Mikrobiální hodnocení čištění zubní protézy a skladování přes noc

Cíl studie

Přítomnost biofilmu – tedy strukturovaných mikrobiálních společenství, která jsou připojena k povrchu a obalena exopolymerovou matricí – na akrylových snímatelných protézách je spojována se závažnými systémovými stavy, zejména u závislých starších osob [1]. Bakterie ústní dutiny se mimo jiné podílejí na bakteriální endokarditidě [2], aspirační pneumonii [3, 4], chronické obstrukční plicní nemoci [5, 6] [1, 7]. Je poskytnut dostatek důkazů o vztahu mezi správnou ústní hygienou a celkovým systémovým zdravím.

Plak na zubních protézách je komplexní agregát obsahující více než 108 organismů na miligram a zahrnující více než 600 druhů prokaryot [8]. Různé druhy spolupracují na vytvoření symbiotického biofilmu. Biofilmy u dentálních pacientů byly rozsáhle studovány, ale existuje jen málo studií o biofilmu mikrobioty kompletních akrylových zubních náhrad [10–18]. Zdá se, že odlišné biofilmy se souvisejícími patogenními riziky jsou přítomny u „zdravých“ účastníků oproti stomatitidě postižených zubními protézami [15, 16, 18]. Nejen špatné čištění zubní náhrady, ale také nevhodné návyky, jako je nošení zubní náhrady přes noc, se ukázalo být spojeno s prevalencí stomatitidy spojené s Candidou [19, 20]. Proto se v klinických podmínkách doporučuje odstranění akrylových snímatelných zubních náhrad přes noc. Přestože jsou k dispozici doporučení pro péči o zubní protézy a jejich údržbu založená na důkazech [21], chybí pokyny pro podmínky nočního skladování zubních protéz. Výzkumníci proto provedli studii (předloženou k publikaci), aby vyhodnotili účinek různých protokolů skladování přes noc na tvorbu a zrání biofilmu zubní protézy. Výsledky této studie ukázaly, že použití čisticích tablet (Corega Tabs Anti-bacteria®, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Belgie) pro skladování akrylových snímatelných zubních náhrad přes noc snižuje hmotnost biofilmu a patogenitu zubní náhrady ve srovnání s konzervací suchou a vodou.

Protože ve výše uvedené studii nebylo prováděno žádné mechanické čištění zubní náhrady, cílem navrhované studie je vyhodnotit kombinovaný účinek mechanického čištění a podmínek skladování přes noc na mikrobiální složení a kolonizaci tvorby biofilmu zubní náhrady Candida albicans. Tyto informace jsou nutné pro vytvoření klinické směrnice pro čištění akrylových zubních protéz a jejich skladování přes noc s cílem snížit riziko, které představují patogenní mikroorganismy, zejména u pacientů upoutaných na lůžko a pacientů s oslabenou imunitou.

Výzkumné otázky

•Jaký je vliv mechanického čištění na tvorbu biofilmu na snímatelných akrylových protézách?

• Je ultrazvukové čištění účinnější ve srovnání s čištěním zubní protézy s ohledem na prevenci tvorby biofilmu na snímatelných akrylových protézách?
• Jaký vliv má noční skladování ve vodě s čisticí tabletou na tvorbu biofilmu na mechanicky čištěných snímatelných akrylových protézách?

Materiály a metody

• Účastníci -počet: 30 -Kritéria pro zařazení: Institucionalizovaný křehký stařešina Plně bezzubý v dolní a horní čelisti Nositel snímatelných zubních protéz v dolní a horní čelisti Dobré orální zdraví

  - Kritéria vyloučení: Současná léčba kortikosteroidy nebo léčba kortikosteroidy v anamnéze během 3 měsíců před studií Současná léčba nebo anamnéza antimikrobiální léčby během 3 měsíců před studií Neschopnost poskytnout informovaný souhlas Neschopnost splnit požadavky studie

• Zkušební podmínky Metoda čištění zubní protézy Podmínky skladování přes noc

  1Čištění vodou a mýdlem Ponoření do vody s čistící tabletou 2Čištění vodou a mýdlem Ponoření do vody bez čistící tablety (= negativní kontrola) 3Ultrazvukové čištění Ponoření do vody s čistící tabletou 4Ultrazvukové čištění Ponoření do vody bez čistící tablety

• Tato studie byla schválena Institucionálním etickým výborem (S54968, University Hospitals Leuven, Belgie) a zaregistrována v databázi belgických klinických studií (Identifikátor: B322201316863).

• Studovat design

  -Cross-over studie s randomizovanou sekvencí 4 testovacích podmínek To znamená, že všechny 4 testovací podmínky budou provedeny v rámci každého z 30 účastníků studie.

  • Pořadí testovacích podmínek pro jednotlivé účastníky bude náhodně vybráno.
  • Dvojité zaslepení (účastníci ani vyšetřovatelé neznají podmínky testu)
• Všechny testovací podmínky budou aplikovány po dobu 5 dnů. To znamená, že všichni pacienti podstoupí 4 testovací období po 5 dnech.
• Každému testovacímu období bude předcházet 2denní vymývací období, ve kterém bude aplikována standardní péče. Tento standard péče je čištění zubní protézy kartáčováním vodou a mýdlem a skladování přes noc ve vodě.
• Všechny zubní protézy budou před zahájením studie odvápněny pomocí octa.
• Na začátku studie budou všechny zubní náhrady mechanicky vyčištěny pomocí kartáčování zubní náhrady a dodatečného čištění ultrazvukem. Po mechanickém čištění budou zubní protézy také dezinfikovány pomocí 1% chlorhexidin diglukonátového gelu (Corsodyl gel, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Belgie).
• Po mechanickém čištění a dezinfekci zubní protézy na začátku každého testovacího období budou odebrány kontrolní vzorky (n=4), aby se vyhodnotila účinnost postupů čištění a dezinfekce.
• Po každém zkušebním období budou odebrány zkušební vzorky (n=4).
• Účastníci budou požádáni, aby si sami nečistili zubní protézy. 2 pečovatelé zapojení do studie provedou čištění zubní protézy a použijí vhodné podmínky skladování přes noc.
• Výsledná opatření:

Klinický stav sliznice nesoucí zubní protézu Metoda: klinické hodnocení Mikrobiální analýzy Metoda: kvalitativní a kvantitativní PCR analýzy pro 20 vybraných ústních bakterií (Aa, Pg, Tf, Td, Pi, Fn, Pm, Pn, Cg, Cr, En, Ec, Cs, Cc, Sm, Sg, Sc, Ao, Av, Vp) a pro Candida Albicans.

Odběr biofilmu bude proveden v zájmové kruhové oblasti o průměru 5 mm, umístěné buko-distálně k dolním druhým premolárům (obrázek 1). Aby se standardizovala poloha a rozměry této oblasti a zajistila se optimální reprodukovatelnost mikrobiálního odběru vzorků, bude vyrobena zakázková forma každé spodní protézy s vymezovacími kroužky (Optosil®, Heraeus Kulzer GmbH, Hanau, Německo) (obr. 1). Zástupné kroužky budou umístěny tak, aby přechod mezi umělými zuby a dásněmi byl situován centrálně. Tyto formy budou vyrobeny po dezinfekci zubních protéz na začátku studie a budou znovu používány v průběhu studie z důvodu absence rozměrových změn v průběhu času, pokud jsou správně konzervovány (tj. suché a v plastovém sáčku). Formy a kroužky budou po každém mikrobiálním odběru dezinfikovány.

Skóre zubního plaku Metoda: Zubní plak bude hodnocen nezávisle 2 výzkumníky s použitím 4% roztoku odhalujícího erythrosin podle Augsburgera a Elahiho [22] (rozsah skóre 0-4)

•Protokol studie Časový bod Akce Mikrobiální odběr Den 0 (ráno) odstranění zubního kamene mechanickým čištěním zubní protézy octem ° Den 0-2 standardní péče Den 3 (ráno) Mechanické čištění zubní protézy° a dezinfekce kontrolní vzorek 1* Den 3-7 testovací období 1 Den 7 (večer) Mechanické čištění zubní náhrady° a testovací vzorek dezinfekce 1** Den 8-9 standard péče (období vymývání) Den 10 (ráno) Mechanické čištění zubní náhrady° a kontrolní vzorek dezinfekce 2* Den 10-14 testovací období 2 Den 14 (večer) Mechanické čištění zubní protézy° a testovací vzorek dezinfekce 2** Den 15-16 standardní péče (období vymývání) Den 17 (ráno) Mechanické čištění zubní protézy° a kontrola dezinfekce 3* Den 17-21 testovací období 3 Den 21 (večer) Mechanické čištění zubní náhrady° a dezinfekce zkušební vzorek 3** Den 22-23 standardní péče (období vymývání) Den 24 (ráno) Mechanické čištění zubní náhrady° a kontrola dezinfekce 4* Den 24-28 testovací období 4 Den 28 (večer) Mechanické čištění zubní náhrady° a desin fectionii KONEC STUDIE testovací vzorek 4**

°mechanické čištění zubní náhrady: kartáčování vodou a mýdlem + dodatečné čištění ultrazvukem i standardní péče: čištění zubní náhrady vodou a mýdlem a skladování přes noc ve vodě na tablety iidezinfekce 1% chlorhexidin diglukonátovým gelem (Corsodyl gel, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Belgie )

*kontrolní odběr: po mechanickém čištění a dezinfekci

**zkušební odběr: před mechanickým čištěním a dezinfekcí