Поиск транскрипционных биомаркеров в протоколе преобразования ингибиторов кальциневрина в микофенолат мофетил (TBCP)

Введение. Иммуносупрессивная терапия (ИС) имеет несколько частых побочных эффектов; среди них: тяжелые инфекции, сахарный диабет, артериальная гипертензия, остеопороз, неврологические расстройства, почечная недостаточность, дислипемии, повышенный сердечно-сосудистый риск, онкологические заболевания и др. Через 5 лет у 18% рецепторов печени развивается почечная недостаточность, риск развития рака в три раза выше после ТП и у 30% рецепторов трансплантата печени, ранее инфицированных вирусом гепатита С (ВГС), через 5 лет после ТП возникает цирроз, вероятно, из-за Влияние ИС на кинетику вируса. Идеальной ситуацией было бы, чтобы реципиенты трансплантата печени получали достаточное количество ИС для подавления иммунного ответа на аллотрансплантат, избегая при этом чрезмерного воздействия на способность иммунной системы распознавать патогены, опухолевые клетки и сводя к минимуму неблагоприятные эффекты или даже больше, неопределенное время. приживление трансплантата при полном отсутствии ИИ, понятие, которое в клинике называют операционной толерантностью (ОТ). ОТ встречается примерно у 20% реципиентов печени. Таким образом, хотя потенциальная польза важна, она затрагивает лишь небольшую часть реципиентов печени. Другая, но родственная стратегия оценивалась в нескольких исследованиях в прошлом и заключалась в переходе от ИС на основе ингибиторов кальциневрина (ИКН) к другой, менее интенсивной, на основе мофетила микофенолата (ММФ), который, как известно, имеет меньше побочных эффектов. , сохраняют функцию почек и не влияют на функцию и пролиферацию Т-регуляторных клеток, которые участвуют в развитии ОТ. В недавнем исследовании (в печати) исследователи провели отмену ИС более чем сотне реципиентов печени, и исследователи обнаружили, что у тех, кто был классифицирован как операционно толерантный (40%), у тех, у кого прошло больше времени с момента ТП до отмены ИС, те, кто получал более низкие дозы CNI и те, кто получал монотерапию MMF. Исследователи также смогли провести различие между реципиентами печени, устойчивыми к оперативному вмешательству, и теми, у кого развилось отторжение на основе дифференциальной экспрессии ее гена (оцененной с помощью полногеномного микрочипа) непосредственно перед изъятием ИС.

Цель исследования: провести конверсию ИИ с CNI на монотерапию ММФ и искать транскрипционные биомаркеры, используя исследование экспрессии всего генома, выполненное с микрочипами на исходном уровне на ткани печени и PBMC, чтобы попытаться найти набор дифференциально экспрессируемых генов, способных коррелировать с успешной конверсией и таким образом, для создания набора биомаркеров транскрипции, потенциально способных предсказать результат преобразования IS в независимой когорте реципиентов печени.

Методы: среди нашей когорты реципиентов печени будут набраны 40 пациентов. Исследование продлится 48 недель. Критериями включения будут: а) трансплантация печени более 2 лет назад, б) стабильная функция трансплантата, б) отсутствие в анамнезе аутоиммунного заболевания печени, в) отсутствие отторжения в течение последних 12 месяцев, г) использование ингибиторов кальциневрина (ИКН) в качестве монотерапия, д) отсутствие отторжения при исходной биопсии печени, г) минимальные уровни такролимуса > 3 нг/мл или уровни циклоспорина С2 > 30 нг/мл, д) подпись формы информированного согласия. После процедуры скрининга микофенолата мофетил будет начат (неделя -4) в дозе 500 мг два раза в день в течение двух недель, а затем (неделя -2) будет увеличен до 1000 мг два раза в день, а CNI будет снижен на 50% начальная доза. Через две недели (неделя 0) использование CNI будет полностью прекращено (полное преобразование IS). Исследователи будут наблюдать за пациентами каждые 4 недели до 48 недель после полной конверсии ИС. Полный период обучения продлится 52 недели. На исходном уровне будет выделена мРНК из образцов печени и мононуклеарных клеток периферической крови. Эта мРНК будет использоваться для оценки экспрессии всего генома с использованием микрочипов Affimetrix. Кроме того, будет измеряться частота Т-регуляторных клеток с помощью иммунофенотипирования клеток периферической крови на исходном уровне и в конце наблюдения. Клинические переменные будут оцениваться для определения эволюции почечной функции и других сердечно-сосудистых факторов риска.

Ожидаемые результаты: Исследователи ожидают, что в конце исследования большинству реципиентов удастся получить успешный отказ, а небольшая группа (около 30%) не сможет этого сделать из-за отказа. Затем исходные образцы мРНК будут использоваться для создания полногеномных микрочипов. Используя процедуры биоинформатики, исследователи предпримут попытку установить дифференциальную экспрессию генов между теми, у кого произошла успешная конверсия, и теми, у которых развилось отторжение. Это позволит исследователям определить наименьший набор генов, способный различать этих пациентов. Экспрессия генов также будет коррелировать с иммунофенотипированием клеток периферической крови и клиническими переменными.