Prospektivní dvojitě zaslepená randomizovaná kontrolovaná klinická studie v prevenci gingivitidy s OPC

Materiály a metody

Design studie a populace

Randomizovaná, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná klinická studie trvající 21 dní byla provedena mezi 20 dobrovolnými studenty zubního lékařství na univerzitě v Seville. V literatuře nebyly nalezeny žádné předchozí studie, takže pro pilotní studii bylo určeno 20 subjektů, aby ověřili naši hypotézu.

Protokol studie byl schválen Etickou komisí Univerzity v Seville. Před účastí byl všem pacientům plně vysvětlen účel a postupy a všichni účastníci dali písemný informovaný souhlas v souladu s Helsinskou deklarací. Studie byla navržena, provedena, analyzována a hlášena podle pokynů pro správnou klinickou praxi. Studie byla schválena Clinical Trials.gov Systém registrace protokolu a výsledků s číslem XXXXYY. Protokol je v případě potřeby dostupný na webu ClinicalTrials.gov.

Studie probíhala od září 2013 do ledna 2104. Nábor začal v září a základní datum proběhlo v říjnu 2013. Po 21 dnech sledování byla data zpracována a výsledky byly získány v lednu 2014.

Při pre-screeningové návštěvě byla odebrána lékařská a zubní anamnéza a screening byl proveden na základě kritérií pro zařazení a vyloučení. Kritéria pro zařazení byla: subjekty starší 18 let, muž nebo žena, dobrý celkový zdravotní stav, minimálně 20 zubů (zuby s hrubým kazem, korunované nebo rozsáhle restaurované, ortodontické páskování, pilíře nebo třetí stoličky nebyly součástí zubu počet), podepsaný informovaný souhlas před zahájením studie.

Kritéria vyloučení byla následující: Periodontální onemocnění, definované jako 4 mm a/nebo pozitivní krvácení při sondování; Těhotné nebo kojící; Subjekty s pevnou nebo snímatelnou protézou; Patologie nádoru v dutině ústní; Užívání antibiotik během 2 měsíců před zahájením studie; Přecitlivělost na červené ovoce obecně; xerostomie; aktivní kuřák; Nakažlivé-infekční patologie; Patologie se závažnými systémovými následky; Jakýkoli jiný úsudek zkoušejícího, pokud se domnívá, že ohrožuje nebo ohrožuje účastníka předmětu; Subjekty s fenylketonurií nebo alergií na aspartam; Použití jakéhokoli produktu ústní hygieny po dobu trvání studie.

Jediný zkoušející určil posouzení způsobilosti pacienta pro studii a zařazení pacientů do studie. Pacienti vhodní pro tuto studii byli individuálně náhodně rozděleni do skupin s oligomerními proanthokyanidiny, nutričním doplňkem nebo placebem pomocí programu informatiky společnosti LACER S.A.

Studie byla dvojitě zaslepená. Vyšetřující ani pacient nevěděli, do které skupiny jsou zařazeni. Výsledky byly ošetřeny jiným zkoušejícím, který ví, kteří pacienti patřili do experimentální nebo placebo skupiny. Proces maskování byl stanoven přidělením čísla každému pacientovi ve studii, léčba byla externě stejná pro pacienta a vyšetřujícího, aby nebylo možné vědět, do které skupiny patří.

Pacienti museli užívat experimentální léčbu nebo léčbu placebem každou noc po večeři a po opláchnutí vodou. Pilulka byla ponechána v ústech až do úplného rozpuštění. Během 30 minut po aplikaci nebylo dovoleno pít ani jíst. Experimentální léčba sestávala z 90 mg exocian cran 408 (ekvivalent 36 mg OPC) a 120 mg vitamínu C, zatímco placebo skupina byla složena ze stejné organoleptické látky, ale bez aktivních složek. Oba byli vzhledově podobní.

V základní fázi studie bylo u každého pacienta provedeno odstranění zubního kamene a bylo poskytnuto dostatečné množství léků pro celou studii plus deník pacienta a instrukce pro jeho správné plnění. Byla registrována zánětlivá štěrbinová tekutina (IL6) a jas gingivy.

Dvě hodnotící návštěvy se týkaly výkonu 14. a 21. dne po základní linii pro orální klinické vyšetření a pro registraci indexu Silness a Löe, indexu krvácení z dásní, indexu Tureskyho plaku, studie zánětlivé crevikulární tekutiny (IL6) a změn jasu gingiva.

Silness a Löe index

Šest zubů bylo vyšetřeno podle Ramfjordových kritérií (16-21-24-36-41-44). Byly zkoumány čtyři povrchy každého zubu, takže bylo provedeno celkem 24 měření. Tato měření byla provedením s parodontální sondou stejným vyšetřovatelem.

Index krvácení dásní

K vytvoření tohoto indexu byla použita parodontální sonda. Hodnoty stanovené pro vyšetření jsou uvedeny níže:

0 - Absence zánětu. 1 - Mírný zánět, mírná změna barvy a žádný edém dásní. Žádné krvácení při sondování. 2 - Střední zánět, zarudnutí, edém a hypertrofie dásní. Krvácení do sondy (po 10 sekundách). 3 - Těžký zánět, výrazné zarudnutí a hypertrofie. Mohou existovat ulcerace. Má sklon ke spontánnímu krvácení.

Index Tureského plaku

Bukální povrchy předních zubů byly vyšetřeny pomocí ústní vody bazického fuchsinu jako vyvíjecího činidla plaku a byl stanoven numerický bodovací systém od O do 5.

0: Neexistuje žádný plak 1: Nezávislé pruhy plaku na krčním okraji zubu. 2: tenký souvislý pruh plaku (do 1 mm) na cervikálním okraji. 3: Pás širší než jeden milimetr, ale pokrývá méně než jednu třetinu temene. 4: Deska pokrývá třetinu, ale ne více než dvě třetiny koruny. 5: Deska pokrývá dvě třetiny nebo více koruny.

Studie zánětlivé štěrbinové tekutiny (IL6)

Vzorky crevikulární tekutiny byly odebrány z mezizubních oblastí (lingvální, bukální, meziiální a distální) šesti zubů rozdělených do čtyř kvadrantů (16, 21, 24, 36, 41 a 44) pomocí 5 proužků lisovaného papíru o délce 2 cm, zejména pro křečkovitá tekutina. Doba impregnace pro každého pacienta byla 5 sekund a okamžitě byla vložena do 0,5 ml Eppendorfových mikrozkumavek s 50 ul fyziologického roztoku při 4 °C pro konzervaci. Vzorek byl transportován do biologické laboratoře v lednici a až do zpracování byl v laboratoři skladován zmrazený při -80°C.

Poté výzkumník přistoupil k analýze koncentrace (pg/ml) interleukinů 6 přítomných v každém vzorku pomocí panelů 96jamkového bioplexu značky Luminex®.

Jas gingivy

Jas gingivy byl vzat k identifikaci možných změn v barvě gingivy. Zarudnutí gingivy doprovází zánět tkáně, což je faktor, který může pomoci odlišit zánětlivé změny na této úrovni.

Svítivost gingivy byla registrována společností Micro SpectroShadeTM MHT Optic Research AG. Tento nástroj je určen pro snímání zubní barvy. Nicméně kromě barevných vodítek má SpectroShadeTM schopnost měřit jas jakékoli barvy, nejen odstínů bílé. Změna barvy gingivy byla pozorována u stejného pacienta měřením referenční barvy pro každého pacienta ve stejném bodě každé hodnotící návštěvy a bylo možné porovnat změnu ve zbarvení stejného bodu.

Zpracování statistických dat

Správa dat byla provedena pomocí statistického programu SPSS. Byla vytvořena podobná databáze jako Notebook Data Collection. Pro každou proměnnou je definován minimální a maximální rozsah a název proměnné a její hodnoty. Data jsou prezentována jako průměr ± standardní odchylka měření a p-hodnota menší než 0,05 byla považována za statisticky významnou.

Chí-kvadrát test byl proveden na kvalitativní proměnnou, T-student na kvantitativní proměnnou, podle Kolmogorova Smirnova, aby byla zajištěna normalita.

Tato studie byla schválena Etickou komisí a všechna vyšetření a léčba byla provedena se souhlasem subjektů a podle pokynů Helsinské deklarace.