Evaluación del rendimiento clínico de la prueba de paludismo en orina de Fyodor (UMT)

Objetivo primario:

Evaluar el desempeño clínico (sensibilidad y especificidad) de Fyodor UMT para detectar malaria por Plasmodium falciparum en pacientes febriles.

Objetivos secundarios:

• Para controlar el tiempo hasta la eliminación de la proteína del parásito afín de la orina del paciente
• Evaluar los efectos potenciales de la proteinuria, la inflamación y los medicamentos contra la fiebre en el rendimiento de la UMT de Fyodor
• Para determinar el rendimiento de la UMT cuando se utiliza para individuos asintomáticos (afebriles), que pueden ser portadores del parásito.

Diseño del estudio:

• Estudio clínico multicéntrico aleatorizado
• Los participantes serán reclutados de los centros de atención primaria de la salud en cuatro áreas del gobierno local en el estado de Lagos y dos comunidades de esquistosomiasis en Abeokuta-Área del gobierno local del norte del estado de Ogun, ambas en el suroeste de Nigeria.
• 1500 participantes (entre niños de 2 a 14 años y adultos de ambos sexos) con fiebre (temperatura axilar ≥37,5°C) o historia reciente de fiebre en las últimas 48 horas (Grupo 1), 250 individuos aparentemente "sanos" (Control, Grupo 2), y se reclutarán 50 pacientes con Schistosoma hematobium y Artritis reumatoide (Grupo 3).
• Los pacientes Binax NOW RDT positivos serán tratados por infección de malaria con artesunato-amodiaquina o dihidroartemisinina-sulfato de piperaquina, siguiendo la política de tratamiento nacional
• Para evaluar si el antígeno objetivo de UMT persiste en la orina después del tratamiento, se seleccionarán al azar 100 participantes del Grupo 1 tratados con resultados positivos de Binax NOW y UMT y se les realizará un seguimiento los días 3, 7, 14, 21 y 28, utilizando una adaptación de el Protocolo de la OMS (2009) para la Evaluación de la Eficacia Terapéutica de Medicamentos (http://whqlibdoc.who.int/publications/2009/9789241597531_eng.pdf)
• Para probar la especificidad clínica de la UMT, el reclutamiento activo incluirá 250 individuos de ambos sexos con infección asintomática de paludismo por P. falciparum (aparentemente "grupo de control 2 sano y normal) y 50 con infección por Schistosoma haematobium y/o artritis reumatoide (Grupo 3 ) - dos condiciones médicas no relacionadas que se sabe que provocan proteinuria en los pacientes (Lehman et al., 1975; Adebajo et al., 1994; Tighe & Carson, 1997)
• Participantes con resultado de prueba de factor reumatoide (RF+) elevado (es decir, FR >60 u/mL o >1:80 litros) se asocian con enfermedad reumatoide grave. La infección por Schistosoma haematobium se confirma por microscopía con identificación de huevos o por serología
• Este estudio de 6 meses se implementará de julio a diciembre de 2013, durante las estaciones lluviosa y seca, cuando la transmisión de la malaria es alta y baja, respectivamente.

Área de estudio:

El estudio será coordinado por el Centro de Excelencia ANDI para el Diagnóstico de Malaria, un centro internacional de pruebas de control de calidad y capacitación en microscopía de malaria, y un banco de especímenes de malaria de la OMS/TDR/FIND en la Facultad de Medicina de la Universidad de Lagos. Se llevará a cabo en siete centros de atención primaria de la salud en cuatro áreas del gobierno local en el estado de Lagos. El estado de Lagos está situado en la parte suroeste de Nigeria y está formado por áreas urbanas densamente pobladas y áreas suburbanas en expansión. La transmisión de malaria ocurre durante todo el año con períodos de intensa transmisión estacional de malaria durante la temporada de lluvias. Las temperaturas suelen ser altas y los charcos de agua que se crean durante la temporada de lluvias proporcionan lugares de reproducción para los vectores de la malaria, lo que provoca brotes epidémicos con altas tasas de morbilidad. El estado es endémico para la malaria, con un pico de transmisión entre abril y septiembre.

El muestreo para la esquistosomiasis se llevará a cabo en las comunidades de esquistosomiasis de Imalodo y Abuletutu en el área de gobierno local de Abeokuta-Norte del estado de Ogun, también en el suroeste de Nigeria.

Descripción del diseño del estudio:

Los objetivos específicos del estudio son determinar la sensibilidad y especificidad clínicas de la UMT y establecer las características de rendimiento del ensayo en voluntarios sanos asintomáticos, en comparación con la microscopía de frotis de sangre y la prueba Binax NOW (dispositivo predicado). Se inscribirá un total de 1.800 participantes, incluidos niños y adultos de ambos sexos que presenten síntomas de fiebre similares a la malaria, pacientes con afecciones médicas no relacionadas (infección por Schistosoma hematobium y artritis reumatoide), así como individuos de control aparentemente "sanos" (asintomáticos). Los pacientes febriles con síntomas similares a los de la malaria se inscribirán durante las estaciones lluviosa y seca, y se obtendrán muestras de campo durante los períodos de transmisión alta y baja de la malaria.

Se recolectarán y analizarán muestras de orina y sangre por punción digital combinadas utilizando UMT, Binax NOW y microscopía, respectivamente. Los análisis de orina y sangre con UMT y Binax NOW, respectivamente, se realizarán in situ de forma ciega. Cada muestra de orina también se analizará con una tira reactiva de análisis de orina y se registrarán sus características fisicoquímicas (pH, proteína, azúcar, gravedad específica, etc.). Se prepararán dos frotis de sangre finos y gruesos (preparados en el mismo portaobjetos) por participante a partir de la muestra de sangre. Una diapositiva será leída de forma independiente por dos microscopistas en el Centro de Excelencia para el Diagnóstico de Malaria de ANDI, un centro de capacitación y referencia internacionalmente reconocido para microscopía de malaria. El segundo portaobjetos se archivará para garantizar la calidad en el futuro y, posteriormente, se enviará a Fyodor junto con las muestras de orina restantes. Por convención, la lectura microscópica de frotis de sangre se utilizará como estándar de oro para el diagnóstico de la malaria. Los pacientes que den positivo con Binax NOW serán tratados con artesunato-amodiaquina o dihidroartemisinina-sulfato de piperaquina. No se tomará ninguna decisión clínica basada únicamente en los resultados de UMT. No obstante, se utilizarán las pruebas de diagnóstico de malaria de rutina estándar para manejar al paciente en el centro donde se presente. El acuerdo general de UMT y Binax NOW para el análisis microscópico se utilizará para establecer la sensibilidad, la especificidad y la equivalencia/no inferioridad sustanciales de UMT con respecto a la prueba Binax NOW.

Procedimiento de prueba UMT:

• Agregue 200 µl de la orina recién recolectada en un tubo de ensayo de 1,5 ml o 2 ml inmediatamente antes de la prueba.
• Sumerja la tira UMT en la muestra de orina y permita que la muestra absorba y sature la tira durante 10 minutos.
• Retire la tira de la muestra de orina y colóquela en su empaque de bolsa de aluminio.
• Deje que la reacción proceda durante 20 minutos.
• Registre el resultado como positivo (POS; aparecen las líneas de prueba y de control), negativo (NEG; solo aparece la línea de control) o inválido (INV; no aparece la línea de control).

Garantía de calidad del estudio:

Este estudio se llevará a cabo de acuerdo con las buenas prácticas clínicas.

• Capacitación en el sitio: todos los investigadores, técnicos y personal de investigación que trabajen en este estudio de UMT serán capacitados y certificados en la realización de estudios que involucren sujetos humanos según las pautas de ICH
• Visitas al sitio: Las visitas de monitoreo del sitio se realizarán de acuerdo con las pautas descritas en el protocolo del estudio.
• Cegamiento de resultados: se organizarán equipos separados para realizar la inscripción de pacientes, pruebas de laboratorio (Binax NOW), microscopía de diagnóstico, ingreso de datos y análisis de datos.
• Pruebas de UMT de control: se utilizarán materiales de control positivos y negativos conocidos para verificar el rendimiento de UMT a diario.
• Recopilación de datos: el personal de investigación completará todos los formularios de recopilación de datos en cada visita, incluso si un participante no ha realizado todas las pruebas; las visitas de seguimiento perdidas se documentarán, según corresponda, en los formularios de informe de casos
• El coordinador del estudio administrará al personal de investigación de campo y brindará apoyo administrativo en los sitios de estudio en el día a día.
• El Coordinador de control de calidad del estudio está calificado por su capacitación y experiencia, y supervisará la realización del ensayo para garantizar el cumplimiento del protocolo de estudio aprobado.

Este estudio clínico se llevará a cabo de acuerdo con el protocolo de estudio aprobado por el Comité de Ética de Experimentación y Becas de Investigación de la Facultad de Medicina de la Universidad de Lagos, Nigeria, las pautas del Comité de Ética de Investigación en Salud de Nigeria, la Guía Tripartita Armonizada de Buenas Prácticas Clínicas de la ICH y 45CFR46 y 21CFR50, el Manual de métodos de prueba de productos RDT para la malaria de WHO-FIND-CDC (Versión 3), la disposición de riesgo abreviado o no significativo de las Regulaciones de Exenciones de Dispositivos en Investigación (IDE) (21 CFR Parte 812.2(b)), el Regulaciones de Protección de Sujetos Humanos, incluyendo la Subparte B Consentimiento Informado de Sujetos Humanos (21 CFR Parte 50), las Regulaciones de la Junta de Revisión Institucional (21 CFR Parte 56); y las Regulaciones de Divulgación Financiera por Investigadores Clínicos (21 CFR Parte 54).