Søg efter transkriptionelle biomarkører i en konverteringsprotokol fra calcineurinhæmmere til mycophenolatmofetil (TBCP)

Introduktion: Immunsuppressiv behandling (IS) har flere og hyppige bivirkninger; blandt dem er: alvorlige infektioner, diabetes mellitus, arteriel hypertension, osteoporose, neurologiske lidelser, nyresvigt, dyslipæmier, øget kardiovaskulær risiko, cancer osv. Efter 5 år udvikler 18 % af leverreceptorerne nyresvigt, risikoen for at udvikle cancer er tre gange højere efter LT og 30 % af levertransplantatreceptorer tidligere inficeret med hepatitis C-virus (HCV) har skrumpelever 5 år efter LT, sandsynligvis pga. virkningen af ​​IS på viral kinetik. En ideel situation ville være, at levertransplantationsmodtagere modtager nok IS til at hæmme immunresponset mod allotransplantatet, samtidig med at man undgår en overdreven effekt på immunsystemets kapacitet til at genkende patogener, tumorceller og minimerer de negative virkninger eller endnu mere, på ubestemt tid. graft accept i fuldstændig fravær af IS, koncept, der i klinik kaldes operationel tolerance (OT). OT forekommer hos omkring 20% ​​af levermodtagere. Så selvom den potentielle fordel er vigtig, påvirker den kun en lille del af levermodtagerne. En anden, men relateret strategi er blevet evalueret i flere forsøg tidligere, og består i at skifte fra en IS baseret på calcineurinhæmmere (CNI) til en anden mindre intens baseret på mofetil mycophenolat (MMF), som er kendt for at have mindre bivirkninger , bevarer nyrefunktionen og påvirker ikke funktionen og proliferationen af ​​T-regulatoriske celler, som er involveret i udviklingen af ​​OT. I en nylig undersøgelse (i pressen) udførte efterforskerne en IS-tilbagetrækning til over hundrede levermodtagere, og efterforskerne fandt, at de, der var klassificeret som operationelt tolerante (40 %), hvor de med længere tid gik siden LT til IS-tilbagetrækningen, dem, der fik lavere doser af CNI, og dem, der fik MMF monoterapi. Forskerne var også i stand til at skelne mellem operationelt tolerante levermodtagere og dem, der udviklede en afvisning baseret på dets differentielle genekspression (evalueret af hele genom-mikroarray) lige før IS-tilbagetrækningen.

Undersøgelsens mål: at udføre IS-konvertering fra CNI til MMF-monoterapi og lede efter transkriptionelle biomarkører ved at bruge hele en genomekspressionsundersøgelse udført med mikroarrays ved baseline på levervæv og PBMC'er for at forsøge at finde et sæt differentielt udtrykte gener, der er i stand til at korrelere med en vellykket konvertering og således at generere et sæt transkriptionelle biomarkører, der potentielt er i stand til at forudsige resultatet af IS-konverteringen på en uafhængig kohorte af levermodtagere.

Metoder: Fyrre patienter vil blive rekrutteret blandt vores kohorte af levertransplanterede modtagere. Undersøgelsen varer 48 uger. Inklusionskriterier vil være a) levertransplantation for mere end 2 år siden, b) stabil graftfunktion, b) ingen historie med autoimmun leversygdom, c) fravær af afstødning inden for de sidste 12 måneder, d) Brug af calcineurinhæmmere (CNI) som monoterapi, e)fravær af afstødning ved baseline leverbiopsi, d) dalniveauer for tacrolimus > 3 ng/ml eller cyclosporin C2-niveauer > 30 ng/ml, e) underskrift af den informerede samtykkeerklæring. Efter screeningsproceduren vil mycophenolatmofetil blive startet (uge -4) med en dosis på 500 mg to gange dagligt i to uger og derefter (uge -2) øget til 1000 mg to gange dagligt, og CNI vil blive reduceret med 50 % af initial dosis. Efter to uger (uge 0) vil CNI blive helt afbrudt (fuldstændig IS-konvertering). Efterforskerne vil følge patienter op hver 4. uge op til 48 uger efter den fuldstændige IS-konvertering. Den samlede studieperiode vil vare 52 uger. Ved baseline vil mRNA fra leverprøver og mononukleære celler fra perifert blod blive isoleret. Dette mRNA vil blive brugt til at evaluere ekspression af hele genomet ved hjælp af Affimetrix-mikroarrays. Desuden vil frekvensen af ​​T-regulatoriske celler blive målt ved hjælp af perifere blodcellers immunfænotypning ved baseline og ved slutningen af ​​opfølgningen. Kliniske variabler vil blive evalueret for at bestemme udviklingen af ​​nyrefunktionen og andre kardiovaskulære risikofaktorer.

Forventede resultater: Undersøgerne forventer, at de fleste af modtagerne ved undersøgelsens afslutning vil have været i stand til at få et vellykket afslag, og en mindre gruppe (ca. 30%) vil ikke være i stand til at gøre det på grund af afvisning. Derefter vil baseline-mRNA-prøver blive brugt til at udføre hele genom-mikroarrays. Ved hjælp af bioinformatiske procedurer vil efterforskerne gøre et forsøg på at etablere en differentiel genekspression blandt dem med en vellykket konvertering og dem, der udvikler afvisning. Dette vil give efterforskerne mulighed for at bestemme det mindste sæt gener, der er i stand til at skelne mellem disse patienter. Genekspression vil også være korreleret med immunfænotypning af perifere blodceller og kliniske variabler.