Zoektocht naar transcriptionele biomarkers in een conversieprotocol van calcineurineremmers naar mycofenolaatmofetil (TBCP)

Inleiding: Immunosuppressieve behandeling (IS) heeft verschillende en frequente bijwerkingen; onder hen zijn: ernstige infecties, diabetes mellitus, arteriële hypertensie, osteoporose, neurologische aandoeningen, nierfalen, dyslipemie, verhoogd cardiovasculair risico, kanker, enz. Na 5 jaar ontwikkelt 18% van de leverreceptoren nierfalen, het risico op het ontwikkelen van kanker is drie keer hoger na LT en 30% van de levertransplantaatreceptoren die eerder zijn geïnfecteerd met het hepatitis C-virus (HCV) krijgt 5 jaar na LT cirrose, waarschijnlijk als gevolg van het effect van IS op virale kinetiek. Een ideale situatie zou zijn dat ontvangers van een levertransplantaat voldoende IS krijgen om de immuunrespons tegen het allograft te remmen, terwijl een overmatig effect op het vermogen van het immuunsysteem om ziekteverwekkers en tumorcellen te herkennen wordt vermeden en de nadelige effecten worden geminimaliseerd, of zelfs meer, de onbepaalde tijd. transplantaatacceptatie in de volledige afwezigheid van IS, concept dat in de kliniek operationele tolerantie (OT) wordt genoemd. OT komt voor bij ongeveer 20% van de leverontvangers. Dus hoewel het potentiële voordeel belangrijk is, treft het slechts een klein deel van de leverontvangers. Een andere maar verwante strategie is in het verleden in verschillende onderzoeken geëvalueerd en bestaat erin om over te schakelen van een IS op basis van calcineurineremmers (CNI) naar een minder intense op basis van mofetilmycofenolaat (MMF), waarvan bekend is dat het minder nadelige effecten heeft. , behouden de nierfunctie en hebben geen invloed op de functie en proliferatie van regulerende T-cellen, die betrokken zijn bij de ontwikkeling van OT. In een recente studie (in druk) voerden de onderzoekers een IS-onttrekking uit bij meer dan honderd leverontvangers en de onderzoekers ontdekten dat degenen die werden geclassificeerd als operationeel tolerant (40%) waar degenen met een langere tijd verstreken sinds LT naar IS-onttrekking, degenen die lagere doses CNI kregen en degenen die MMF-monotherapie kregen. De onderzoekers waren ook in staat om onderscheid te maken tussen operationeel tolerante leverontvangers en degenen die een afstoting ontwikkelden op basis van de differentiële genexpressie (geëvalueerd door microarray van het hele genoom) vlak voor de IS-intrekking.

Doel van de studie: IS-conversie uitvoeren van CNI naar MMF-monotherapie en zoeken naar transcriptionele biomarkers met behulp van een volledige genoomexpressiestudie uitgevoerd met microarrays bij baseline op leverweefsel en PBMC's om te proberen een reeks differentieel tot expressie gebrachte genen te vinden die kunnen correleren met een succesvolle conversie en dus om een ​​set transcriptionele biomarkers te genereren die mogelijk het resultaat van de IS-conversie kunnen voorspellen op een onafhankelijk cohort van leverontvangers.

Methoden: Veertig patiënten zullen worden gerekruteerd uit ons cohort van ontvangers van levertransplantaties. Het onderzoek duurt 48 weken. Inclusiecriteria zijn a) levertransplantatie meer dan 2 jaar geleden, b) stabiele transplantaatfunctie, b) geen voorgeschiedenis van auto-immuunleverziekte, c) afwezigheid van afstoting in de laatste 12 maanden, d) Gebruik van calcineurineremmers (CNI) als monotherapie, e) afwezigheid van afstoting bij baseline leverbiopsie, d) tacrolimus dalspiegels > 3 ng/ml of ciclosporine C2 spiegels > 30 ng/ml, e) ondertekening van het toestemmingsformulier. Na de screeningsprocedure wordt mycofenolaatmofetil gestart (week -4) met een dosis van 500 mg tweemaal daags gedurende twee weken en vervolgens (week -2) verhoogd tot 1000 mg tweemaal daags en CNI wordt verlaagd met 50% van de eerste dosis. Na twee weken (week 0) wordt CNI volledig stopgezet (volledige IS-conversie). De onderzoekers zullen patiënten elke 4 weken opvolgen tot 48 weken na de volledige IS-conversie. De volledige studieperiode duurt 52 weken. Bij aanvang zullen mRNA van levermonsters en perifere mononucleaire bloedcellen worden geïsoleerd. Dit mRNA zal worden gebruikt om de volledige genoomexpressie te evalueren met behulp van Affimetrix microarrays. Bovendien zal de frequentie van T-regulerende cellen worden gemeten met behulp van immunofenotypering van perifere bloedcellen bij baseline en aan het einde van de follow-up. Klinische variabelen zullen worden geëvalueerd om de evolutie van de nierfunctie en andere cardiovasculaire risicofactoren te bepalen.

Verwachte resultaten: De onderzoekers verwachten dat aan het einde van het onderzoek de meeste ontvangers een succesvolle afwijzing zullen hebben gehad en dat een kleine groep (ongeveer 30%) dit niet zal kunnen vanwege afwijzing. Vervolgens zullen basislijn-mRNA-monsters worden gebruikt om microarrays van het hele genoom uit te voeren. Met behulp van bioinformatica-procedures zullen de onderzoekers een poging doen om een ​​differentiële genexpressie vast te stellen tussen degenen met een succesvolle conversie en degenen die afstoting ontwikkelen. Hierdoor kunnen de onderzoekers de kleinste set genen bepalen die onderscheid kan maken tussen die patiënten. Genexpressie zal ook worden gecorreleerd met immunofenotypering van perifere bloedcellen en klinische variabelen.