Avaliação microbiana da limpeza de dentaduras e armazenamento durante a noite

Objetivo do estudo

A presença de um biofilme - ou seja, comunidades microbianas estruturadas que estão aderidas a uma superfície e envoltas em uma matriz de exopolímero - em próteses removíveis acrílicas tem sido associada a condições sistêmicas graves, especialmente em idosos dependentes [1]. As bactérias orais têm sido implicadas na endocardite bacteriana [2], pneumonia por aspiração [3, 4], doença pulmonar obstrutiva crônica [5, 6], entre outras doenças [1, 7]. Amplas evidências são fornecidas sobre a relação entre higiene bucal adequada e saúde sistêmica geral.

A placa em dentaduras é um agregado complexo contendo mais de 108 organismos por miligrama e envolvendo mais de 600 espécies de procariotos [8]. As diferentes espécies colaboram para formar um biofilme simbiótico. Os biofilmes em pacientes dentados foram estudados extensivamente, mas existem poucos estudos sobre a microbiota do biofilme de próteses totais de acrílico [10-18]. Parece que biofilmes distintos, com riscos patogênicos associados, estão presentes em participantes 'saudáveis' versus afetados por estomatite protética [15, 16, 18]. Não apenas a má limpeza da dentadura, mas também hábitos inadequados, como usar dentaduras durante a noite, provaram estar associados à prevalência de estomatite associada a Candida [19, 20]. Portanto, a remoção noturna das próteses removíveis de acrílico é recomendada em ambientes clínicos. Embora existam diretrizes baseadas em evidências para cuidados e manutenção de dentaduras [21], faltam diretrizes para condições de armazenamento noturno de dentaduras. Os pesquisadores, portanto, realizaram um estudo (enviado para publicação) para avaliar o efeito de diferentes protocolos de armazenamento durante a noite na formação e maturação do biofilme da dentadura. Os resultados deste estudo mostraram que o uso de pastilhas de limpeza (Corega Tabs Anti-bacteria®, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Bélgica) para armazenamento noturno de próteses removíveis acrílicas reduz a massa e a patogenicidade do biofilme da prótese em comparação com a preservação a seco e com água.

Como nenhuma limpeza mecânica da prótese foi realizada no estudo mencionado acima, o objetivo do estudo proposto é avaliar o efeito combinado da limpeza mecânica e da condição de armazenamento durante a noite na composição microbiana e na colonização de Candida albicans da formação do biofilme da prótese. Esta informação é necessária para desenvolver uma diretriz clínica sobre limpeza de próteses acrílicas e armazenamento durante a noite com o objetivo de reduzir o risco representado por microrganismos patogênicos, particularmente em pacientes acamados e imunocomprometidos.

Questões de pesquisa

•Qual é o efeito da limpeza mecânica na formação de biofilme em próteses removíveis de acrílico?

• A limpeza ultrassônica é mais eficiente comparada à escovação de dentaduras no que diz respeito à prevenção da formação de biofilme em próteses removíveis de acrílico?
• Qual é o efeito do armazenamento noturno em água com uma pastilha de limpeza na formação de biofilme em próteses acrílicas removíveis limpas mecanicamente?

Materiais e Métodos

• Número de participantes: 30 - Critérios de inclusão: Idoso frágil institucionalizado Totalmente edêntulo em maxilar inferior e superior Usuário de prótese removível em maxilar inferior e superior Boa saúde bucal

  - Critérios de exclusão: Tratamento atual ou histórico de tratamento com corticosteroides nos 3 meses anteriores ao estudo Tratamento atual ou histórico de antimicrobianos nos 3 meses anteriores ao estudo Incapacidade de fornecer consentimento informado Incapacidade de cumprir os requisitos do estudo

• Condições de teste Método de limpeza da dentadura Condição de armazenamento noturno da dentadura

  1Escovação com água e sabão Imersão em água com pastilha de limpeza 2Escovação com água e sabão Imersão em água sem pastilha de limpeza (= controle negativo) 3Limpeza ultrassônica Imersão em água com pastilha de limpeza 4Limpeza ultrassônica Imersão em água sem pastilha de limpeza

• Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética Institucional (S54968, University Hospitals Leuven, Bélgica) e registrado no banco de dados de Ensaios Clínicos da Bélgica (Identificador: B322201316863).

• Design de estudo

  -Estudo cruzado com sequência aleatória das 4 condições de teste Isso implica que todas as 4 condições de teste serão executadas dentro de cada um dos 30 participantes do estudo.

  • A sequência das condições de teste para os participantes individuais será aleatória.
  • Duplo cego (tanto os participantes quanto os investigadores não conhecem as condições do teste)
• Todas as condições de teste serão aplicadas por 5 dias. Isso significa que todos os pacientes serão submetidos a 4 períodos de teste de 5 dias.
• Cada período de teste será precedido por um período de wash-out de 2 dias em que o padrão de cuidado será aplicado. Este padrão de cuidado é a limpeza da dentadura por meio de escovação com água e sabão e armazenamento durante a noite em água.
• Todas as dentaduras serão descalcificadas com vinagre antes do início do estudo.
• No início do estudo, todas as dentaduras serão limpas mecanicamente por meio de escovação de dentaduras e limpeza ultrassônica adicional. Após a limpeza mecânica, as próteses também serão desinfetadas com gel de digluconato de clorexidina a 1% (gel Corsodyl, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Bélgica).
• Após a limpeza e desinfecção mecânica da prótese no início de cada período de teste, amostras de controle (n=4) serão coletadas para avaliar a eficácia dos procedimentos de limpeza e desinfecção.
• Após cada período de teste, amostras de teste (n = 4) serão coletadas
• Os participantes serão solicitados a não limpar suas dentaduras. 2 cuidadores envolvidos no estudo farão a limpeza da dentadura e aplicarão as condições apropriadas de armazenamento durante a noite.
• Medidas de resultado:

Saúde clínica da mucosa da prótese dentária Método: avaliação clínica Análises microbianas Método: análises PCR qualitativas e quantitativas para 20 bactérias orais selecionadas (Aa, Pg, Tf, Td, Pi, Fn, Pm, Pn, Cg, Cr, En, Ec, Cs, Cc, Sm, Sg, Sc, Ao, Av, Vp) e para Candida Albicans.

A amostragem do biofilme será realizada em uma região circular de interesse de 5 mm de diâmetro, situada vestíbulo-distalmente aos segundos pré-molares inferiores (Figura 1). A fim de padronizar a posição e as dimensões desta região e garantir a reprodutibilidade ideal da amostragem microbiana, será feito um molde personalizado de cada prótese inferior com anéis de substituição (Optosil®, Heraeus Kulzer GmbH, Hanau, Alemanha) (Figura 1). Os anéis de substituição serão colocados de forma que a transição entre dentes e gengivas artificiais esteja situada centralmente. Esses moldes serão fabricados após a desinfecção da dentadura no início do estudo e serão reutilizados ao longo do estudo devido à ausência de alterações dimensionais ao longo do tempo quando preservados adequadamente (ou seja, seco e em saco plástico). Os moldes e anéis serão desinfetados após cada amostragem microbiana.

Método de pontuação da placa de dentadura: A placa de dentadura será pontuada independentemente por 2 investigadores usando solução reveladora de eritrosina a 4% de acordo com Augsburger e Elahi [22] (faixa de pontuação 0-4)

•Protocolo do estudo Ponto de tempo Ação Amostra microbiana Dia 0 (manhã) remoção de cálculo usando vinagre limpeza mecânica da dentadura ° Dia 0-2 padrão de cuidados Dia 3 (manhã) Limpeza mecânica da dentadura° e desinfecçãoii amostra de controle 1* Dia 3-7 período de teste 1 Dia 7 (noite) Limpeza mecânica da dentadura° e desinfecçãoii amostra de teste 1** Dia 8-9 padrão de cuidadoi (período de lavagem) Dia 10 (manhã) Limpeza mecânica da dentadura° e desinfecçãoii amostra de controle 2* Dia 10-14 período de teste 2 Dia 14 (noite) Limpeza mecânica da dentadura° e desinfecçãoii amostra de teste 2** Dia 15-16 padrão de cuidadoi (período de lavagem) Dia 17 (manhã) Limpeza mecânica da dentadura° e desinfecçãoii controle 3* Dia 17-21 período de teste 3 Dia 21 (noite) Limpeza mecânica da dentadura° e desinfecçãoii amostra de teste 3** Dia 22-23 padrão de cuidadoi (período de lavagem) Dia 24 (manhã) Limpeza mecânica da dentadura° e desinfecçãoii controle 4* Dia 24-28 período de teste 4 Dia 28 (tarde) Limpeza mecânica da dentadura° e desinfeção fectionii FIM DO ESTUDO amostra de teste 4**

°limpeza mecânica da dentadura: escovação com água e sabão + limpeza ultrassônica adicional i padrão de cuidado: escovação da dentadura com água e sabão e armazenamento durante a noite em água potável iidesinfecção com gel de digluconato de clorexidina a 1% (gel Corsodyl, GlaxoSmithKline Consumer Healthcare SA, Genval, Bélgica )

*amostragem de controle: após limpeza mecânica e desinfecção

**amostragem de teste: antes da desinfecção de limpeza mecânica