Suche nach Transkriptionsbiomarkern in einem Konvertierungsprotokoll von Calcineurin-Inhibitoren zu Mycophenolatmofetil (TBCP)

Einleitung: Eine immunsuppressive Behandlung (IS) hat mehrere und häufige Nebenwirkungen; Dazu gehören: schwere Infektionen, Diabetes mellitus, arterielle Hypertonie, Osteoporose, neurologische Störungen, Nierenversagen, Dyslipidämien, erhöhtes Herz-Kreislauf-Risiko, Krebs usw. Nach 5 Jahren entwickeln 18 % der Leberrezeptoren ein Nierenversagen, das Krebsrisiko ist nach LT dreimal höher und 30 % der Lebertransplantatrezeptoren, die zuvor mit dem Hepatitis-C-Virus (HCV) infiziert waren, leiden 5 Jahre nach LT an einer Leberzirrhose, wahrscheinlich aufgrund von die Wirkung von IS auf die Viruskinetik. Eine ideale Situation wäre, dass Empfänger von Lebertransplantaten genügend IS erhalten, um die Immunantwort gegen das Allotransplantat zu hemmen, während gleichzeitig eine übermäßige Beeinträchtigung der Fähigkeit des Immunsystems, Krankheitserreger und Tumorzellen zu erkennen, vermieden wird und die nachteiligen oder sogar unbestimmten Auswirkungen minimiert werden Transplantatakzeptanz bei völliger Abwesenheit von IS, Konzept, das in der Klinik als Operationstoleranz (OT) bezeichnet wird. OT tritt bei etwa 20 % der Leberempfänger auf. Obwohl der potenzielle Nutzen wichtig ist, betrifft er nur einen kleinen Teil der Leberempfänger. Eine andere, aber verwandte Strategie wurde in der Vergangenheit in mehreren Studien evaluiert und besteht darin, von einem IS auf Basis von Calcineurin-Inhibitoren (CNI) zu einem anderen, weniger intensiven auf Basis von Mofetilmycophenolat (MMF) zu wechseln, das bekanntermaßen weniger Nebenwirkungen hat , erhalten die Nierenfunktion und beeinträchtigen nicht die Funktion und Proliferation von T-regulatorischen Zellen, die an der Entwicklung von OT beteiligt sind. In einer aktuellen Studie (im Druck) führten die Forscher einen IS-Entzug bei über hundert Leberempfängern durch und stellten fest, dass diejenigen, die als operativ tolerant eingestuft wurden (40 %), während diejenigen, bei denen seit dem LT- bis zum IS-Entzug eine längere Zeit vergangen war, diejenigen, die niedrigere CNI-Dosen erhielten, und diejenigen, die eine MMF-Monotherapie erhielten. Die Forscher konnten auch zwischen operativ toleranten Leberempfängern und solchen unterscheiden, die eine Abstoßung entwickelten, basierend auf der unterschiedlichen Genexpression (ausgewertet durch einen Gesamtgenom-Microarray) unmittelbar vor dem IS-Entzug.

Ziel der Studie: Durchführung einer IS-Umstellung von CNI auf MMF-Monotherapie und Suche nach transkriptionellen Biomarkern unter Verwendung einer gesamten Genomexpressionsstudie, die zu Studienbeginn mit Microarrays an Lebergewebe und PBMCs durchgeführt wurde, um zu versuchen, eine Reihe unterschiedlich exprimierter Gene zu finden, die mit einer erfolgreichen Umstellung korrelieren können Daher soll eine Reihe von Transkriptionsbiomarkern generiert werden, die potenziell in der Lage sind, das Ergebnis der IS-Umwandlung bei einer unabhängigen Kohorte von Leberempfängern vorherzusagen.

Methoden: Aus unserer Kohorte von Lebertransplantationsempfängern werden 40 Patienten rekrutiert. Die Studie wird 48 Wochen dauern. Einschlusskriterien sind a) Lebertransplantation vor mehr als 2 Jahren, b) stabile Transplantatfunktion, b) keine Vorgeschichte einer autoimmunen Lebererkrankung, c) keine Abstoßung in den letzten 12 Monaten, d) Verwendung von Calcineurin-Inhibitoren (CNI) als Monotherapie, e) Fehlen einer Abstoßung bei der Leberbiopsie zu Studienbeginn, d) Tacrolimus-Talspiegel > 3 ng/ml oder Cyclosporin-C2-Spiegel > 30 ng/ml, e) Unterschrift der Einverständniserklärung. Nach dem Screening-Verfahren wird mit Mycophenolatmofetil begonnen (Woche -4) mit einer Dosis von 500 mg zweimal täglich für zwei Wochen und dann (Woche -2) auf 1000 mg zweimal täglich erhöht und der CNI wird um 50 % reduziert Anfangsdosis. Nach zwei Wochen (Woche 0) wird CNI vollständig eingestellt (vollständige IS-Umstellung). Die Forscher werden die Patienten alle 4 Wochen bis zu 48 Wochen nach der vollständigen IS-Umstellung nachuntersuchen. Die gesamte Studienzeit beträgt 52 Wochen. Zu Studienbeginn werden mRNA aus Leberproben und mononukleären Zellen des peripheren Blutes isoliert. Diese mRNA wird verwendet, um die Expression des gesamten Genoms mithilfe von Affimetrix-Microarrays zu bewerten. Außerdem wird die Häufigkeit regulatorischer T-Zellen mithilfe der Immunphänotypisierung peripherer Blutzellen zu Studienbeginn und am Ende der Nachuntersuchung gemessen. Klinische Variablen werden ausgewertet, um die Entwicklung der Nierenfunktion und anderer kardiovaskulärer Risikofaktoren zu bestimmen.

Erwartete Ergebnisse: Die Forscher gehen davon aus, dass am Ende der Studie die meisten Empfänger eine erfolgreiche Ablehnung haben und eine kleinere Gruppe (ca. 30 %) aufgrund der Ablehnung nicht dazu in der Lage sein wird. Anschließend werden Basis-mRNA-Proben verwendet, um Mikroarrays für das gesamte Genom durchzuführen. Mithilfe bioinformatischer Verfahren werden die Forscher versuchen, eine unterschiedliche Genexpression zwischen denen mit einer erfolgreichen Konversion und denen, die eine Abstoßung entwickeln, zu etablieren. Dies wird es den Forschern ermöglichen, den kleinsten Satz von Genen zu bestimmen, der zwischen diesen Patienten unterscheiden kann. Die Genexpression wird auch mit der Immunphänotypisierung peripherer Blutzellen und klinischen Variablen korreliert.