Hodnocení klinického výkonu Fjodorova testu na malárii moči (UMT)

Primární cíl:

Vyhodnotit klinický výkon (senzitivita a specificita) Fjodor UMT pro detekci malárie Plasmodium falciparum u febrilních pacientů.

Sekundární cíle:

• Monitorovat dobu do vymizení příbuzného parazitního proteinu z moči pacienta
• Posoudit potenciální účinky proteinurie, zánětu a léků proti horečce na výkon Fyodor UMT
• Stanovit výkon UMT při použití u asymptomatických (afebrilních) jedinců, kteří mohou být přenašeči parazita.

Studovat design:

• Randomizovaná, multicentrická klinická studie
• Účastníci se budou rekrutovat ze středisek primární zdravotní péče ve čtyřech místních vládních oblastech ve státě Lagos a dvou schistosomických komunitách v Abeokuta-North Local Government Area státu Ogun, obě v jihozápadní Nigérii.
• 1500 účastníků (včetně dětí ve věku 2–14 let a dospělých obou pohlaví) s horečkou (axilární teplota ≥37,5 °C) nebo s horečkou v nedávné minulosti za posledních 48 hodin (skupina 1), 250 zjevně „zdravých“ jedinců (kontrola, Skupina 2) a 50 pacientů se Schistosoma hematobium a revmatoidní artritidou (Skupina 3) bude přijato
• Binax NOW RDT-pozitivní pacienti budou léčeni pro infekci malárií Artesunate-Amodiaquinem nebo Dihydroartemisinin-Piperaquin sulfátem v souladu s národní léčebnou politikou
• Pro posouzení, zda cílový antigen UMT po léčbě přetrvává v moči, bude náhodně vybráno 100 léčených účastníků skupiny 1 s pozitivními výsledky Binax NOW i UMT a sledováni ve dnech 3, 7, 14, 21 a 28 s použitím úpravy protokol WHO (2009) pro hodnocení lékové terapeutické účinnosti (http://whqlibdoc.who.int/publications/2009/9789241597531_eng.pdf)
• K testování klinické specifičnosti UMT bude aktivní nábor zahrnovat 250 jedinců obou pohlaví s asymptomatickou infekcí malárie P. falciparum (zřejmě „zdravá, normální kontrolní skupina 2) a 50 s infekcí Schistosoma haematobium a/nebo revmatoidní artritidou (skupina 3 ) - dva nesouvisející zdravotní stavy, o kterých je známo, že vyvolávají u pacientů proteinurii (Lehman a kol., 1975; Adebajo a kol., 1994; Tighe & Carson, 1997)
• Účastníci se zvýšeným výsledkem testu revmatoidního faktoru (RF+) (tj. RF >60 u/ml nebo >1:80 litr) jsou spojeny se závažným revmatoidním onemocněním. Infekce Schistosoma haematobium je potvrzena mikroskopicky s identifikací vajíčka nebo sérologicky
• Tato 6měsíční studie bude realizována od července do prosince 2013, během období dešťů a sucha, kdy je přenos malárie vysoký a nízký.

Studijní oblast:

Studie bude koordinována Centrem excelence ANDI pro diagnostiku malárie – mezinárodním školicím střediskem pro mikroskopii malárie a testováním kvality RDT a sídlem banky vzorků malárie WHO/TDR/FIND na College of Medicine, University of Lagos. Bude probíhat v sedmi primárních zdravotnických zařízeních ve čtyřech místních vládních oblastech ve státě Lagos. Stát Lagos se nachází v jihozápadní části Nigérie a skládá se z hustě obydlených městských oblastí a rozlehlých předměstských oblastí. K přenosu malárie dochází po celý rok s obdobími intenzivního sezónního přenosu malárie během období dešťů. Teploty jsou obvykle vysoké a vodní tůně vytvořené během období dešťů poskytují místa rozmnožování pro přenašeče malárie, což vede k propuknutí epidemie s vysokou mírou nemocnosti. Stát je endemický pro malárii, s nejvyšším přenosem mezi dubnem a zářím.

Odběr vzorků na schistosomózu bude proveden v komunitách schistosomóz Imalodo a Abuletutu v místní vládní oblasti Abeokuta-North státu Ogun, také v jihozápadní Nigérii.

Popis designu studie:

Specifickými cíli studie je stanovení klinické citlivosti a specificity UMT a stanovení výkonnostních charakteristik testu u zdravých asymptomatických dobrovolníků ve srovnání s mikroskopií krevního nátěru a testem Binax NOW (Predicate device). Zapsáno bude celkem 1 800 účastníků, včetně dětí a dospělých obou pohlaví s příznaky horečky podobnými malárii, pacienti s nesouvisejícími zdravotními stavy (infekce Schistosoma hematobium a revmatoidní artritida, stejně jako zdánlivě „zdraví“ (asymptomatičtí) kontrolní jedinci. Febrilní pacienti se symptomy podobnými malárii budou zařazováni jak v období dešťů, tak i v období sucha, přičemž terénní vzorky budou získány během období vysokého i nízkého přenosu malárie.

Shodné vzorky moči a krve z otisků prstů budou odebrány a testovány pomocí UMT a Binax NOW a mikroskopie, v daném pořadí. Testování moči a krve pomocí UMT a Binax NOW bude prováděno na místě zaslepeným způsobem. Každý vzorek moči bude také testován pomocí měrky na analýzu moči a jsou zaznamenány jeho fyzikálně-chemické vlastnosti (pH, bílkoviny, cukr, specifická hmotnost atd.). Z krevního vzorku budou připravena dvě tenká a silná sklíčka krevního nátěru (připravená na stejném podložním sklíčku) na účastníka. Jeden snímek bude nezávisle přečten dvěma mikroskopy v ANDI Centre of Excellence for Malaria Diagnosis, mezinárodně uznávaném školicím a referenčním centru pro mikroskopii malárie. Druhé sklíčko bude archivováno pro účely budoucího zajištění kvality a poté odesláno do Fjodoru spolu se zbývajícími vzorky moči. Podle konvence bude mikroskopické čtení krevních nátěrů používáno jako zlatý standard pro diagnostiku malárie. Pacienti s pozitivním testem na Binax NOW budou léčeni Artesunate-Amodiaquinem nebo Dihydroartemisinin-Piperaquin sulfátem. Na základě samotných výsledků UMT nebude učiněno žádné klinické rozhodnutí. Nicméně standardní rutinní diagnostické testy na malárii budou použity k léčbě pacienta v zařízení, kde se nacházejí. Celková shoda testů UMT a Binax NOW s mikroskopickou analýzou bude použita ke stanovení citlivosti, specificity a podstatné ekvivalence/neinferiority testu Binax NOW.

Postup testu UMT:

• Bezprostředně před testováním přidejte 200 µl čerstvě odebrané moči do zkumavky o objemu 1,5 ml nebo 2 ml
• Ponořte proužek UMT do vzorku moči a nechte vzorek nasát a nasytit proužek po dobu 10 minut
• Vyjměte proužek ze vzorku moči a umístěte jej na fóliový obal
• Reakce se nechá probíhat 20 minut
• Výsledek zaznamenejte jako pozitivní (POS; objeví se testovací i kontrolní linie), negativní (NEG; zobrazí se pouze kontrolní linie) nebo neplatný (INV; kontrolní linie se nezobrazí).

Zajištění kvality studia:

Tato studie bude provedena v souladu se správnou klinickou praxí.

• Školení na místě: Všichni vyšetřovatelé, technici a výzkumní pracovníci pracující na této studii UMT budou vyškoleni a certifikováni v provádění studií zahrnujících lidské subjekty podle pokynů ICH.
• Návštěvy na místě: Monitorovací návštěvy na místě budou prováděny podle pokynů uvedených v protokolu studie
• Zaslepení výsledků: Budou organizovány samostatné týmy, které budou provádět registraci pacientů, laboratorní (Binax NOW) testování, diagnostickou mikroskopii, zadávání dat a analýzu dat.
• Kontrolní UMT testování: Známé pozitivní a negativní kontrolní materiály budou používány k ověření výkonnosti UMT na denní bázi
• Sběr dat: Výzkumní pracovníci vyplní všechny formuláře pro sběr dat při každé návštěvě, i když účastník neprovedl všechny testy; zmeškané následné návštěvy budou podle potřeby zdokumentovány na formulářích kazuistiky
• Koordinátor studie bude řídit pracovníky terénního výzkumu a poskytovat administrativní podporu na studijních místech na každodenní bázi
• Koordinátor pro zajištění kvality studie má kvalifikaci na základě školení a zkušeností a bude sledovat průběh studie, aby zajistil shodu se schváleným protokolem studie.

Tato klinická studie bude provedena v souladu s protokolem studie schváleným Etickou komisí pro výzkumné granty a experimenty College of Medicine University of Lagos, Nigérie, pokyny nigerijského výboru pro etický výzkum v oblasti zdraví, harmonizovanou tripartitní směrnicí ICH pro správnou klinickou praxi a 45CFR46 a 21CFR50, příručka WHO-FIND-CDC Malaria RDT Product Testing Methods Manual (verze 3), ustanovení o zkráceném nebo nevýznamném riziku podle nařízení o výjimkách pro vyšetřovací zařízení (IDE) (21 CFR část 812.2(b)), Předpisy o ochraně lidských subjektů, včetně Hlavy B Informovaného souhlasu lidských subjektů (21 CFR část 50), nařízení Institucionální revizní rady (21 CFR část 56); a nařízení o finančním zveřejnění podle nařízení pro klinické vyšetřovatele (21 CFR část 54).