Proteom nosního hlenu a imunoterapie

Nosní hlen jako obranná bariéra první linie nosní sliznice obsahuje řadu proteinů, které působí jako funkční jednotky. Nedávno jsme ukázali, že proteom nosního hlenu mezi pacienty s alergickou rýmou a zdravými kontrolami je významně pozměněn. Na proteinové úrovni je imunitní odpověď u alergické rýmy zesílena a bariérová funkce je snížena, což se odráží ve zvýšené propustnosti epitelu. Navíc existuje nepříznivá nerovnováha vrozených anti-proteáz. Proteázy v pylovém zrnu proto nemohly být adekvátně deaktivovány v hlenu, což dále poškozuje epitel, což vede k submukózní penetraci alergenů a usnadňuje prezentaci buňkám prezentujícím antigen.

Cílem tohoto projektu je ukázat změny v proteomu nosního hlenu mezi pacienty s alergickou rýmou a zdravými kontrolami během pylové a nepylové sezóny a dále zjistit, zda a pokud ano, jak se proteom mění při imunoterapii. Pro první cíl budou pacienti a zdravé kontroly zařazeni ve dvou časových bodech, a to během pylové sezóny a mimo pylové sezóny. Statistické rozdíly budou stanoveny v rámci skupin a mezi skupinami. Změny proteinu v průběhu času odrážejí, jak alergici, ale i zdravé kontroly reagují na výzvu alergenu. Výsledky by měly poskytnout náhled na možné biomarkery, které by mohly být použity pro diagnostiku a terapii. Proteinová substituce nebo inhibice může být budoucí terapií k posílení bariérové ​​funkce nosního hlenu a léčbě příznaků alergické rýmy. Bude stanoven účinek imunoterapie jako jediné kauzální terapie a pacienti reagující na léčbu budou porovnáni s nereagujícími. Předpokládáme, že respondenti budou vykazovat proteomové změny podobné zdravým podmínkám. To dále konkretizuje odlišné proteiny jako biomarkery, které by mohly být použity jako terapeutická činidla. Navíc proteomové změny by mohly být použity k predikci a monitorování terapeutického úspěchu nebo selhání a pacienti mohou být stratifikováni tak, aby byli podrobeni jiným terapeutickým strategiím, než je imunoterapie, což šetří čas a peníze.

Hlen bude odebírán speciálním odsávacím zařízením vybaveným lapačem hlenu. Poté bude provedena proteomická analýza pomocí LC MS/MS hmotnostní spektrometrie. Vyhledávání v databázi identifikuje jednotlivé proteiny a jejich funkce, původ atd. budou komentovány. Proteinové skupiny budou analyzovány cestou obohacení a shlukovou analýzou. Tímto způsobem lze vizualizovat komplexní proteomická data pro lepší pochopení globálních změn v proteinových sítích a funkcích.

Zkoumání proteomu nosního hlenu v nemocném a zdravém stavu vede k lepšímu pochopení jeho bariérové ​​funkce a reakce na alergeny. Odlišné proteiny a/nebo skupiny proteinů by mohly být použity jako biomarkery pro nové diagnostické a terapeutické přístupy. Dále by mohly být stanoveny mechanismy imunoterapie u respondérů a úspěch či selhání terapie.