Valutazione microbica della pulizia della protesi e della conservazione notturna

Scopo dello studio

La presenza di un biofilm - cioè comunità microbiche strutturate che sono attaccate a una superficie e racchiuse in una matrice esopolimerica - su protesi rimovibili acriliche è stata associata a gravi condizioni sistemiche, specialmente negli anziani non autosufficienti [1]. I batteri orali sono stati implicati nell'endocardite batterica [2], nella polmonite ab ingestis [3, 4], nella broncopneumopatia cronica ostruttiva [5, 6], tra le altre malattie [1, 7]. Viene fornita ampia evidenza riguardo alla relazione tra una corretta igiene orale e la salute sistemica complessiva.

La placca sulle protesi è un aggregato complesso contenente più di 108 organismi per milligrammo e che coinvolge più di 600 specie di procarioti [8]. Le diverse specie collaborano per formare un biofilm simbiotico. I biofilm nei pazienti con denti sono stati ampiamente studiati, ma ci sono stati pochi studi sul microbiota del biofilm di protesi complete in acrilico [10-18]. Sembra che biofilm distinti, con rischi patogeni associati, siano presenti nei partecipanti "sani" rispetto a quelli affetti da stomatite da protesi [15, 16, 18]. Non solo una scarsa pulizia della protesi, ma anche abitudini inappropriate, come indossare la protesi durante la notte, hanno dimostrato di essere associate alla prevalenza di stomatite associata a Candida [19, 20]. Pertanto, la rimozione durante la notte delle protesi rimovibili in acrilico è consigliata in ambito clinico. Sebbene siano disponibili linee guida basate sull'evidenza per la cura e la manutenzione della protesi [21], mancano linee guida per le condizioni di conservazione notturna delle protesi. I ricercatori hanno quindi eseguito uno studio (inviato per la pubblicazione) per valutare l'effetto di diversi protocolli di conservazione durante la notte sulla formazione e la maturazione del biofilm della protesi. I risultati di questo studio hanno dimostrato che l'uso di compresse detergenti (Corega Tabs Anti-bacteria®, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Belgio) per la conservazione notturna di protesi rimovibili in acrilico riduce la massa del biofilm e la patogenicità della protesi rispetto alla conservazione a secco e in acqua.

Poiché nel suddetto studio non è stata eseguita alcuna pulizia meccanica della protesi, lo scopo dello studio proposto è valutare l'effetto combinato della pulizia meccanica e delle condizioni di conservazione durante la notte sulla composizione microbica e sulla colonizzazione da Candida albicans della formazione del biofilm della protesi. Queste informazioni sono necessarie per sviluppare una linea guida clinica sulla pulizia delle protesi acriliche e la conservazione durante la notte al fine di ridurre il rischio rappresentato dai microrganismi patogeni, in particolare nei pazienti costretti a letto e immunocompromessi.

Domande di ricerca

• Qual è l'effetto della pulizia meccanica sulla formazione del biofilm sulle protesi rimovibili in acrilico?

• La pulizia a ultrasuoni è più efficiente rispetto allo spazzolamento della protesi per quanto riguarda la prevenzione della formazione di biofilm su protesi acriliche rimovibili?
• Qual è l'effetto della conservazione notturna in acqua con una pastiglia detergente sulla formazione di biofilm su protesi acriliche rimovibili pulite meccanicamente?

Materiali e Metodi

• Partecipanti -numero: 30 -Criteri di inclusione: Anziano fragile istituzionalizzato Completamente edentulo nella mascella inferiore e superiore Portatore di protesi rimovibile nella mascella inferiore e superiore Buona salute orale

  -Criteri di esclusione: Trattamento antimicrobico in corso o precedente nei 3 mesi precedenti lo studio Trattamento antimicrobico in corso o precedente nei 3 mesi precedenti lo studio Incapacità di fornire il consenso informato Incapacità di soddisfare i requisiti dello studio

• Condizioni del test Metodo di pulizia della protesi Condizione di conservazione durante la notte della protesi

  1 Spazzolatura con acqua e sapone Immersione in acqua con pastiglia detergente 2 Spazzolatura con acqua e sapone Immersione in acqua senza pastiglia detergente (= controllo negativo) 3 Pulizia a ultrasuoni Immersione in acqua con pastiglia detergente 4 Pulizia a ultrasuoni Immersione in acqua senza pastiglia detergente

• Questo studio è stato approvato dall'Institutional Ethics Committee (S54968, University Hospitals Leuven, Belgium) e registrato nel Belgian Clinical Trials database (Identificativo: B322201316863).

• Progettazione dello studio

  -Studio incrociato con sequenza randomizzata delle 4 condizioni di test Ciò implica che tutte e 4 le condizioni di test saranno eseguite all'interno di ciascuno dei 30 partecipanti allo studio.

  • La sequenza delle condizioni del test per i singoli partecipanti sarà randomizzata.
  • Doppio cieco (sia i partecipanti che i ricercatori non conoscono le condizioni del test)
• Tutte le condizioni del test verranno applicate per 5 giorni. Ciò significa che tutti i pazienti saranno sottoposti a 4 periodi di prova di 5 giorni.
• Ogni periodo di test sarà preceduto da un periodo di wash-out di 2 giorni in cui verrà applicato lo standard di cura. Questo standard di cura è la pulizia della protesi attraverso la spazzolatura con acqua e sapone e la conservazione durante la notte in acqua.
• Tutte le protesi verranno decalcificate utilizzando aceto prima dell'inizio dello studio.
• All'inizio dello studio, tutte le protesi verranno pulite meccanicamente mediante spazzolatura della protesi e ulteriore pulizia ad ultrasuoni. Dopo la pulizia meccanica, le protesi saranno disinfettate anche utilizzando un gel di clorexidina digluconato all'1% (Corsodyl gel, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Belgio).
• Dopo la pulizia e la disinfezione meccanica della protesi all'inizio di ogni periodo di test, verranno prelevati campioni di controllo (n=4) per valutare l'efficacia delle procedure di pulizia e disinfezione.
• Dopo ogni periodo di prova, verranno prelevati campioni di prova (n=4).
• Ai partecipanti verrà chiesto di non pulire da soli la propria protesi. 2 assistenti coinvolti nello studio eseguiranno la pulizia della protesi e applicheranno l'appropriata condizione di conservazione durante la notte.
• Misure di risultato:

Salute clinica della mucosa portante della protesi Metodo: valutazione clinica Analisi microbiche Metodo: analisi PCR qualitative e quantitative per 20 batteri orali selezionati (Aa, Pg, Tf, Td, Pi, Fn, Pm, Pn, Cg, Cr, En, Ec, Cs, Cc, Sm, Sg, Sc, Ao, Av, Vp) e per Candida Albicans.

Il campionamento del biofilm sarà effettuato in una regione di interesse circolare di 5 mm di diametro, situata bucco-distalmente rispetto ai secondi premolari inferiori (Figura 1). Al fine di standardizzare la posizione e le dimensioni di questa regione e garantire una riproducibilità ottimale del campionamento microbico, verrà realizzato uno stampo su misura di ciascuna protesi inferiore con anelli segnaposto (Optosil®, Heraeus Kulzer GmbH, Hanau, Germania) (Figura 1). Gli anelli segnaposto saranno posizionati in modo tale che la transizione tra denti artificiali e gengive sia situata centralmente. Questi stampi saranno fabbricati dopo la disinfezione della protesi all'inizio dello studio e saranno riutilizzati durante lo studio a causa dell'assenza di cambiamenti dimensionali nel tempo se conservati correttamente (ad es. asciutto e in busta di plastica). Le muffe e gli anelli saranno disinfettati dopo ogni campionamento microbico.

Punteggio della placca della protesi Metodo: la placca della protesi sarà valutata in modo indipendente da 2 ricercatori utilizzando una soluzione di rivelazione di eritrosina al 4% secondo Augsburger ed Elahi [22] (intervallo di punteggio 0-4)

•Protocollo di studio Punto temporale Azione Campionamento microbico Giorno 0 (mattina) rimozione del tartaro con aceto pulizia meccanica della protesi ° Giorno 0-2 standard di curai Giorno 3 (mattina) Pulizia meccanica della protesi° e disinfezioneii campione di controllo 1* Giorno 3-7 periodo di prova 1 Giorno 7 (sera) Pulizia meccanica della protesi° e disinfezioneii campione di prova 1** Giorno 8-9 standard di curai (periodo di lavaggio) Giorno 10 (mattina) Pulizia meccanica della protesi° e disinfezioneii campione di controllo 2* Giorno 10-14 periodo di prova 2 Giorno 14 (sera) Pulizia meccanica della protesi° e disinfezioneii campione di prova 2** Giorno 15-16 standard di curai (periodo di lavaggio) Giorno 17 (mattina) Pulizia meccanica della protesi° e controllo disinfezioneii 3* Giorno 17-21 periodo di prova 3 Giorno 21 (sera) Pulizia meccanica della protesi° e disinfezioneii campione di prova 3** Giorno 22-23 standard di curai (periodo di lavaggio) Giorno 24 (mattina) Pulizia meccanica della protesi° e controllo disinfezioneii 4* Giorno 24-28 periodo di prova 4 Giorno 28 (sera) Pulizia meccanica della protesi° e desin fectionii FINE DELLO STUDIO campione di prova 4**

°pulizia meccanica della protesi: spazzolatura con acqua e sapone + ulteriore pulizia a ultrasuoni i standard di cura: spazzolatura della protesi con acqua e sapone e conservazione durante la notte in acqua compressa iidesinfezione con gel di clorexidina digluconato all'1% (gel di Corsodyl, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Belgio )

*campionamento di controllo: dopo pulizia meccanica e disinfezione

**campione di prova: prima della disinfezione della pulizia meccanica