Recherche de biomarqueurs transcriptionnels dans un protocole de conversion des inhibiteurs de la calcineurine au mycophénolate mofétil (TBCP)

Introduction : Le traitement immunosuppresseur (SI) a des effets indésirables nombreux et fréquents ; parmi eux : les infections graves, le diabète sucré, l'hypertension artérielle, l'ostéoporose, les troubles neurologiques, l'insuffisance rénale, les dyslipémies, l'augmentation du risque cardiovasculaire, le cancer, etc. Après 5 ans, 18 % des récepteurs hépatiques développent une insuffisance rénale, le risque de développer un cancer est trois fois plus élevé après TH et 30 % des récepteurs de greffons hépatiques précédemment infectés par le virus de l'hépatite C (VHC) ont une cirrhose 5 ans après TH, probablement à cause de l'effet de l'IS sur la cinétique virale. Une situation idéale serait que les greffés hépatiques reçoivent suffisamment de SI pour inhiber la réponse immunitaire contre l'allogreffe, tout en évitant un effet excessif sur la capacité du système immunitaire à reconnaître les pathogènes, les cellules tumorales et en minimisant les effets indésirables ou plus encore, l'effet indéfini l'acceptation du greffon en l'absence totale d'IS, concept qu'en clinique on appelle tolérance opérationnelle (OT). L'OT survient chez environ 20 % des receveurs de foie. Ainsi, bien que le bénéfice potentiel soit important, il n'affecte qu'une petite fraction des receveurs de foie. Une stratégie différente mais connexe a été évaluée dans plusieurs essais par le passé, et consiste à passer d'un SI à base d'inhibiteurs de la calcineurine (CNI) à un autre moins intense à base de mycophénolate de mofétil (MMF), dont on sait qu'il a moins d'effets indésirables. , préservent la fonction rénale et n'affectent pas la fonction et la prolifération des cellules T régulatrices, qui sont impliquées dans le développement de l'OT. Dans une étude récente (sous presse), les enquêteurs ont effectué un retrait IS à plus d'une centaine de receveurs de foie et les enquêteurs ont constaté que ceux qui étaient classés comme tolérants sur le plan opérationnel (40 %) où ceux avec un temps plus long écoulé depuis le retrait LT à IS, ceux qui ont reçu des doses plus faibles de CNI et ceux qui ont reçu une monothérapie au MMF. Les enquêteurs ont également pu faire la distinction entre les receveurs hépatiques tolérants sur le plan opérationnel et ceux qui ont développé un rejet sur la base de son expression génique différentielle (évaluée par puce à génome entier) juste avant le retrait de l'IS.

Objectif de l'étude : effectuer la conversion IS de la monothérapie CNI en MMF et rechercher des biomarqueurs transcriptionnels en utilisant une étude d'expression du génome réalisée avec des puces à ADN au départ sur le tissu hépatique et les PBMC pour essayer de trouver un ensemble de gènes exprimés de manière différentielle capables de corréler avec une conversion réussie et ainsi, pour générer un ensemble de biomarqueurs transcriptionnels potentiellement capables de prédire le résultat de la conversion IS sur une cohorte indépendante de receveurs hépatiques.

Méthodes : Quarante patients seront recrutés parmi notre cohorte de greffés du foie. L'étude durera 48 semaines. Les critères d'inclusion seront a) une transplantation hépatique datant de plus de 2 ans, b) une fonction stable du greffon, b) aucun antécédent de maladie hépatique auto-immune, c) l'absence de rejet au cours des 12 derniers mois, d) l'utilisation d'inhibiteurs de la calcineurine (ICN) comme monothérapie, e) absence de rejet lors de la biopsie hépatique initiale, d) taux résiduels de tacrolimus > 3 ng/ml ou taux de cyclosporine C2 > 30 ng/ml, e) signature du formulaire de consentement éclairé. Après la procédure de dépistage, le mycophénolate mofétil sera démarré (semaine -4) à une dose de 500 mg deux fois par jour pendant deux semaines, puis (semaine -2) augmenté à 1000 mg deux fois par jour et le CNI sera réduit à 50 % de la dose initiale. Après deux semaines (semaine 0), le CNI sera complètement interrompu (conversion complète du SI). Les enquêteurs suivront les patients toutes les 4 semaines jusqu'à 48 semaines après la conversion complète de l'IS. La période d'étude complète durera 52 semaines. Au départ, l'ARNm des échantillons de foie et des cellules mononucléaires du sang périphérique sera isolé. Cet ARNm sera utilisé pour évaluer l'expression du génome entier à l'aide de puces Affimetrix. En outre, la fréquence des lymphocytes T régulateurs sera mesurée à l'aide de l'immunophénotypage des cellules sanguines périphériques au départ et à la fin du suivi. Des variables cliniques seront évaluées pour déterminer l'évolution de la fonction rénale et d'autres facteurs de risque cardiovasculaire.

Résultats attendus : les enquêteurs s'attendent à ce qu'à la fin de l'étude, la plupart des bénéficiaires aient pu avoir un rejet réussi et qu'un groupe mineur (environ 30 %) ne puisse pas le faire en raison d'un rejet. Ensuite, des échantillons d'ARNm de base seront utilisés pour effectuer des puces à ADN du génome entier. À l'aide de procédures bioinformatiques, les chercheurs tenteront d'établir une expression génique différentielle entre ceux dont la conversion est réussie et ceux qui développent un rejet. Cela permettra aux chercheurs de déterminer le plus petit ensemble de gènes capables de faire la distinction entre ces patients. L'expression des gènes sera également corrélée avec l'immunophénotypage des cellules sanguines périphériques et les variables cliniques.