Búsqueda de biomarcadores transcripcionales en un protocolo de conversión de inhibidores de calcineurina a micofenolato mofetilo (TBCP)

Introducción: El tratamiento inmunosupresor (EI) tiene varios y frecuentes efectos adversos; entre ellos se encuentran: infecciones graves, diabetes mellitus, hipertensión arterial, osteoporosis, trastornos neurológicos, insuficiencia renal, dislipemias, aumento del riesgo cardiovascular, cáncer, etc. A los 5 años, el 18% de los receptores hepáticos desarrollan insuficiencia renal, el riesgo de desarrollar cáncer es tres veces mayor tras el TH y el 30% de los receptores del injerto hepático previamente infectados por el virus de la hepatitis C (VHC) tienen cirrosis a los 5 años del TH, probablemente por el efecto de IS en la cinética viral. Una situación ideal sería que los receptores de trasplante hepático recibieran suficientes SI para inhibir la respuesta inmune contra el aloinjerto, evitando un efecto excesivo sobre la capacidad del sistema inmune para reconocer patógenos, células tumorales y minimizando los efectos adversos o más aún, la indefinida aceptación del injerto en ausencia total de IS, concepto que en clínica se denomina tolerancia operativa (TO). OT ocurre en alrededor del 20% de los receptores de hígado. Entonces, aunque el beneficio potencial es importante, afecta solo a una pequeña fracción de los receptores de hígado. Una estrategia diferente pero relacionada ha sido evaluada en varios ensayos en el pasado, y consiste en cambiar de un IS basado en inhibidores de la calcineurina (CNI) a otro menos intenso basado en micofenolato de mofetilo (MMF), que se sabe que tiene menos efectos adversos. , preservar la función renal y no afectar la función y proliferación de las células T reguladoras, que están involucradas en el desarrollo de la TO. En un estudio reciente (en prensa), los investigadores realizaron una retirada de IS a más de cien receptores de hígado y encontraron que aquellos que fueron clasificados como tolerantes operativamente (40 %) eran los que habían transcurrido más tiempo desde el LT hasta la retirada de IS, los que recibieron dosis más bajas de CNI y los que recibieron monoterapia con MMF. Los investigadores también pudieron discriminar entre receptores de hígado tolerantes operativamente y aquellos que desarrollaron un rechazo basado en su expresión génica diferencial (evaluada por microarray de genoma completo) justo antes de la retirada del IS.

Objetivo del estudio: realizar la conversión IS de monoterapia con CNI a MMF y buscar biomarcadores transcripcionales empleando un estudio de expresión del genoma completo realizado con micromatrices al inicio del estudio en tejido hepático y PBMC para tratar de encontrar un conjunto de genes expresados ​​diferencialmente capaces de correlacionarse con una conversión exitosa y por lo tanto, para generar un conjunto de biomarcadores transcripcionales potencialmente capaces de predecir el resultado de la conversión de IS en una cohorte independiente de receptores hepáticos.

Métodos: Cuarenta pacientes serán reclutados entre nuestra cohorte de receptores de trasplante hepático. El estudio tendrá una duración de 48 semanas. Los criterios de inclusión serán a) trasplante hepático hace más de 2 años, b) función estable del injerto, b) ausencia de antecedentes de enfermedad hepática autoinmune, c) ausencia de rechazo en los últimos 12 meses, d) uso de inhibidores de la calcineurina (ICN) como monoterapia, e) ausencia de rechazo en biopsia hepática basal, d) niveles valle de tacrolimus > 3 ng/ml o niveles de ciclosporina C2 > 30 ng/ml, e) firma del consentimiento informado. Después del procedimiento de selección, se iniciará el micofenolato de mofetilo (semana -4) a una dosis de 500 mg dos veces al día durante dos semanas y luego (semana -2) se aumentará a 1000 mg dos veces al día y el CNI se reducirá al 50% de la dosis inicial. Después de dos semanas (semana 0), CNI se suspenderá por completo (conversión IS completa). Los investigadores realizarán un seguimiento de los pacientes cada 4 semanas hasta 48 semanas después de la conversión completa del IS. El período de estudio completo tendrá una duración de 52 semanas. En la línea de base, se aislará el ARNm de muestras de hígado y células mononucleares de sangre periférica. Este ARNm se utilizará para evaluar la expresión del genoma completo utilizando microarreglos de Affimetrix. Además, la frecuencia de células T reguladoras se medirá mediante inmunofenotipado de células de sangre periférica al inicio y al final del seguimiento. Se evaluarán variables clínicas para determinar la evolución de la función renal y otros factores de riesgo cardiovascular.

Resultados esperados: Los investigadores esperan que al final del estudio la mayoría de los receptores habrán podido tener un rechazo exitoso y un grupo menor (alrededor del 30%) no podrá hacerlo por rechazo. Luego, las muestras de ARNm de referencia se utilizarán para realizar microarrays de genoma completo. Utilizando procedimientos bioinformáticos, los investigadores intentarán establecer una expresión génica diferencial entre aquellos con una conversión exitosa y aquellos que desarrollan rechazo. Esto permitirá a los investigadores determinar el conjunto más pequeño de genes capaces de discriminar entre esos pacientes. La expresión génica también se correlacionará con el inmunofenotipo de células sanguíneas periféricas y las variables clínicas.