Valutazione delle prestazioni cliniche del test Fyodor Urine Malaria (UMT)

Obiettivo primario:

Valutare le prestazioni cliniche (sensibilità e specificità) di Fyodor UMT per rilevare la malaria da Plasmodium falciparum in pazienti febbrili.

Obiettivi secondari:

• Per monitorare il tempo di eliminazione della proteina parassita affine dall'urina del paziente
• Per valutare i potenziali effetti di proteinuria, infiammazione e farmaci anti-febbre sulle prestazioni di Fyodor UMT
• Per determinare le prestazioni dell'UMT quando utilizzato per individui asintomatici (afebbrili), che possono essere portatori del parassita.

Disegno dello studio:

• Studio clinico multicentrico randomizzato
• I partecipanti saranno reclutati dai centri sanitari primari in quattro aree del governo locale nello stato di Lagos e due comunità di schistosomiasi nell'area del governo locale di Abeokuta-Nord dello stato di Ogun, entrambe nel sud-ovest della Nigeria
• 1500 partecipanti (comprendenti bambini di età compresa tra 2 e 14 anni e adulti di entrambi i sessi) con febbre (temperatura ascellare ≥37,5°C) o storia recente di febbre nelle ultime 48 ore (Gruppo 1), 250 individui apparentemente "sani" (Controllo, Gruppo 2) e 50 pazienti con Schistosoma hematobium e artrite reumatoide (Gruppo 3) saranno reclutati
• I pazienti con Binax NOW RDT-positivi saranno trattati per l'infezione da malaria con artesunato-amodiachina o diidroartemisinina-piperachina solfato, seguendo la politica di trattamento nazionale
• Per valutare se l'antigene target UMT persiste nelle urine dopo il trattamento, 100 partecipanti trattati del Gruppo 1 con risultati positivi sia a Binax NOW che a UMT saranno selezionati in modo casuale e seguiti nei giorni 3, 7, 14, 21 e 28, utilizzando un adattamento di il protocollo dell'OMS (2009) per le valutazioni dell'efficacia terapeutica dei farmaci (http://whqlibdoc.who.int/publications/2009/9789241597531_eng.pdf)
• Per testare la specificità clinica dell'UMT, il reclutamento attivo includerà 250 individui di entrambi i sessi con infezione da malaria da P. falciparum asintomatica (apparentemente "sano, normale gruppo di controllo 2) e 50 con infezione da Schistosoma haematobium e/o artrite reumatoide (Gruppo 3 ) - due condizioni mediche non correlate note per provocare proteinuria nei pazienti (Lehman et al., 1975; Adebajo et al., 1994; Tighe & Carson, 1997)
• Partecipanti con risultato del test del fattore reumatoide (RF+) elevato (ad es. RF >60 u/mL o >1:80 litro) sono associati a grave malattia reumatoide. L'infezione da Schistosoma haematobium è confermata dall'esame microscopico con identificazione degli ovuli o dalla sierologia
• Questo studio di 6 mesi sarà implementato da luglio a dicembre 2013, sia durante la stagione delle piogge che durante la stagione secca, quando la trasmissione della malaria è rispettivamente alta e bassa.

Area studio:

Lo studio sarà coordinato dal Centro di eccellenza ANDI per la diagnosi della malaria - un centro internazionale di formazione sulla microscopia della malaria e test di garanzia della qualità RDT, e un sito della banca dei campioni di malaria dell'OMS / TDR / FIND presso il College of Medicine, l'Università di Lagos. Sarà condotto in sette strutture sanitarie primarie in quattro aree del governo locale nello stato di Lagos. Lo stato di Lagos è situato nella parte sud-occidentale della Nigeria ed è costituito da aree urbane densamente popolate e vaste aree suburbane. La trasmissione della malaria avviene durante tutto l'anno con periodi di intensa trasmissione stagionale della malaria durante la stagione delle piogge. Le temperature sono generalmente elevate e le pozze d'acqua create durante la stagione delle piogge forniscono siti di riproduzione per i vettori della malaria, portando a focolai epidemici con alti tassi di morbilità. Lo stato è endemico per la malaria, con un picco di trasmissione tra aprile e settembre.

Il campionamento per la schistosomiasi sarà effettuato nelle comunità di schistosomiasi di Imalodo e Abuletutu nell'Abeokuta-North Local Government Area dello stato di Ogun, anche nel sud-ovest della Nigeria.

Descrizione del disegno dello studio:

Gli obiettivi specifici dello studio sono determinare la sensibilità clinica e la specificità dell'UMT e stabilire le caratteristiche delle prestazioni del test in volontari sani asintomatici, rispetto alla microscopia di striscio di sangue e al test Binax NOW (dispositivo predicato). Saranno arruolati un totale di 1.800 partecipanti, comprendenti bambini e adulti di entrambi i sessi che presentano sintomi di febbre simile alla malaria, pazienti con condizioni mediche non correlate (infezione da Schistosoma hematobium e artrite reumatoide, nonché individui di controllo apparentemente "sani" (asintomatici). Pazienti febbrili con sintomi simili alla malaria saranno arruolati sia durante la stagione delle piogge che durante la stagione secca, fornendo campioni di campo durante i periodi di alta e bassa trasmissione della malaria.

I campioni di urina e di sangue prelevati dal polpastrello corrispondenti saranno raccolti e testati utilizzando rispettivamente l'UMT e Binax NOW e la microscopia. Gli esami delle urine e del sangue con UMT e Binax NOW, rispettivamente, saranno eseguiti in loco in cieco. Ogni campione di urina verrà inoltre testato utilizzando un dipstick per analisi delle urine e le sue caratteristiche fisico-chimiche (pH, proteine, zucchero, peso specifico, ecc.) verranno registrate. Dal campione di sangue verranno preparati due vetrini di striscio di sangue sottili e spessi (preparati sullo stesso vetrino) per partecipante. Un vetrino verrà letto in modo indipendente da due microscopisti presso il Centro di eccellenza ANDI per la diagnosi della malaria, un centro di formazione e riferimento per la microscopia della malaria di fama internazionale. Il secondo vetrino verrà archiviato per futuri scopi di garanzia della qualità e successivamente spedito a Fyodor insieme ai restanti campioni di urina. Per convenzione, la lettura microscopica degli strisci di sangue sarà utilizzata come gold standard per la diagnosi della malaria. I pazienti risultati positivi con Binax NOW saranno trattati con artesunato-amodiachina o diidroartemisinina-piperachina solfato. Nessuna decisione clinica sarà presa sulla base dei soli risultati UMT. Tuttavia, per la gestione del paziente nella struttura in cui si presenta verranno utilizzati i test diagnostici standard di routine per la malaria. L'accordo generale dell'UMT e di Binax NOW sull'analisi microscopica verrà utilizzato per stabilire la sensibilità, la specificità e l'equivalenza/non inferiorità sostanziale dell'UMT rispetto al test Binax NOW.

Procedura di prova UMT:

• Aggiungere 200 µl di urina appena raccolta in una provetta da 1,5 ml o 2 ml immediatamente prima del test
• Immergere la striscia UMT nel campione di urina e consentire al campione di assorbire e saturare la striscia per 10 minuti
• Rimuovere la striscia dal campione di urina e posizionarla sulla sua confezione di alluminio
• Lasciare che la reazione proceda per 20 minuti
• Registrare il risultato come positivo (POS; compaiono sia la linea del test che quella di controllo), negativo (NEG; appare solo la linea di controllo) o non valido (INV; la linea di controllo non appare).

Garanzia di qualità dello studio:

Questo studio sarà condotto secondo le buone pratiche cliniche.

• Formazione in loco: tutti i ricercatori, i tecnici e il personale di ricerca che lavora a questo studio UMT saranno formati e certificati nella conduzione di studi che coinvolgono soggetti umani secondo le linee guida ICH
• Visite in sede: le visite di monitoraggio in sede saranno condotte secondo le linee guida delineate nel protocollo di studio
• Blinding of Results: saranno organizzati team separati per condurre l'arruolamento dei pazienti, i test di laboratorio (Binax NOW), la microscopia diagnostica, l'inserimento dei dati e l'analisi dei dati
• Test UMT di controllo: verranno utilizzati materiali di controllo positivi e negativi noti per verificare le prestazioni UMT su base giornaliera
• Raccolta dati: il personale di ricerca compilerà tutti i moduli di raccolta dati ad ogni visita, anche se un partecipante non ha completato tutti i test; le visite di follow-up mancate saranno documentate, se del caso, sui moduli di segnalazione del caso
• Il coordinatore dello studio gestirà il personale di ricerca sul campo e fornirà supporto amministrativo presso i siti di studio su base giornaliera
• Il coordinatore per l'assicurazione della qualità dello studio è qualificato in base alla formazione e all'esperienza e monitorerà lo svolgimento della sperimentazione per garantire il rispetto del protocollo di studio approvato.

Questo studio clinico sarà condotto in conformità con il protocollo di studio approvato dal Comitato etico per le sovvenzioni di ricerca e la sperimentazione del College of Medicine University of Lagos, Nigeria, le linee guida del Comitato etico per la ricerca sanitaria nigeriana, la linea guida tripartita armonizzata ICH per la buona pratica clinica e 45CFR46 e 21CFR50, il Manuale dei metodi di test sui prodotti RDT Malaria dell'OMS-FIND-CDC (versione 3), la disposizione sui rischi abbreviata o non significativa dei regolamenti Investigational Device Exemptions (IDE) (21 CFR parte 812.2(b)), il Norme sulla protezione dei soggetti umani, incluso il capitolo B Consenso informato dei soggetti umani (CFR 21 parte 50), Regolamento del comitato di revisione istituzionale (CFR 21 parte 56); e il regolamento sulla divulgazione finanziaria da parte degli investigatori clinici (21 CFR Part 54).