Etsi transkription biomarkkereita muunnosprotokollasta kalsineuriini-inhibiittoreista mykofenolaattimofetiiliin (TBCP)

Johdanto: Immunosuppressiivisella hoidolla (IS) on useita ja usein haittavaikutuksia; niitä ovat: vakavat infektiot, diabetes mellitus, verenpainetauti, osteoporoosi, neurologiset sairaudet, munuaisten vajaatoiminta, dyslipemiat, lisääntynyt kardiovaskulaarinen riski, syöpä jne. Viiden vuoden kuluttua 18 %:lle maksareseptoreista kehittyy munuaisten vajaatoiminta, riski sairastua syöpään on kolme kertaa suurempi LT:n jälkeen ja 30 %:lla hepatiitti C -viruksella (HCV) aiemmin infektoituneista maksasiirteen reseptoreista on maksakirroosi 5 vuotta LT:n jälkeen, luultavasti johtuen IS:n vaikutus viruskinetiikkaan. Ihanteellinen tilanne olisi, että maksansiirron vastaanottajat saavat tarpeeksi IS:tä estääkseen immuunivasteen allograftia vastaan, samalla kun vältetään liiallinen vaikutus immuunijärjestelmän kykyyn tunnistaa patogeenejä, kasvainsoluja ja minimoida haitalliset vaikutukset tai jopa enemmän, määräämättömän ajan. siirteen hyväksyminen IS:n täydellisessä poissa ollessa, käsite, jota klinikalla kutsutaan operatiiviseksi toleranssiksi (OT). OT esiintyy noin 20 prosentilla maksan saajista. Joten vaikka mahdollinen hyöty on tärkeä, se vaikuttaa vain pieneen osaan maksan saajia. Erilaista, mutta samankaltaista strategiaa on arvioitu useissa aiemmin tehdyissä kokeissa, ja se koostuu siirtymisestä kalsineuriinin estäjiin (CNI) perustuvasta IS:stä toiseen, vähemmän voimakkaaseen mofetilimykofenolaattiin (MMF), jolla tiedetään olevan vähemmän haitallisia vaikutuksia. , säilyttävät munuaisten toiminnan eivätkä vaikuta OT:n kehittymiseen osallistuvien T-säätelysolujen toimintaan ja lisääntymiseen. Äskettäisessä tutkimuksessa (painossa) tutkijat suorittivat IS-vieroituksen yli sadalle maksan vastaanottajalle, ja tutkijat havaitsivat, että ne, jotka luokiteltiin operatiivisesti sietäviksi (40 %), kun ne, joilla oli pidempi aika kulunut LT:stä IS:ään, ne, jotka saivat pienempiä CNI-annoksia, ja ne, jotka saivat MMF-monoterapiaa. Tutkijat pystyivät myös erottamaan toiminnallisesti tolerantit maksan vastaanottajat ja ne, jotka saivat hyljintäreaktion sen erilaisen geeniekspression perusteella (arvioitu koko genomin mikrosirulla) juuri ennen IS-poistoa.

Tutkimuksen tavoite: suorittaa IS-muunnos CNI:stä MMF-monoterapiaksi ja etsiä transkriptionaalisia biomarkkereita käyttämällä koko genomin ilmentymistutkimusta, joka tehtiin mikrosiruilla lähtötasolla maksakudoksessa ja PBMC:issä, jotta yritetään löytää joukko differentiaalisesti ilmentyviä geenejä, jotka pystyvät korreloimaan onnistuneen muuntamisen kanssa ja näin ollen luoda joukko transkriptiobiomarkkereita, jotka voivat mahdollisesti ennustaa IS-konversion tuloksen riippumattomassa maksan vastaanottajaryhmässä.

Menetelmät: Maksansiirron saajien joukkoomme rekrytoidaan 40 potilasta. Tutkimus kestää 48 viikkoa. Osallistumiskriteerit ovat a) maksansiirto yli 2 vuotta sitten, b) vakaa siirteen toiminta, b) ei autoimmuuni maksasairautta, c) hyljintäreaktion puuttuminen viimeisten 12 kuukauden aikana, d) kalsineuriinin estäjien (CNI) käyttö monoterapia, e) hylkimisreaktion puuttuminen lähtötilanteessa maksan biopsiassa, d) takrolimuusin vähimmäistasot > 3 ng/ml tai siklosporiini C2 -tasot > 30 ng/ml, e) tietoisen suostumuslomakkeen allekirjoitus. Seulontatoimenpiteen jälkeen mykofenolaattimofetiili aloitetaan (viikko -4) annoksella 500 mg kahdesti vuorokaudessa kahden viikon ajan ja sitten (viikko -2) nostetaan 1000 mg:aan kahdesti päivässä ja CNI lasketaan 50 %:lla aloitusannos. Kahden viikon kuluttua (viikko 0) CNI lopetetaan kokonaan (täydellinen IS-muunnos). Tutkijat seuraavat potilaita 4 viikon välein aina 48 viikkoon asti täydellisen IS-muunnoksen jälkeen. Koko opintojakso kestää 52 viikkoa. Lähtötasolla mRNA-maksanäytteet ja perifeerisen veren mononukleaarisolut eristetään. Tätä mRNA:ta käytetään arvioimaan koko genomin ilmentymistä käyttämällä Affimetrix-mikrosiruja. Lisäksi T-säätelysolujen esiintymistiheys mitataan käyttämällä perifeeristen verisolujen immunofenotyypitystä lähtötilanteessa ja seurannan lopussa. Kliiniset muuttujat arvioidaan munuaisten toiminnan ja muiden kardiovaskulaaristen riskitekijöiden kehityksen määrittämiseksi.

Odotetut tulokset: Tutkijat odottavat, että tutkimuksen lopussa suurin osa vastaanottajista on onnistunut hylkäämään ja pieni ryhmä (noin 30 %) ei voi tehdä sitä hylkäämisen vuoksi. Sitten perustason mRNA-näytteitä käytetään koko genomin mikrosirujen suorittamiseen. Bioinformatiikan menetelmiä käyttäen tutkijat yrittävät saada aikaan differentiaalisen geenin ilmentymisen onnistuneen konversion ja hyljintäreaktion saaneiden kesken. Tämän avulla tutkijat voivat määrittää pienimmän joukon geenejä, jotka pystyvät erottamaan nämä potilaat. Geenien ilmentyminen korreloi myös perifeeristen verisolujen immunofenotyyppien ja kliinisten muuttujien kanssa.