Klinische prestatie-evaluatie van Fyodor Urine Malaria Test (UMT)

Hoofddoel:

Om de klinische prestaties (gevoeligheid en specificiteit) van Fyodor UMT te evalueren voor het detecteren van Plasmodium falciparum-malaria bij patiënten met koorts.

Secundaire doelstellingen:

• Om de tijd tot klaring van het verwante parasitaire eiwit uit de urine van de patiënt te bewaken
• Om de mogelijke effecten van proteïnurie, ontstekings- en koortswerende medicijnen op de Fyodor UMT-prestaties te beoordelen
• Om de UMT-prestaties te bepalen bij gebruik voor asymptomatische (afebriele) personen, die mogelijk drager zijn van de parasiet.

Studieontwerp:

• Gerandomiseerde klinische studie in meerdere centra
• Deelnemers zullen worden gerekruteerd uit centra voor eerstelijnsgezondheidszorg in vier lokale overheidsgebieden in de staat Lagos, en twee schistosomiasis-gemeenschappen in Abeokuta-North Local Government Area van de staat Ogun, beide in het zuidwesten van Nigeria.
• 1500 deelnemers (bestaande uit kinderen van 2-14 jaar en volwassenen van beide geslachten) met koorts (okseltemperatuur ≥37,5°C) of recente voorgeschiedenis van koorts in de afgelopen 48 uur (groep 1), 250 ogenschijnlijk "gezonde" personen (controlegroep, groep 2), en 50 patiënten met Schistosoma hematobium en reumatoïde artritis (groep 3), zullen worden aangeworven
• Binax NOW RDT-positieve patiënten zullen worden behandeld voor malaria-infectie met Artesunate-Amodiaquine of Dihydroartemisinin-Piperaquine Sulphate, volgens het nationale behandelbeleid
• Om te beoordelen of het UMT-doelantigeen na de behandeling in de urine aanwezig blijft, zullen 100 behandelde groep 1-deelnemers met zowel Binax NOW- als UMT-positieve resultaten willekeurig worden geselecteerd en gevolgd op dag 3, 7, 14, 21 en 28, met behulp van een aanpassing van het WHO (2009) Protocol voor Drug Therapeutic Efficacy Assessments (http://whqlibdoc.who.int/publications/2009/9789241597531_eng.pdf)
• Om de klinische specificiteit van de UMT te testen, zullen 250 personen van beide geslachten actief worden geworven met een asymptomatische P. falciparum malaria-infectie (blijkbaar "gezonde, normale controlegroep 2) en 50 met Schistosoma haematobium-infectie en/of reumatoïde artritis (Groep 3 ) - twee niet-gerelateerde medische aandoeningen waarvan bekend is dat ze proteïnurie bij patiënten opwekken (Lehman et al., 1975; Adebajo et al., 1994; Tighe & Carson, 1997)
• Deelnemers met een verhoogd reumafactor (RF+) testresultaat (d.w.z. RF >60 u/ml of >1:80 liter) worden in verband gebracht met ernstige reumatoïde aandoeningen. Schistosoma haematobium-infectie wordt bevestigd door microscopie met ei-identificatie of door serologie
• Deze studie van 6 maanden zal worden uitgevoerd in juli-december 2013, tijdens zowel het regenseizoen als het droge seizoen, wanneer de overdracht van malaria respectievelijk hoog en laag is.

Onderzoeksgebied:

De studie zal worden gecoördineerd door het ANDI Centre of Excellence for Malaria Diagnosis - een International Malaria Microscopy Training & RDT Quality Assurance Testing center, en een WHO/TDR/FIND Malaria Specimen Bank Site aan het College of Medicine, de Universiteit van Lagos. Het zal worden uitgevoerd in zeven basisgezondheidszorginstellingen in vier lokale overheidsgebieden in de staat Lagos. De staat Lagos ligt in het zuidwesten van Nigeria en bestaat uit dichtbevolkte stedelijke gebieden en uitgestrekte voorstedelijke gebieden. Malaria-overdracht vindt het hele jaar door plaats met periodes van intense seizoensgebonden malaria-overdracht tijdens het regenseizoen. De temperaturen zijn meestal hoog en waterpoelen die tijdens het regenseizoen worden gecreëerd, bieden broedplaatsen voor de malariavectoren, wat leidt tot epidemische uitbraken met hoge morbiditeitscijfers. De staat is endemisch voor malaria, met een piektransmissie tussen april en september.

De bemonstering voor Schistosomiasis zal worden uitgevoerd in Imalodo- en Abuletutu-schistosomiasisgemeenschappen in Abeokuta-North Local Government Area van de staat Ogun, ook in het zuidwesten van Nigeria.

Beschrijving van het onderzoeksontwerp:

De specifieke doelstellingen van de studie zijn het bepalen van de klinische gevoeligheid en specificiteit van de UMT, en het vaststellen van prestatiekenmerken van assays bij gezonde asymptomatische vrijwilligers, in vergelijking met bloeduitstrijkmicroscopie en Binax NOW-test (predikaatapparaat). Een totaal van 1.800 deelnemers, bestaande uit kinderen en volwassenen van beide geslachten met malaria-achtige koortssymptomen, patiënten met niet-gerelateerde medische aandoeningen (Schistosoma hematobium-infectie en reumatoïde artritis, evenals ogenschijnlijk "gezonde" (asymptomatische) controle-individuen zullen worden ingeschreven. Koortspatiënten met malaria-achtige symptomen zullen worden ingeschreven tijdens zowel het regenseizoen als het droge seizoen, wat veldmonsters oplevert tijdens periodes van zowel hoge als lage malaria-overdracht.

Gematchte urine- en vingerprikbloedmonsters zullen worden verzameld en getest met respectievelijk de UMT en Binax NOW en microscopie. Urine- en bloedonderzoek met respectievelijk de UMT en Binax NOW wordt geblindeerd op locatie uitgevoerd. Elk urinemonster wordt ook getest met behulp van een peilstok voor urineonderzoek en de fysisch-chemische kenmerken (pH, eiwit, suiker, soortelijk gewicht, enz.) worden geregistreerd. Van het bloedmonster worden per deelnemer twee dunne en dikke bloeduitstrijkjes (gemaakt op hetzelfde glaasje) gemaakt. Eén dia zal onafhankelijk worden gelezen door twee microscopisten in het ANDI Centre of Excellence for Malaria Diagnosis, een internationaal gerenommeerd trainings- en verwijzingscentrum voor malariamicroscopie. Het tweede objectglaasje zal worden gearchiveerd voor toekomstige kwaliteitsborging en daarna samen met de resterende urinemonsters naar Fjodor worden verzonden. Volgens afspraak zal het microscopisch lezen van bloeduitstrijkjes worden gebruikt als de gouden standaard voor de diagnose van malaria. Patiënten die positief testen met Binax NOW zullen worden behandeld met Artesunate-Amodiaquine of Dihydroartemisinin-Piperaquine Sulphate. Er zal geen klinische beslissing worden genomen op basis van alleen de UMT-resultaten. Desalniettemin zullen de standaard routinematige diagnostische malariatests worden gebruikt om de patiënt te behandelen in de faciliteit waar ze zich presenteren. De algehele overeenstemming van de UMT en Binax NOW met microscopieanalyse zal worden gebruikt om de UMT-gevoeligheid, specificiteit en substantiële gelijkwaardigheid/non-inferioriteit ten opzichte van de Binax NOW-test vast te stellen.

UMT-testprocedure:

• Voeg vlak voor het testen 200 µl van de vers opgevangen urine toe aan een reageerbuisje van 1,5 ml of 2 ml
• Doop de UMT-strip in het urinemonster en laat het monster gedurende 10 minuten opzuigen en de strip verzadigen
• Verwijder de strip van het urinemonster en plaats deze op de folieverpakking
• Laat de reactie 20 minuten voortduren
• Noteer het resultaat als positief (POS; zowel test- als controlelijnen verschijnen), negatief (NEG; alleen de controlelijn verschijnt) of ongeldig (INV; controlelijn verschijnt niet).

Studiekwaliteitszorg:

Deze studie zal worden uitgevoerd in overeenstemming met goede klinische praktijken.

• Training op locatie: alle onderzoekers, technici en onderzoeksmedewerkers die aan dit UMT-onderzoek werken, zullen worden opgeleid en gecertificeerd voor het uitvoeren van onderzoeken met menselijke proefpersonen volgens de ICH-richtlijnen
• Locatiebezoeken: Site-monitoringbezoeken zullen worden uitgevoerd volgens de richtlijnen uiteengezet in het onderzoeksprotocol
• Verblinding van resultaten: Er zullen aparte teams worden georganiseerd om patiëntregistratie, laboratoriumtests (Binax NOW), diagnostische microscopie, gegevensinvoer en gegevensanalyse uit te voeren
• Controle UMT-testen: bekende positieve en negatieve controlematerialen zullen worden gebruikt om de UMT-prestaties dagelijks te verifiëren
• Gegevensverzameling: Onderzoekspersoneel vult bij elk bezoek alle gegevensverzamelingsformulieren in, zelfs als een deelnemer niet alle tests heeft ondergaan; gemiste follow-upbezoeken worden, indien van toepassing, gedocumenteerd op de casusrapportformulieren
• De studiecoördinator geeft leiding aan het veldonderzoekspersoneel en biedt dagelijkse administratieve ondersteuning op de studielocaties
• De Study Quality Assurance Coordinator is gekwalificeerd door training en ervaring en zal de uitvoering van het onderzoek controleren om ervoor te zorgen dat het goedgekeurde studieprotocol wordt nageleefd.

Deze klinische studie zal worden uitgevoerd in overeenstemming met het onderzoeksprotocol zoals goedgekeurd door de Research Grants & Experimentation Ethics Committee van het College of Medicine University of Lagos, Nigeria, de richtlijnen van de Nigerian Health Research Ethics Committee, de ICH Harmonized Tripartite Guideline for Good Clinical Practice en 45CFR46 en 21CFR50, de WHO-FIND-CDC Malaria RDT Product Testing Methods Manual (versie 3), de verkorte of niet-significante risicobepaling van de Investigational Device Exemptions (IDE) Regulations (21 CFR Part 812.2(b)), de Regelgeving voor de bescherming van menselijke proefpersonen, waaronder subdeel B Geïnformeerde toestemming van menselijke proefpersonen (21 CFR Part 50), de Institutional Review Board Regulations (21 CFR Part 56); en de Financial Disclosure by Clinical Investigators Regulations (21 CFR Part 54).