Влияние вориностата на экспрессию РНК ВИЧ в покоящихся CD4+ Т-клетках ВИЧ+ пациентов, получающих стабильную АРТ

Это одноцентровое исследование фазы I-II с участием участников (ppts) с инфекцией ВИЧ-1, получающих стабильную АРТ, с РНК ВИЧ в плазме < 50 копий/мл. Базовый уровень АРТ будет поддерживаться на протяжении всего исследования. Участники будут проверены для включения в исследование, а затем пройдут начальную оценку лейкафереза ​​при включении в исследование, чтобы получить покоящиеся CD4+ Т-клетки для количественного определения покоящейся CD4+ Т-клеточной инфекции (RCI) и покоящейся CD4+ Т-клеточной ассоциированной РНК ВИЧ (RCVL) на исходном уровне. оценка. Всем участникам лейкафереза, впервые принимавшим участие в лейкоферезе, а также другим участникам, по запросу на основании предварительных определений латентного пула, будет проведена ПЦР ДНК ВИЧ-1. Все участники, включенные в исследование, получат VOR во время назначенных учебных посещений и пройдут повторный лейкаферез для измерения эффектов воздействия VOR.

Первый период - однократная и многократная доза вориностата (версии протокола (v) 3.0 и 5.0)

После подписания информированного согласия, завершения скрининга и выполнения всех квалификационных требований участники зачисляются и проходят базовый лейкаферез (посещение 2). Участники, демонстрирующие или не проявляющие ответ [количественная оценка инфекции CD4+ T-клеток в покое (RCI) и РНК ВИЧ, ассоциированной с T-клетками CD4+ в покое (RCVL)] на воздействие ex vivo VOR, будут оцениваться на предмет ответа in vivo на однократную дозу ВОР 400 мг. Кроме того, участники проходят модифицированный 24-часовой фармакокинетический (ФК) анализ. Все они контролируются на предмет нежелательных явлений (НЯ), особенно тех, которые ограничивают дозу. Мониторинг безопасности включал клинические лаборатории, физические осмотры и оценку лекарств, а также появление новых признаков и симптомов во время всех визитов в рамках исследования.

Участники, продемонстрировавшие in vivo значительное увеличение РНК ВИЧ, ассоциированной с Т-клетками CD4+ (RCVL) после однократной дозы VOR (протоколы v3.0 и v5.0), имеют право перейти к этапу 2. На этапе 2 (протокол v5 .0), участникам вводят несколько доз VOR. Каждый участник получает 22 полных дозы VOR в течение 2 циклов по 11 доз в каждом. Каждый цикл длится 4 недели. VOR 400 мг вводят в понедельник, вторник и среду, после чего в течение 1-х 3-х недель в течение 4 дней препарат не принимается. На 4-й неделе цикла VOR будет вводиться в понедельник и вторник с последующим лейкаферезом примерно через 4 часа после 11-й дозы (приблизительный пиковый уровень препарата). Участники будут находиться под наблюдением в течение 4 недель на предмет безопасности, включая документирование НЯ, особенно НЯ, ограничивающих дозу, и других НЯ, связанных с исследовательскими процедурами и событиями. После периода отдыха (примерно 5-8 недель) участники повторяют 4-недельный цикл. Каждый цикл анализируют на предмет значительного увеличения содержания РНК ВИЧ, ассоциированной с CD4+ Т-клетками (RCVL), в покое по сравнению с исходным уровнем (ex-vivo) и ответом на этапе 1 (однократная доза in-vivo).

Второй период - однократная, парно-интервальная и многократная интервальная доза VOR (протокол v6.0)

Шаг 1: Зачисление в этот период исследования было аналогично процедурам в период 1. Участники дали согласие на протокол версии 6.0, прошли скрининг и после соответствия требованиям были включены в исследование на визите 2. Лейкаферез, запланированный на визит 2, был необязательный, основанный на предварительном установлении базовых параметров. Отсутствие этого лейкафереза ​​определялось исследованием PI после анализа лабораторных данных предыдущих процедур лейкафереза. Независимо от завершения процедуры лейкафереза ​​на визите 2, зачисление в исследование и сбор необходимых исследовательских анализов завершались на визите 2. Участники проходили скрининг и включались в этап 1 до тех пор, пока 12 поддающихся оценке участников успешно не завершили многократные дозы VOR (этап 4), или до тех пор, пока не будут соблюдены правила прекращения исследования. Предполагается, что до 30 подходящих участников могут быть проверены и зачислены, чтобы обеспечить в общей сложности 12 поддающихся оценке участников, которые завершат Шаг 3.

Шаг 2 включал несколько посещений: введение VOR (посещение 3), модифицированный/сокращенный 8-часовой фармакокинетический анализ, процедуру лейкафереза ​​и последующее наблюдение за безопасностью (посещение 4). После оценки и подтверждения безопасного для продолжения клинического состояния каждый участник получает однократную дозу ВОР 400 мг. Участник остался в клинике для наблюдения и сбора проб для сокращенного ПК. Через четыре часа после введения дозы была начата процедура лейкафереза. Ожидалось, что завершение этапов 1 и 2 произойдет в течение как минимум 8 недель. Все участники должны пройти Шаг 2, прежде чем перейти к Шагу 3. Всех участников оценивают после визита 3 лейкафереза ​​на предмет ответа in vivo на 400 мг VOR.

Переход от этапа 2 (однократная доза) к этапу 3 (парные дозы) основывался на увеличении RCVL каждого участника после их первой дозы 400 мг VOR (посещение 3) по сравнению с исходным уровнем (посещение 2). Переход от этапа 3 (парные дозы) к этапу 4 (многократные дозы) будет основываться на увеличении RCVL каждого участника после 2-го приема парной дозы VOR 400 мг (всего доз = 3, визит 6) по сравнению с исходным уровнем. (Посещение 2).

Целью протокола v6.0 является определение оптимального интервала между двумя дозами VOR (шаг 2) и ответ RCI (и вторично RCLV) на повторные дозы в этом интервале (шаг 3).

Шаг 3 будет начат как минимум через 4 недели после завершения контрольного визита в рамках Шага 2 (посещение 4). Если между посещением 4 и посещением 5 проходит более 60 дней, участники будут повторно проходить скрининг в лабораториях посещения, чтобы получить право на продолжение участия в исследовании. На этапе 3 будут введены две парные дозы VOR 400 мг. Интервал между двумя парными дозами может составлять от 48 часов (2 дня) до 96 часов (4 дня) друг от друга. Участников оценивали на предмет ответа in vivo с помощью 3-го лейкафереза ​​после второй из парных доз 400 мг VOR. Первые три (3) участника сначала будут оцениваться на предмет ответа in vivo после введения второй дозы парных доз с интервалом в 48 часов (2 дня). Последующие участники будут оцениваться на предмет ответов на парные дозы, разделенные 48 часами, или интервал может быть увеличен до 96 часов (4 дня), в зависимости от накопленных ответов, наблюдаемых у последующих участников.

Если по крайней мере 2 из 3 участников с 48-часовыми интервалами ответят (определяется как значительное внутрисубъектное увеличение ассоциированной с клеткой РНК ВИЧ), то 3 последующих участника получат 48-часовые интервалы. Если ответят 2 из этих 3 (всего 4 из 6), то 3 дополнительных участника получат 48-часовые интервалы. Если среди первых 6 поддающихся оценке участников, получающих 48-часовые интервалы, есть 3 не ответивших, то последующие участники получат 72-часовые интервалы. Затем участники, получающие 72-часовые интервалы, будут оцениваться так же, как и те, кто получает 48-часовые интервалы, либо для продолжения дополнительных участников с 72-часовыми интервалами, либо для увеличения до 96-часовых интервалов. Шаг 3 будет зачислен до тех пор, пока не будет получено в общей сложности 12 поддающихся оценке субъектов с измеримым увеличением ассоциированной с клеткой РНК ВИЧ, и эти участники перейдут к шагу 4.

Наши предварительные результаты протокола версии 5.0 (период 1) согласуются с гипотезой о том, что сложные клеточные эффекты воздействия ингибитора HDAC требуют более 24 часов для устранения. Мы наблюдали то, что кажется антагонистическим эффектом, когда доза VOR притупляет эффект следующей дозы, когда две дозы вводятся в течение 24 часов друг от друга. Целью шага 3 является определение оптимального интервала дозирования, при котором сохраняется ответ на вориностат. На шаге 3 будут изучены интервалы дозирования; начиная с 48-часового интервала и переходя к более длительным интервалам между дозами в зависимости от наблюдаемого эффекта с конечной целью определить кратчайший интервал, обеспечивающий оптимальный эффект ВОР.

Если участник не отвечает в течение начального интервала дозирования на этапе 3, он может иметь право на повторение этапа 3. Они могут повторно ввести или повторить шаг 3 только один раз. Они будут повторно входить в Шаг 3 только для проверки более длительного интервала дозирования. Опять же, если между последним визитом безопасности на этапе 3 (посещение 7) и их повторным входом на этап 3 проходит > 60 дней, они будут проходить повторный скрининг (только посещение 1), чтобы получить право на продолжение исследования.

Шаг 4: По прошествии не менее 6 недель, чтобы можно было провести анализ данных, участники, демонстрирующие ответ in vivo на 2-ю парную дозу VOR, перейдут к шагу 4 и получат 10 доз VOR 400 мг, вводимых одновременно. интервал, в течение которого на этапе 3 наблюдалась ассоциированная с клеткой индукция РНК ВИЧ. Если между визитами 7 и 8 прошло более 60 дней, участники повторно пройдут скрининговые визиты в лабораторию, чтобы получить право на продолжение участия в исследовании. По завершении 10 доз участников затем будут оценивать с помощью 4-го и последнего лейкафереза ​​на предмет ответа in vivo на серийное введение VOR.

Ожидается, что этап 4 будет выполняться в течение как минимум 4 недель; однако это может варьироваться среди участников в зависимости от их этапа интервала дозирования на этапе 3. Накопленные объемы крови и время между процедурами лейкафереза ​​будут определять продолжительность времени между каждым этапом. Участники, завершающие этот протокол (версия 6.0), которые первоначально ответят на шаге 3, получат в общей сложности 5200 мг вориностата. Участник, завершивший исследование и повторивший Шаг 3, получит в общей сложности 6000 мг вориностата. Для справки, участники, которые завершили предыдущую версию (5.0), получили в общей сложности 10 000 мг вориностата без явных доказательств какой-либо стойкой токсичности, связанной с лекарством.

Изменение частоты ВИЧ-1-инфекции на миллион покоящихся CD4 + клеток будет измеряться после многократного введения VOR с короткими интервалами на этапе 4. 4-й лейкаферез (посещение 12) будет сравниваться с исходным лейкаферезом, проведенным при посещении 2. Если дозирование VOR 400 мг на этапе 4 прерывается из-за токсичности или непереносимости, тогда лейкаферез будет выполнен как можно скорее после прерывания VOR. Это оправдано тем, что может произойти истощение инфекции покоящихся клеток; маловероятно появление новой инфекции покоящихся клеток в присутствии АРТ. Тестовое дозирование на этом этапе будет продолжаться до прекращения исследования (отсутствие ответа в пяти случаях) или до тех пор, пока не будут соблюдены правила токсичности.