Hledání transkripčních biomarkerů v konverzním protokolu od inhibitorů kalcineurinu k mykofenolátmofetilu (TBCP)

Úvod: Imunosupresivní léčba (IS) má několik a často se vyskytujících nežádoucích účinků; mezi ně patří: těžké infekce, diabetes mellitus, arteriální hypertenze, osteoporóza, neurologické poruchy, selhání ledvin, dyslipémie, zvýšené kardiovaskulární riziko, rakovina atd. Po 5 letech se u 18 % jaterních receptorů rozvine selhání ledvin, riziko vzniku rakoviny je po LT třikrát vyšší a 30 % receptorů jaterního štěpu dříve infikovaných virem hepatitidy C (HCV) má 5 let po LT cirhózu, pravděpodobně kvůli vliv IS na virovou kinetiku. Ideální situací by bylo, kdyby příjemci transplantátu jater dostali dostatek IS k inhibici imunitní reakce proti aloštěpu, a zároveň by se vyhnuli nadměrnému účinku nad kapacitu imunitního systému rozpoznat patogeny, nádorové buňky a minimalizovali nežádoucí účinky nebo ještě více, neurčitou přijetí štěpu při úplné absenci IS, koncept, který se na klinice nazývá operační tolerance (OT). OT se vyskytuje u přibližně 20 % příjemců jater. Takže i když je potenciální přínos důležitý, týká se pouze malé části příjemců jater. V minulosti byla v několika studiích hodnocena odlišná, ale související strategie, spočívající ve změně z IS založeného na inhibitorech kalcineurinu (CNI) na jiný méně intenzivní založený na mofetilmykofenolátu (MMF), o kterém je známo, že má méně nežádoucích účinků. , zachovávají funkci ledvin a neovlivňují funkci a proliferaci T regulačních buněk, které se podílejí na vzniku OT. V nedávné studii (v tisku) vyšetřovatelé provedli stažení IS více než stovce příjemců jater a vyšetřovatelé zjistili, že ti, kteří byli klasifikováni jako operačně tolerantní (40 %), kde od LT do vysazení IS uplynula delší doba, ti, kteří dostávali nižší dávky CNI a ti, kteří dostávali monoterapii MMF. Vyšetřovatelé byli také schopni rozlišit mezi funkčně tolerantními příjemci jater a těmi, u kterých došlo k odmítnutí na základě jejich rozdílné genové exprese (vyhodnocené pomocí mikročipu celého genomu) těsně před stažením IS.

Cíl studie: provést konverzi IS z CNI na monoterapii MMF a hledat transkripční biomarkery využívající celou genomovou expresní studii provedenou s mikročipy na základní linii na jaterní tkáni a PBMC, aby se pokusila najít soubor odlišně exprimovaných genů schopných korelovat s úspěšnou konverzí a tedy vytvořit soubor transkripčních biomarkerů potenciálně schopných předpovědět výsledek konverze IS na nezávislé kohortě jaterních příjemců.

Metody: V naší kohortě příjemců transplantovaných jater bude přijato 40 pacientů. Studie potrvá 48 týdnů. Kritéria pro zařazení budou a) transplantace jater před více než 2 lety, b) stabilní funkce štěpu, b) žádné autoimunitní onemocnění jater v anamnéze, c) absence rejekce v posledních 12 měsících, d) použití inhibitorů kalcineurinu (CNI) jako monoterapie, e) absence rejekce na výchozí jaterní biopsii, d) minimální hladiny takrolimu > 3 ng/ml nebo hladiny cyklosporinu C2 > 30 ng/ml, e) podpis formuláře informovaného souhlasu. Po screeningovém postupu bude mykofenolát mofetil zahájen (4. týden) v dávce 500 mg dvakrát denně po dobu dvou týdnů a poté (2. týden) zvýšen na 1 000 mg dvakrát denně a CNI se sníží na 50 % počáteční dávka. Po dvou týdnech (0. týden) bude CNI zcela ukončena (úplná konverze IS). Vyšetřovatelé budou pacienty sledovat každé 4 týdny až do 48 týdnů po úplné konverzi IS. Celková doba studia bude trvat 52 týdnů. Na začátku bude izolována mRNA ze vzorků jater a mononukleárních buněk periferní krve. Tato mRNA bude použita k vyhodnocení exprese celého genomu pomocí mikročipů Affimetrix. Kromě toho bude frekvence T regulačních buněk měřena pomocí imunofenotypizace buněk periferní krve na začátku a na konci sledování. Klinické proměnné budou hodnoceny za účelem stanovení vývoje renálních funkcí a dalších kardiovaskulárních rizikových faktorů.

Očekávané výsledky: Vyšetřovatelé očekávají, že na konci studie bude většina příjemců schopna úspěšného odmítnutí a menší skupina (kolem 30 %) toho nebude schopna kvůli odmítnutí. Poté se základní vzorky mRNA použijí k provedení celogenomových mikročipů. Pomocí bioinformatických postupů se výzkumníci pokusí stanovit rozdílnou genovou expresi mezi geny s úspěšnou konverzí a těmi, u kterých dojde k odmítnutí. To umožní vyšetřovatelům určit nejmenší sadu genů schopných rozlišit mezi těmito pacienty. Genová exprese bude také korelována s imunofenotypizací buněk periferní krve a klinickými proměnnými.