Prospektywne, podwójnie ślepe, randomizowane, kontrolowane badanie kliniczne w zapobieganiu zapaleniu dziąseł za pomocą OPC

Materiał i metody

Projekt badania i populacja

Randomizowane, podwójnie ślepe, kontrolowane placebo badanie kliniczne trwające 21 dni zostało przeprowadzone wśród 20 studentów-wolontariuszy stomatologii Uniwersytetu w Sewilli. W literaturze nie znaleziono żadnych wcześniejszych badań, więc wybrano 20 osób do badania pilotażowego w celu sprawdzenia naszej hipotezy.

Protokół badania został zatwierdzony przez Komisję Etyki Uniwersytetu w Sewilli. Przed uczestnictwem cel i procedury zostały w pełni wyjaśnione wszystkim pacjentom, a wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną świadomą zgodę zgodnie z deklaracją helsińską. Badanie zostało zaprojektowane, przeprowadzone, przeanalizowane i opisane zgodnie z wytycznymi Dobrej Praktyki Klinicznej. Badanie zostało zatwierdzone przez Clinical Trials.gov System Rejestracji i Wyników Protokołu o numerze XXXXYY. Dostęp do protokołu można uzyskać w razie potrzeby na stronie ClinicalTrials.gov.

Badanie przeprowadzono w okresie od września 2013 do stycznia 2104 roku. Rekrutacja rozpoczęła się we wrześniu, a dzień bazowy przypadał na październik 2013 r. Po 21 dniach obserwacji dane zostały poddane obróbce, uzyskując wyniki w styczniu 2014 r.

Podczas wizyty wstępnej zebrano historię medyczną i dentystyczną oraz przeprowadzono badanie przesiewowe na podstawie kryteriów włączenia i wyłączenia. Kryteriami włączenia były: osoby w wieku powyżej 18 lat, mężczyźni lub kobiety, dobry ogólny stan zdrowia, co najmniej 20 zębów (zęby z dużą próchnicą, które były koronowane lub w znacznym stopniu odbudowane, ortodontyczne paski, filary lub trzecie zęby trzonowe nie zostały uwzględnione w zębie liczba), podpisana świadoma zgoda przed rozpoczęciem badania.

Kryteria wykluczenia były następujące: Choroba przyzębia, zdefiniowana jako 4 mm i/lub dodatnie krwawienie podczas sondowania; Ciąża lub karmienie piersią; Osoby ze stałą lub wyjmowaną protezą; Patologia nowotworów jamy ustnej; Stosowanie antybiotyków w okresie 2 miesięcy przed rozpoczęciem badania; Ogólna nadwrażliwość na czerwone owoce; kserostomia; Aktywny palacz; Zaraźliwe patologie zakaźne; Patologia z poważnymi reperkusjami ogólnoustrojowymi; Wszelkie inne osądy badacza, jeśli uważa on, że stwarza zagrożenie lub ryzyko dla uczestnika; Osoby z fenyloketonurią lub alergią na aspartam; Stosowanie dowolnego produktu do higieny jamy ustnej w czasie trwania badania.

Pojedynczy egzaminator określał ocenę kwalifikacji pacjenta do badania i włączenia pacjentów do badania. Pacjenci kwalifikujący się do badania zostali indywidualnie losowo przydzieleni do leczenia suplementem diety oligomerycznymi proantocyjanidynami lub do grup placebo za pomocą programu informatycznego firmy LACER S.A.

Badanie było podwójnie ślepe. Badający i pacjent nie wiedzieli, do której grupy zostali przydzieleni. Wyniki zostały opracowane przez innego badacza, który wie, którzy pacjenci należeli do grupy eksperymentalnej lub placebo. Proces maskowania został ustalony przez przypisanie numeru każdemu pacjentowi w badaniu, leczenie było zewnętrznie takie samo dla pacjenta i badającego, aby nie było wiadomo, do której grupy należy.

Pacjenci musieli przyjmować leczenie eksperymentalne lub placebo każdej nocy po obiedzie i po spłukaniu wodą. Pigułkę trzymano w ustach aż do całkowitego rozpuszczenia. Nie wolno było pić ani jeść przez 30 minut po przyjęciu leku. Eksperymentalna kuracja składała się z 90 mg egzocyjanu żurawiny 408 (co odpowiada 36 mg OPC) i 120 mg witaminy C, podczas gdy grupa placebo składała się z tej samej substancji organoleptycznej, ale bez składników aktywnych. Obaj byli do siebie podobni z wyglądu.

Na początkowym etapie badania u każdego pacjenta wykonano zabieg usunięcia kamienia nazębnego oraz podano wystarczającą ilość leków na całe badanie oraz prowadzono dzienniczek pacjenta i instrukcje jego prawidłowego wypełniania. Rejestrowano zapalny płyn szczelinowy (IL6) oraz jasność dziąseł.

Dwie wizyty oceniające wykonano w dniu 14 i 21 po okresie wyjściowym w celu badania klinicznego jamy ustnej oraz zarejestrowania wskaźnika Silness i Löe, wskaźnika krwawienia z dziąseł, wskaźnika płytki Turesky'ego, badania zapalnego płynu szczelinowego (IL6) oraz zmian jasności zębów. dziąsło.

Indeks Silnessa i Löe

Sześć zębów zbadano według kryteriów Ramfjorda (16-21-24-36-41-44 ). Zbadano cztery powierzchnie każdego zęba, wykonując w sumie 24 pomiary. Pomiary te były wykonywane sondą periodontologiczną przez tego samego lekarza.

Wskaźnik krwawienia dziąseł

Do wykonania tego wskaźnika użyto sondy periodontologicznej. Wartości ustalone do badania znajdują się poniżej:

0 - Brak stanu zapalnego. 1 - Łagodny stan zapalny, niewielka zmiana koloru i brak obrzęku dziąseł. Brak krwawienia podczas sondowania. 2 - Umiarkowany stan zapalny, zaczerwienienie, obrzęk i przerost dziąseł. Wypływa do sondy (po 10 sekundach). 3 - Ciężkie stany zapalne, wyraźne zaczerwienienie i przerost. Mogą wystąpić owrzodzenia. Skłonność do samoistnych krwawień.

Indeks płytki nazębnej Turesky'ego

Policzkowe powierzchnie zębów przednich zbadano stosując płyn do płukania jamy ustnej zawierający zasadową fuksynę jako środek wywołujący płytkę nazębną i ustalono numeryczny system punktacji od 0 do 5.

0: Brak płytki nazębnej 1: Niezależne smugi płytki nazębnej na brzegu przyszyjkowym zęba. 2: cienki ciągły pasek płytki nazębnej (do 1 mm) na krawędzi szyjki macicy. 3: Pasek o szerokości większej niż jeden milimetr, ale zakrywający mniej niż jedną trzecią korony. 4: Płyta pokrywa trzecią, ale nie więcej niż dwie trzecie korony. 5: Płyta pokrywa dwie trzecie lub więcej korony.

Badanie stanu zapalnego płynu szczelinowego (IL6)

Próbki płynu dziąsłowego pobrano z przestrzeni międzyzębowych (językowej, policzkowej, mezjalnej i dystalnej) sześciu zębów rozmieszczonych w czterech ćwiartkach (16, 21, 24, 36, 41 i 44) za pomocą 5 pasków prasowanego papieru o długości 2 cm, zwłaszcza do płyn pęcherzykowy. Czas impregnacji dla każdego pacjenta wynosił 5 sekund i natychmiast umieszczono go w 0,5 ml mikroprobówkach Eppendorf z 50 ul soli fizjologicznej w temperaturze 4°C w celu konserwacji. Transport próbki do laboratorium biologicznego odbywał się w lodówce i był przechowywany w laboratorium w temperaturze -80°C aż do przetworzenia.

Następnie badacz przystąpił do analizy stężenia (pg/ml) interleukin 6 obecnych w każdej próbce przy użyciu 96-dołkowych paneli bioplex marki Luminex®.

Jasność dziąseł

Jasność dziąsła została zmierzona w celu zidentyfikowania możliwych zmian w kolorze dziąsła. Zaczerwienieniu dziąseł towarzyszy stan zapalny tkanki, co jest czynnikiem mogącym różnicować zmiany zapalne na tym poziomie.

Jasność dziąseł zarejestrowano w firmie Micro SpectroShadeTM MHT Optic Research AG. Ten instrument jest przeznaczony do pobierania koloru zębów. Jednak oprócz przewodników po kolorach, SpectroShadeTM ma możliwość pomiaru jasności dowolnego koloru, nie tylko odcieni bieli. Zmianę koloru dziąseł obserwowano u tego samego pacjenta, mierząc kolor referencyjny dla każdego pacjenta w tym samym punkcie podczas każdej wizyty oceniającej i mając możliwość porównania zmiany zabarwienia tego samego punktu.

Obróbka danych statystycznych

Zarządzanie danymi przeprowadzono za pomocą programu statystycznego SPSS. Utworzono podobną bazę danych do Notebook Data Collection. Dla każdej zmiennej określony zakres minimalny i maksymalny oraz nazwa zmiennej i jej wartości. Dane przedstawiono jako średnią ± odchylenie standardowe pomiarów, a wartość p mniejszą niż 0,05 uznano za istotną statystycznie.

Test chi-kwadrat przeprowadzono dla zmiennej jakościowej, T-student dla zmiennej ilościowej, po Kołmogorowie Smirnowie, aby zapewnić normalność.

Badanie to zostało zatwierdzone przez Komisję Etyczną, a wszystkie badania i zabiegi wykonano za zgodą badanych i zgodnie z wytycznymi Deklaracji Helsińskiej.