrostem RNA HIV związanego z komórkami, a uczestnicy ci przejdą do etapu 4.

Nasze wstępne wyniki z wersji protokołu 5.0 (okres 1) są zgodne z hipotezą, że złożone efekty komórkowe ekspozycji na inhibitor HDAC wymagają więcej niż 24 godzin, aby rozwiązać. Zaobserwowaliśmy coś, co wydaje się być efektem antagonistycznym, gdy dawka VOR osłabia efekt następnej dawki, gdy dwie dawki są podane w ciągu 24 godzin od siebie. Celem etapu 3 jest ustalenie optymalnego odstępu między kolejnymi dawkami, w którym utrzymuje się odpowiedź na worinostat. Krok 3 zbada odstępy między dawkami; zaczynając od 48-godzinnej przerwy i przechodząc do dłuższych przerw między dawkami w zależności od zaobserwowanego efektu, z ostatecznym celem określenia najkrótszego odstępu, który daje optymalny efekt VOR.

Jeśli uczestnik nie zareaguje w początkowym okresie dawkowania Kroku 3, może kwalifikować się do powtórzenia Kroku 3. Mogą ponownie wejść lub powtórzyć Krok 3 tylko jeden raz. Wrócą ponownie do kroku 3 tylko w celu przetestowania dłuższego odstępu między kolejnymi dawkami. Ponownie, jeśli upłynie > 60 dni między ostatnią wizytą bezpieczeństwa na etapie 3 (wizyta 7) a ponownym wejściem do etapu 3, zostaną ponownie poddani badaniu przesiewowemu (tylko wizyta 1), aby zakwalifikować się do kontynuacji badania.

Krok 4: Po okresie co najmniej 6 tygodni, aby umożliwić analizę danych, uczestnicy, którzy wykażą odpowiedź in vivo na drugą dawkę sparowanej dawki VOR, przejdą do kroku 4 i otrzymają 10 dawek VOR 400 mg podanych w tym samym czasie. odstęp czasu, w którym zaobserwowano indukcję HIV-RNA związaną z komórkami w kroku 3. Jeśli między Wizytą 7 a Wizytą 8 upłynie więcej niż 60 dni, uczestnicy powtórzą wizytę przesiewową w laboratoriach, aby zakwalifikować się do dalszego udziału w badaniu. Po podaniu 10 dawek uczestnicy zostaną poddani czwartej i ostatniej leukaferezie pod kątem odpowiedzi in vivo na seryjne dawkowanie VOR.

Przewiduje się, że etap 4 nastąpi w ciągu co najmniej 4 tygodni; jednak może się to różnić między uczestnikami w zależności od etapu przerw w dawkowaniu Kroku 3. Skumulowane objętości krwi i czas między zabiegami leukaferezy określą długość czasu między każdym etapem. Uczestnicy wypełniający niniejszy protokół (wersja 6.0), którzy początkowo zareagują w kroku 3, otrzymają łącznie 5200 mg worinostatu. Uczestnik kończący badanie, który powtórzy krok 3, otrzyma łącznie 6000 mg Vorinostatu. Dla porównania, uczestnicy, którzy ukończyli poprzednią wersję (5.0), otrzymali łącznie 10 000 mg worinostatu bez wyraźnych dowodów na jakąkolwiek trwałą toksyczność związaną z lekiem.

Zmiana częstości zakażenia HIV-1 na milion spoczynkowych komórek CD4+ zostanie zmierzona po wielokrotnym podaniu VOR w krótkich odstępach czasu w kroku 4. Czwarta leukafereza (wizyta 12) zostanie porównana z wyjściową leukaferezą wykonaną podczas wizyty 2. Jeśli podawanie dawki VOR 400 mg w kroku 4 zostało przerwane z powodu toksyczności lub nietolerancji, wtedy po przerwaniu VOR zostanie przeprowadzona leukafereza tak szybko, jak to możliwe. Jest to uzasadnione, tak jakby mogło dojść do wyczerpania infekcji komórek spoczynkowych; wystąpienie nowej infekcji spoczynkowej komórek jest mało prawdopodobne w obecności ART. Dawkowanie testowe na tym etapie będzie kontynuowane do momentu przerwania badania (brak odpowiedzi w pięciu przypadkach) lub spełnienia zasad dotyczących toksyczności.