Avaliação do Desempenho Clínico do Teste de Malária de Urina Fyodor (UMT)

Objetivo primário:

Avaliar o desempenho clínico (sensibilidade e especificidade) do Fyodor UMT na detecção de malária por Plasmodium falciparum em pacientes febris.

Objetivos Secundários:

• Para monitorar o tempo de eliminação da proteína do parasita cognato da urina do paciente
• Avaliar os efeitos potenciais de proteinúria, inflamação e medicamentos antifebre no desempenho do Fyodor UMT
• Determinar o desempenho do UMT quando usado em indivíduos assintomáticos (afebris), que podem ser portadores do parasita.

Design de estudo:

• Estudo clínico randomizado multicêntrico
• Os participantes serão recrutados em centros de saúde primários em quatro áreas do governo local no estado de Lagos e duas comunidades de esquistossomose na área de governo local de Abeokuta-Norte do estado de Ogun, ambas no sudoeste da Nigéria
• 1500 participantes (crianças de 2 a 14 anos e adultos de ambos os sexos) com febre (temperatura axilar ≥37,5°C) ou história recente de febre nas últimas 48 horas (Grupo 1), 250 indivíduos aparentemente "saudáveis" (Controle, Grupo 2) e 50 pacientes com Schistosoma hematobium e artrite reumatoide (Grupo 3) serão recrutados
• Os pacientes com Binax NOW RDT-positivo serão tratados para infecção por malária com Artesunate-Amodiaquine ou Dihydroartemisinin-Piperaquine Sulphate, seguindo a política nacional de tratamento
• Para avaliar se o antígeno alvo UMT persiste na urina após o tratamento, 100 participantes tratados do Grupo 1 com resultados positivos de Binax NOW e UMT serão selecionados aleatoriamente e acompanhados nos dias 3, 7, 14, 21 e 28, usando uma adaptação de Protocolo da OMS (2009) para avaliações de eficácia terapêutica de medicamentos (http://whqlibdoc.who.int/publications/2009/9789241597531_eng.pdf)
• Para testar a especificidade clínica do UMT, o recrutamento ativo incluirá 250 indivíduos de ambos os sexos com infecção assintomática por P. falciparum malária (aparentemente "grupo de controle normal e saudável 2) e 50 com infecção por Schistosoma haematobium e/ou artrite reumatóide (Grupo 3 ) - duas condições médicas não relacionadas conhecidas por provocar proteinúria em pacientes (Lehman et al., 1975; Adebajo et al., 1994; Tighe & Carson, 1997)
• Participantes com resultado de teste de Fator Reumatóide (RF+) elevado (ou seja, FR >60 u/mL ou >1:80 litro) estão associados a doença reumatóide grave. A infecção por Schistosoma haematobium é confirmada por microscopia com identificação de ovos ou por sorologia
• Este estudo de 6 meses será implementado de julho a dezembro de 2013, durante as estações chuvosa e seca, quando a transmissão da malária é alta e baixa, respectivamente.

Área de estudo:

O estudo será coordenado pelo Centro de Excelência ANDI para Diagnóstico de Malária - um Centro Internacional de Treinamento em Microscopia de Malária e Teste de Garantia de Qualidade RDT, e um Banco de Espécimes de Malária WHO/TDR/FIND na Faculdade de Medicina da Universidade de Lagos. Será realizado em sete unidades de saúde primária em quatro áreas do governo local no estado de Lagos. O estado de Lagos está situado na parte sudoeste da Nigéria e é composto por áreas urbanas densamente povoadas e extensas áreas suburbanas. A transmissão da malária ocorre ao longo do ano com períodos de intensa transmissão sazonal da malária durante a estação chuvosa. As temperaturas são geralmente altas e as poças de água criadas durante a estação chuvosa fornecem locais de reprodução para os vetores da malária, levando a surtos epidêmicos com altas taxas de morbidade. O estado é endêmico para malária, com pico de transmissão entre abril e setembro.

A amostragem para esquistossomose será realizada nas comunidades de esquistossomose de Imalodo e Abuletutu na área de governo local de Abeokuta-Norte do estado de Ogun, também no sudoeste da Nigéria.

Descrição do Projeto de Estudo:

Os objetivos específicos do estudo são determinar a sensibilidade e especificidade clínica do UMT e estabelecer as características de desempenho do ensaio em voluntários saudáveis ​​assintomáticos, em comparação com a microscopia de esfregaço de sangue e o teste Binax NOW (dispositivo Predicate). Serão inscritos um total de 1.800 participantes, incluindo crianças e adultos de ambos os sexos apresentando sintomas de febre semelhante à malária, pacientes com condições médicas não relacionadas (infecção por Schistosoma hematobium e artrite reumatóide, bem como indivíduos de controle aparentemente "saudáveis" (assintomáticos). Pacientes febris com sintomas semelhantes à malária serão inscritos durante as estações chuvosa e seca, produzindo amostras de campo durante os períodos de alta e baixa transmissão da malária.

Amostras de sangue correspondentes de urina e picada no dedo serão coletadas e testadas usando UMT, Binax NOW e microscopia, respectivamente. Os exames de urina e sangue com UMT e Binax NOW, respectivamente, serão realizados no local de forma cega. Cada amostra de urina também será testada usando uma vareta de análise de urina e suas características físico-químicas (pH, proteína, açúcar, gravidade específica, etc) são registradas. Duas lâminas de esfregaço de sangue finas e grossas (preparadas na mesma lâmina) por participante serão preparadas a partir da amostra de sangue. Uma lâmina será lida independentemente por dois microscopistas do Centro de Excelência em Diagnóstico de Malária da ANDI, um centro de treinamento e referência internacional em microscopia de malária. A segunda lâmina será arquivada para fins de garantia de qualidade futura e, posteriormente, enviada para Fyodor junto com as amostras de urina restantes. Por convenção, a leitura microscópica de esfregaços de sangue será usada como padrão-ouro para o diagnóstico da malária. Os pacientes com teste positivo para Binax NOW serão tratados com Artesunato-Amodiaquina ou Diidroartemisinina-Piperaquina Sulfato. Nenhuma decisão clínica será tomada com base apenas nos resultados do UMT. No entanto, os testes de diagnóstico de malária de rotina padrão serão usados ​​para controlar o paciente na unidade onde eles se apresentam. A concordância geral do UMT e do Binax NOW para a análise de microscopia será usada para estabelecer a sensibilidade, especificidade e equivalência/não inferioridade substancial do UMT ao teste Binax NOW.

Procedimento de teste UMT:

• Adicione 200 µl da urina recém coletada em um tubo de ensaio de 1,5 ml ou 2 ml imediatamente antes do teste
• Mergulhe a tira UMT na amostra de urina e deixe a amostra absorver e saturar a tira por 10 minutos
• Remova a tira da amostra de urina e coloque em sua embalagem de bolsa de alumínio
• Deixe a reação prosseguir por 20 minutos
• Registre o resultado como positivo (POS; ambas as linhas de teste e controle aparecem), negativo (NEG; apenas a linha de controle aparece) ou inválido (INV; a linha de controle não aparece).

Garantia de qualidade do estudo:

Este estudo será conduzido de acordo com as boas práticas clínicas.

• Treinamento no local: Todos os investigadores, técnicos e equipe de pesquisa que trabalham neste estudo UMT serão treinados e certificados na condução de estudos envolvendo seres humanos de acordo com as diretrizes do ICH
• Visitas ao local: As visitas de monitoramento ao local serão realizadas de acordo com as diretrizes descritas no protocolo do estudo
• Cegueira de resultados: Equipes separadas serão organizadas para conduzir a inscrição de pacientes, testes laboratoriais (Binax NOW), microscopia diagnóstica, entrada de dados e análise de dados
• Teste UMT de controle: materiais de controle positivos e negativos conhecidos serão usados ​​para verificar o desempenho do UMT diariamente
• Coleta de dados: A equipe de pesquisa preencherá todos os formulários de coleta de dados em cada visita, mesmo que um participante não tenha concluído todos os testes; visitas de acompanhamento perdidas serão documentadas, conforme apropriado, nos formulários de relatório de caso
• O Coordenador do Estudo gerenciará a equipe de pesquisa de campo e fornecerá suporte administrativo nos locais de estudo no dia-a-dia
• O Coordenador de Garantia de Qualidade do Estudo é qualificado por treinamento e experiência e monitorará a condução do estudo para garantir a conformidade com o protocolo de estudo aprovado.

Este estudo clínico será conduzido de acordo com o protocolo do estudo aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa e Experimentação da Faculdade de Medicina da Universidade de Lagos, Nigéria, as diretrizes do Comitê de Ética em Pesquisa em Saúde da Nigéria, a Diretriz Tripartite Harmonizada ICH para Boas Práticas Clínicas e 45CFR46 e 21CFR50, o WHO-FIND-CDC Malaria RDT Product Testing Methods Manual (Versão 3), a provisão de risco abreviado ou não significativo dos Regulamentos de Isenções de Dispositivos Investigacionais (IDE) (21 CFR Parte 812.2(b)), o Regulamentos de Proteção de Seres Humanos, incluindo Subparte B Consentimento Informado de Seres Humanos (21 CFR Parte 50), os Regulamentos do Conselho de Revisão Institucional (21 CFR Parte 56); e os Regulamentos de Divulgação Financeira por Investigadores Clínicos (21 CFR Parte 54).