Évaluation des performances cliniques du test de paludisme urinaire Fyodor (UMT)

Objectif principal:

Évaluer les performances cliniques (sensibilité et spécificité) de Fyodor UMT pour la détection du paludisme à Plasmodium falciparum chez les patients fébriles.

Objectifs secondaires :

• Pour surveiller le délai d'élimination de la protéine parasitaire apparentée de l'urine du patient
• Évaluer les effets potentiels de la protéinurie, de l'inflammation et des médicaments anti-fièvre sur les performances de Fyodor UMT
• Déterminer les performances de l'UMT lorsqu'il est utilisé chez des personnes asymptomatiques (fébriles), qui peuvent être porteuses du parasite.

Étudier le design:

• Étude clinique multicentrique randomisée
• Les participants seront recrutés dans des centres de soins de santé primaires de quatre zones de gouvernement local de l'État de Lagos et de deux communautés de schistosomiase dans la zone de gouvernement local d'Abeokuta-Nord de l'État d'Ogun, toutes deux situées dans le sud-ouest du Nigéria.
• 1500 participants (comprenant des enfants âgés de 2 à 14 ans et des adultes des deux sexes) ayant de la fièvre (température axillaire ≥37,5°C) ou des antécédents récents de fièvre dans les dernières 48 heures (Groupe 1), 250 individus apparemment "en bonne santé" (Contrôle, groupe 2), et 50 patients atteints de Schistosoma hematobium et de polyarthrite rhumatoïde (groupe 3), seront recrutés
• Les patients positifs à Binax NOW RDT seront traités pour une infection palustre avec de l'artésunate-amodiaquine ou de la dihydroartémisinine-sulfate de pipéraquine, conformément à la politique nationale de traitement
• Pour évaluer si l'antigène cible UMT persiste dans l'urine après le traitement, 100 participants du groupe 1 traités avec des résultats positifs pour Binax NOW et UMT seront sélectionnés au hasard et suivis les jours 3, 7, 14, 21 et 28, en utilisant une adaptation de le Protocole d'évaluation de l'efficacité thérapeutique des médicaments de l'OMS (2009) (http://whqlibdoc.who.int/publications/2009/9789241597531_eng.pdf)
• Pour tester la spécificité clinique de l'UMT, le recrutement actif comprendra 250 individus des deux sexes atteints de paludisme à P. falciparum asymptomatique (apparemment "groupe témoin sain et normal 2), et 50 avec une infection à Schistosoma haematobium et/ou une polyarthrite rhumatoïde (groupe 3 ) - deux conditions médicales non liées connues pour provoquer une protéinurie chez les patients (Lehman et al., 1975 ; Adebajo et al., 1994 ; Tighe & Carson, 1997)
• Les participants dont le résultat au test du facteur rhumatoïde (RF+) est élevé (c.-à-d. RF > 60 u/mL ou > 1:80 litre) sont associés à une maladie rhumatoïde sévère. L'infection à Schistosoma haematobium est confirmée par microscopie avec identification des œufs ou par sérologie
• Cette étude de 6 mois sera mise en œuvre de juillet à décembre 2013, pendant les saisons des pluies et sèche lorsque la transmission du paludisme est élevée et faible, respectivement.

Zone d'étude:

L'étude sera coordonnée par le Centre d'excellence ANDI pour le diagnostic du paludisme - un centre international de formation en microscopie du paludisme et de test d'assurance qualité TDR, et un site de banque d'échantillons de paludisme OMS/TDR/FIND au Collège de médecine de l'Université de Lagos. Il sera mené dans sept établissements de soins de santé primaires répartis dans quatre zones de gouvernement local de l'État de Lagos. L'État de Lagos est situé dans la partie sud-ouest du Nigéria et se compose de zones urbaines densément peuplées et de zones suburbaines tentaculaires. La transmission du paludisme se produit tout au long de l'année avec des périodes de transmission saisonnière intense du paludisme pendant la saison des pluies. Les températures sont généralement élevées et les mares d'eau créées pendant la saison des pluies fournissent des sites de reproduction pour les vecteurs du paludisme, entraînant des flambées épidémiques avec des taux de morbidité élevés. L'État est endémique pour le paludisme, avec un pic de transmission entre avril et septembre.

L'échantillonnage pour la schistosomiase sera effectué dans les communautés de schistosomiase d'Imalodo et d'Abuletutu dans la zone de gouvernement local d'Abeokuta-Nord de l'État d'Ogun, également dans le sud-ouest du Nigéria.

Description de la conception de l'étude :

Les objectifs spécifiques de l'étude sont de déterminer la sensibilité et la spécificité cliniques de l'UMT et d'établir les caractéristiques de performance du test chez des volontaires sains asymptomatiques, par rapport à la microscopie des frottis sanguins et au test Binax NOW (dispositif Predicate). Un total de 1 800 participants, comprenant des enfants et des adultes des deux sexes présentant des symptômes de fièvre de type paludisme, des patients souffrant de conditions médicales non liées (infection à Schistosoma hematobium et polyarthrite rhumatoïde), ainsi que des personnes témoins apparemment « saines » (asymptomatiques) seront recrutés. Les patients fébriles présentant des symptômes de type paludisme seront recrutés pendant la saison des pluies et la saison sèche, produisant des échantillons de terrain pendant les périodes de transmission élevée et faible du paludisme.

Des échantillons d'urine et de sang prélevés au doigt seront prélevés et testés à l'aide de l'UMT, du Binax NOW et de la microscopie, respectivement. Les tests d'urine et de sang avec l'UMT et Binax NOW, respectivement, seront effectués sur place en aveugle. Chaque échantillon d'urine sera également testé à l'aide d'une bandelette d'analyse d'urine et ses caractéristiques physico-chimiques (pH, protéines, sucre, gravité spécifique, etc.) sont enregistrées. Deux lames minces et épaisses de frottis sanguin (préparées sur la même lame) par participant seront préparées à partir de l'échantillon de sang. Une lame sera lue indépendamment par deux microscopistes du Centre d'excellence ANDI pour le diagnostic du paludisme, un centre de formation et de référence de réputation internationale pour la microscopie du paludisme. La deuxième diapositive sera archivée à des fins d'assurance qualité future, puis expédiée à Fyodor avec les échantillons d'urine restants. Par convention, la lecture microscopique des frottis sanguins sera utilisée comme référence pour le diagnostic du paludisme. Les patients testés positifs avec Binax NOW seront traités avec de l'artésunate-amodiaquine ou de la dihydroartémisinine-sulfate de pipéraquine. Aucune décision clinique ne sera prise sur la base des seuls résultats de l'UMT. Néanmoins, les tests de diagnostic de routine standard du paludisme seront utilisés pour gérer le patient dans l'établissement où il se présente. L'accord global de l'UMT et de Binax NOW sur l'analyse microscopique sera utilisé pour établir la sensibilité, la spécificité et l'équivalence/non-infériorité substantielle de l'UMT avec le test Binax NOW.

Procédure de test UMT :

• Ajouter 200 µl d'urine fraîchement collectée dans un tube à essai de 1,5 ml ou 2 ml immédiatement avant le test
• Trempez la bandelette UMT dans l'échantillon d'urine et laissez l'échantillon s'infiltrer et saturer la bandelette pendant 10 minutes
• Retirez la bandelette de l'échantillon d'urine et placez-la sur son emballage en sachet en aluminium
• Laisser la réaction se dérouler pendant 20 minutes
• Enregistrez le résultat comme positif (POS ; les lignes de test et de contrôle apparaissent), négatif (NEG ; seule la ligne de contrôle apparaît) ou invalide (INV ; la ligne de contrôle n'apparaît pas).

Assurance qualité de l'étude :

Cette étude sera menée conformément aux bonnes pratiques cliniques.

• Formation sur site : tous les enquêteurs, techniciens et membres du personnel de recherche travaillant sur cette étude UMT seront formés et certifiés dans la conduite d'études impliquant des sujets humains conformément aux directives de l'ICH
• Visites du site : les visites de surveillance du site seront effectuées conformément aux directives décrites dans le protocole de l'étude.
• Mise en aveugle des résultats : des équipes distinctes seront organisées pour effectuer le recrutement des patients, les tests de laboratoire (Binax NOW), la microscopie diagnostique, la saisie des données et l'analyse des données
• Test UMT de contrôle : des matériaux de contrôle positifs et négatifs connus seront utilisés pour vérifier quotidiennement les performances de l'UMT
• Collecte de données : le personnel de recherche remplira tous les formulaires de collecte de données à chaque visite, même si un participant n'a pas passé tous les tests ; les visites de suivi manquées seront documentées, le cas échéant, sur les formulaires de rapport de cas
• Le coordinateur de l'étude gérera le personnel de recherche sur le terrain et fournira un soutien administratif sur les sites d'étude au quotidien.
• Le coordinateur de l'assurance qualité de l'étude est qualifié par sa formation et son expérience, et surveillera la conduite de l'essai pour assurer la conformité avec le protocole d'étude approuvé.

Cette étude clinique sera menée conformément au protocole d'étude tel qu'approuvé par le comité d'éthique des subventions de recherche et d'expérimentation de la faculté de médecine de l'université de Lagos, au Nigeria, les directives du comité d'éthique de la recherche en santé du Nigeria, la directive tripartite harmonisée de l'ICH pour les bonnes pratiques cliniques et 45CFR46 et 21CFR50, le Manuel des méthodes de test des produits TDR du paludisme de l'OMS-FIND-CDC (version 3), la disposition sur les risques abrégés ou non significatifs du Règlement sur les exemptions de dispositifs expérimentaux (IDE) (21 CFR Partie 812.2(b)), le Règlement sur la protection des sujets humains, y compris la sous-partie B Consentement éclairé des sujets humains (21 CFR Part 50), le Règlement sur le Conseil d'examen institutionnel (21 CFR Part 56); et, le Financial Disclosure by Clinical Investigators Regulations (21 CFR Part 54).