Ensaio Clínico Prospectivo Duplo-Cego Randomizado Controlado na Prevenção da Gengivite com OPCs

Material e métodos

Desenho do estudo e população

Um ensaio clínico randomizado, duplo-cego, controlado por placebo, de 21 dias de duração foi realizado entre 20 estudantes voluntários de Odontologia da Universidade de Sevilla. Nenhum estudo anterior foi encontrado na literatura, então 20 sujeitos foram determinados para o estudo piloto para testar nossa hipótese.

O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Universidade de Sevilla. Antes da participação, o objetivo e os procedimentos foram totalmente explicados a todos os pacientes e todos os participantes deram consentimento informado por escrito, de acordo com a declaração de Helsinque. O estudo foi desenhado, conduzido, analisado e relatado de acordo com as diretrizes de Boas Práticas Clínicas. O estudo foi aprovado pelo Clinical Trials.gov Sistema de Registro de Protocolo e Resultados com o número XXXXYY. O protocolo pode ser acessado, se necessário, em ClinicalTrials.gov.

O estudo foi realizado entre setembro de 2013 até janeiro de 2104. O recrutamento começou em setembro e a data base ocorreu em outubro de 2013. Após 21 dias de acompanhamento, os dados foram tratados obtendo os resultados em janeiro de 2014.

Na visita de pré-triagem foram realizadas as anamneses médica e odontológica e a triagem foi realizada com base nos critérios de inclusão e exclusão. Os critérios de inclusão foram: indivíduos com mais de 18 anos, sexo masculino ou feminino, bom estado geral de saúde, mínimo de 20 dentes (dentes com cárie grosseira, coroados ou restaurados extensivamente, bandas ortodônticas, pilares ou terceiros molares não incluídos no dente contagem), consentimento informado assinado antes do início do estudo.

Os critérios de exclusão foram os seguintes: doença periodontal, definida como 4 mm e/ou sangramento positivo à sondagem; Grávida ou lactante; Sujeitos com prótese fixa ou removível; Patologia tumoral na cavidade oral; Uso de antibióticos durante o período de 2 meses antes do início do julgamento; Hipersensibilidade a frutas vermelhas em geral; Xerostomia; Fumante Ativo; Patologias contagiosas-infecciosas; Patologia com graves repercussões sistêmicas; Qualquer outro julgamento do investigador se ele acredita que põe em perigo ou coloca em risco o sujeito participante; Indivíduos com fenilcetonúria ou alergia ao aspartame; Uso de qualquer produto de higiene bucal durante o estudo.

Um único examinador determinou a avaliação da elegibilidade do paciente para o estudo e inclusão de pacientes no estudo. Os pacientes elegíveis para o estudo foram individualmente designados aleatoriamente para o tratamento com Suplemento Nutricional de Proantocianidinas Oligoméricas ou grupos de Placebo por um programa de informática da LACER S.A.

O estudo foi duplo-cego. O examinador e o paciente não sabiam em qual grupo foram alocados. Os resultados foram tratados por outro examinador que sabe quais pacientes pertenciam ao grupo experimental ou placebo. O processo de mascaramento foi estabelecido pela atribuição de um número a cada paciente do estudo, o tratamento externamente foi o mesmo para paciente e examinador para não permitir saber a qual grupo pertencia.

Os pacientes tiveram que fazer o tratamento experimental ou placebo todas as noites após o jantar e depois de enxaguar com água. O comprimido foi mantido na boca até completa dissolução. Não foi permitido beber ou comer durante 30 minutos após o tratamento. O tratamento experimental consistiu em 90 mg de exocian cran 408 (equivalente a 36 mg de OPC) e 120 mg de vitamina C, enquanto o grupo placebo foi composto pela mesma substância organoléptica, mas livre de princípios ativos. Ambos eram semelhantes na aparência.

Na fase inicial do ensaio foi realizada uma remoção de tártaro em cada paciente e foram fornecidas medicação suficiente para todo o estudo, além de um diário do paciente e instruções para o seu correto preenchimento. O fluido crevicular inflamatório (IL6) e o brilho da gengiva foram registrados.

Duas visitas de avaliação foram realizadas no dia 14 e 21 após a linha de base para um exame clínico bucal e para registrar o Silness and Löe Index, o índice de sangramento gengival, o índice de placa de Turesky, estudo inflamatório do fluido crevicular (IL6) e alterações no brilho de a gengiva.

Silness e índice de Löe

Seis dentes foram examinados de acordo com os critérios de Ramfjord (16-21-24-36-41-44 ). Quatro superfícies de cada dente foram examinadas, perfazendo um total de 24 medições feitas. Essas medidas foram realizadas com sonda periodontal pelo mesmo examinador.

Índice de sangramento gengival

Uma sonda periodontal foi usada para fazer este índice. Os valores estabelecidos para o exame encontram-se abaixo:

0 - Ausência de inflamação. 1 - Inflamação leve, leve mudança de cor e sem edema gengival. Sem sangramento à sondagem. 2 - Inflamação moderada, vermelhidão, edema e hipertrofia gengival. Sangra para sondar (após 10 segundos). 3 - Inflamação intensa, vermelhidão acentuada e hipertrofia. Pode haver ulcerações. Tende a sangramento espontâneo.

Índice de placa de Turesky

As superfícies vestibulares dos dentes anteriores foram examinadas usando um colutório de fucsina básica como agente revelador de placa e um sistema de pontuação numérica de 0 a 5 foi estabelecido.

0: Não há placa 1: Estrias independentes de placa na margem cervical do dente. 2: faixa fina e contínua de placa (até 1mm) na margem cervical. 3: Faixa com mais de um milímetro de largura, mas cobrindo menos de um terço da coroa. 4: A placa cobre um terço, mas não mais que dois terços da coroa. 5: A placa cobre dois terços ou mais da coroa.

Estudo inflamatório do líquido crevicular (IL6)

Amostras de fluido crevicular foram coletadas das áreas interdentais (lingual, vestibular, mesial e distal) de seis dentes distribuídos pelos quatro quadrantes (16, 21, 24, 36, 41 e 44) por 5 tiras de papel prensado de 2 cm de comprimento, especialmente para fluido crevicular. O tempo de impregnação de cada paciente foi de 5 segundos e imediatamente inseridos em microtubos Eppendorf de 0,5ml com 50ul de soro fisiológico a 4°C para preservação. O transporte da amostra para o laboratório biológico foi em geladeira, sendo armazenada congelada a -80°C no laboratório até ser processada.

Em seguida, o investigador passou a analisar a concentração (pg/ml) de interleucinas 6 presentes em cada amostra utilizando painéis de 96 poços da marca bioplex Luminex®.

Brilho da Gengiva

O brilho da gengiva foi levado para identificar possíveis alterações na cor gengival. A vermelhidão da gengiva acompanha a inflamação do tecido, sendo este um fator que pode ajudar a diferenciar as alterações inflamatórias a este nível.

A luminosidade da gengiva foi registrada com Micro SpectroShadeTM MHT Optic Research AG. Este instrumento é projetado para tirar a cor dental. No entanto, além de incluir guias de cores, o SpectroShadeTM tem a capacidade de medir o brilho de qualquer cor, não apenas tons de branco. A mudança na cor da gengiva foi observada dentro do mesmo paciente medindo a cor de referência para cada paciente no mesmo ponto em cada visita de avaliação e podendo comparar a mudança na coloração do mesmo ponto.

Tratamento de Dados Estatísticos

O gerenciamento dos dados foi realizado por meio do programa estatístico SPSS. Um banco de dados semelhante ao Notebook Data Collection foi criado. Para cada variável, um intervalo mínimo e máximo e o nome da variável e seus valores definidos. Os dados são apresentados como média ± desvio padrão das medidas, e um valor de p menor que 0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

O teste qui-quadrado foi realizado para a variável qualitativa, T-student para a variável quantitativa, após Kolmogorov Smirnov para assegurar a normalidade.

Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética e todos os exames e tratamentos foram realizados com o consentimento dos participantes e de acordo com as diretrizes da Declaração de Helsinque.