Léčba osteoartrózy stromální vaskulární frakcí abdominální tukové tkáně – pilotní studie

Pozadí Osteoartritida (OA) kolena je destruktivní onemocnění kloubu, které způsobuje degeneraci chrupavky, poškození základní kosti a morfologické změny kloubu1. Je to hlavní problém veřejného zdraví vzhledem k prodloužené délce života stárnoucí populace2,3. V současnosti neexistuje žádná schválená léčba, která by zvrátila morfologické změny. Konvenční léčba zahrnuje fyzioterapii, léky proti bolesti, ortézy a v konečné fázi OA chirurgickou náhradu kolenního kloubu4.

Léčba osteoartrózy pomocí Paqe 3 verze 2 stromální vaskulární frakce tukové tkáně 02-11-2015 Během posledního desetiletí začali vědci zkoumat regenerační potenciál mezenchymálních kmenových buněk (MSC) u OA5. MSC jsou multipotentní progenitorové buňky schopné dát vznik osteocytům, adipocytům, chondrocytům, myoblastům a tenocytům6. MSC byly poprvé použity k léčbě chondrálních defektů v roce 19987 a k léčbě OA v roce 20028. Od té doby byla publikována řada kazuistik a prospektivních sérií ukazujících významný krátkodobý a dlouhodobý účinek na bolest a tloušťku chrupavky5. Nedávno byla prospektivní série případů 1128 pacientů zahrnujících 1856 kloubů léčena stromální vaskulární frakcí abdominální tukové tkáně (SVF), která je bohatým zdrojem mezenchymálních kmenových buněk. 86 % léčených pacientů vykazovalo zlepšení alespoň o 50 % v modifikovaném skóre osteoartrózy kolena/kyčle (KOOS/HOOS) po 3 měsících a 129. Pouze 0,9 % pacientů nereagovalo na léčbu a nevykazovalo žádné zlepšení po léčbě. Nebyly pozorovány žádné závažné nežádoucí účinky, jako je infekce nebo tvorba nádorů9, což je v souladu s předchozími studiemi10. Nemanipulované nebo minimálně manipulované buněčné terapie byly použity v široké škále zdravotních stavů včetně: mrtvice, infarktu myokardu, Crohnovy choroby, revmatoidní artritidy a zvětšení prsou. Bylo publikováno více než 17 000 vědeckých článků popisujících léčbu více než 320 000 pacientů11. Nebyly vzneseny žádné závažné bezpečnostní problémy12.

Mezenchymální kmenové buňky mohou pocházet z kostní dřeně nebo tukové tkáně5. Většina výzkumů byla provedena na kmenových buňkách odvozených z kostní dřeně, ale v posledních letech byla publikována řada studií ukazujících slibný účinek mezenchymálních kmenových buněk odvozených z tukové tkáně (AMSC). Použitím AMSC lze z malého objemu tkáně získat velké množství buněk, čímž se zabrání nákladnému a časově náročnému procesu expandování buněk v kultuře5,9. Bylo prokázáno, že abdominální tuková tkáň má 1000krát vyšší koncentraci AMSC než jiná zkoumaná tuková tkáň9. Otevírá se tak možnost jednostupňového postupu, kdy se buňky odeberou a injikují během jedné návštěvy v ambulanci. Optimální dávka AMSC není známa, ale účinek se zdá být závislý na dávce, přičemž žádoucí jsou dávky kolem 1,0 x 108 AMSC na injekci5,9. Stromální vaskulární frakce břicha Tuková tkáň je bohatým zdrojem mezenchymálních kmenových buněk odvozených z tukové tkáně.

V roce 2014 byl spuštěn systém Lipogems jako komerční volně prodejný produkt: http://lipogems.eu/. Systém Lipogems je technologie bez enzymů vyvinutá pro zpracování lipoaspirátů v uzavřeném systému, jehož výsledkem je produkt z neexpandované tukové tkáně, který obsahuje SVF13. Před použitím tohoto produktu ve větším měřítku je zapotřebí kontrolovaná studie jeho proveditelnosti a bezpečnosti.

Cíl studie Prozkoumat proveditelnost a krátkodobé otázky bezpečnosti léčby osteoartrózy kolene intraartikulární injekcí stromální vaskulární frakce abdominální tukové tkáně (SVF) odebrané a připravené pomocí systému Lipogems.

Tímto bychom chtěli připravit cestu pro vysoce kvalitní randomizovanou kontrolovanou studii zkoumající účinnost léčby kolenní osteoartrózy s SVF s ohledem na pacientem uváděný výsledek, funkci, homeostázu kloubu a regeneraci chrupavky.

6 Léčba Pacienti účastnící se studie jsou léčeni podle dánských národních klinických směrnic pro lidi s osteoartrózou16. Absolvují tříměsíční fyzioterapii, jsou vedeni k optimální farmaceutické léčbě pomocí léků proti bolesti a lidem s BMI nad 28 je nabídnuta konzultace s dietologem.

6.1 Popis aktivní léčby Aktivní léčbou je intraartikulární injekce stromální vaskulární frakce (SVF) odebraná z pacientovy vlastní abdominální podkožní tukové tkáně. SVF se sklízí pomocí systému Lipogems.

6.1.1 Sklizeň SVF Sklizeň SVF se provádí za sterilních podmínek v ambulanci. Pacient leží vleže na vyšetřovací lavici. Oblast, ze které bude tkáň odebírána, je na kůži označena chirurgickým fixem. Oblast je cca. 8 cm (kranio-kaudální) x 20 cm (laterální) a nachází se těsně pod pupkem. Celoplošně se aplikuje lokální anestezie suspenzí Carbocainu 1%, 200ml izotonického fyziologického roztoku, adrenalinu a 10mmol Bikarbonátu. Chirurgické čištění se provádí dvakrát a aplikuje se sterilní rouška. Bodnou incizí se odběrová jehla zavede do podkožního tuku a aplikuje se odsávání. Odebírá se 20 ml až 40 ml podkožní tukové tkáně. Na konci procedury se kůže uzavře náplastí.

6.1.2 Příprava SVF k implantaci Injekční stříkačky se subkutánním aspirátem se připravují systémem Lipogems. Systém Lipogems je technologie bez enzymů vyvinutá pro zpracování různých množství lipoaspirátů v uzavřeném systému, jehož výsledkem je produkt z neexpandované tukové tkáně, který obsahuje SVF. Technologie funguje prostřednictvím mírného mechanického zmenšení velikosti tkáňového shluku. Tím se vyhnete použití jakéhokoli enzymu a dalšímu zpracování (tj. centrifugaci a subfrakční sklizni).13 6.1.3 Implantace SVF Implantace SVF se provádí za sterilních podmínek v ambulanci. Pacient je uložen vleže na vyšetřovací lavici s nataženým postiženým kolenem. Horní pól čéšky je palpován a kondyl femuru je označen chirurgickou značkou. Pomocí ultrazvuku se lokalizuje suprapattelární reces, na místo vpichu se aplikuje lokální anestezie a dvakrát se provede chirurgické čištění. Injekce SVF do suprapattelárního vybrání se provádí pomocí stříkačky 21 gauge za přímé vizualizace ultrazvukem. Na konci procedury se kůže uzavře náplastí.

6.1.4 Kontrola dávky injikovaného SVF Kontrola dávky AMSC v injikovaném SVF se provádí po injekci. V důsledku příznivého logistického uspořádání, kdy se odběr a implantace provádějí v jednokrokovém postupu, není možné počítat AMSC před injekcí. Místo toho je jeden ml roztoku odeslán na počet buněk na patologické oddělení.